羟苯磺酸钙治疗慢性移植肾肾病的疗效和机制研究＊

罗丽芳 ，寇光 ，张志勇 ，龙成美 ，罗来邦

(江西省人民医院，1、药学部；2、器官移植科；3、检验科，南昌 330006)

肾移植是终末期肾病的有效治疗手段之一，60年来国内外研究人员在提高移植后人/肾存活率方面不懈努力，但移植肾的长期存活率并不理想，十年生存率低于50%[1]，其主要原因是慢性移植肾肾病（CAN）的发生[2]。目前CAN还没有明确而有效的治疗药物。羟苯磺酸钙是一种微血管保护剂，具有降低血小板粘附和血粘度，改善微循环障碍等作用，被广泛地用于治疗慢性肾功能不全、糖尿病肾病和糖尿病眼病[3-5]，本文的目的是探讨羟苯磺酸钙对CAN患者的疗效及相关机制。

1 资料与方法

1.1 病例选择 以2015年8月至2017年8月间在我院门诊和住院治疗的66例CAN患者作为研究对象，男女患者各33例，平均年龄为41.8岁（范围33-52岁）。

1.2 纳入和排除标准 纳入标准：⑴移植1年以上，血肌酐200-300μmol/L，伴或不伴蛋白尿；⑵对上述患者常规作移植肾穿刺活检，病理诊断证实是以肾间质纤维化、肾小管萎缩为特征的CAN改变；⑶调整免疫治疗方案后血肌酐稳定4周以上无变化；⑷未使用ACEI或ARB类降压药。排除标准：⑴临床表现和病理穿刺符合急性排斥反应；⑵急性CsA/FK506中毒；⑶排除尿路梗阻、肾动脉狭窄等所致的肾功能损害；⑷过敏体质，或对多种药物过敏者；⑸因各种原因不合作，不能坚持用药者。每一位病人都事先签署知情同意，这项研究得到了江西省人民医院伦理审查委员会的批准。

1.3 方法 将符合以上标准的66例患者随机分为对照组和治疗组。两组组均使用常规综合治疗：环孢素 A（CsA）/普乐可复（FK506）+霉酚酸酯+强的松三联免疫抑制治疗，控制血压、血脂及常规对症处理。研究开始后在原常规综合治疗基础上，治疗组加用羟苯磺酸钙胶囊（500mg/次，3次/d），对照组维持原常规治疗方案，除不给予羟苯磺酸钙胶囊外，其余治疗及疗程均与治疗组相同。

1.4 指标检测 两组病例于治疗前、治疗3个月后分别检测血肌酐（SCr）、肌酐清除率（CCr）、24h 尿总蛋白（24h Upro）；同时采用ELISA法检测血内皮素-1（endothelin-1，ET-1）和尿转化生长因子β1（transforming growth factor beta 1，TGF-β1） 浓度（为了消除尿液稀释或浓缩对TGF-β1的影响，用尿肌酐浓度进行校正）。血ET-1和尿TGF-β1 ELISA试剂盒均购自武汉伊莱瑞特生物科技股份有限公司。

1.5 统计分析 采用SPSS 19.0统计软件包进行统计学分析。量资料用均数±标准差表示，两样本均数之间比较采用单因素方差分析。

2 结果

2.1 一般资料 两组患者在年龄、性别、组织配型、免疫抑制剂的使用等指标比较差异均无统计学意义(P＞0.05)，组间具有可比性，见表 1。

表1 两组患者一般资料

2.2 肾功能指标和24h Upro定量 治疗前两组的SCr、CCr和24Upro无明显差异。治疗3个月后，治疗组较治疗前和同期对照组SCr明显降低 (P<0.05)。治疗组较治疗前和同期对照组CCr明显升高(P<0.05)。治疗3个月后，治疗组24Upro较治疗前和同期对照组无明显差异(P>0.05)，见表2。

表2 两组患者肾功能指标和24h尿蛋白定量比较

2.3 尿TGF-β1和血清ET-1水平 治疗前2组的尿TGF-β1和血清ET-1水平无明显差异。治疗3个月后，治疗组尿TGF-β1和血清ET-1明显低于治疗前和同期对照组(P<0.05)，见表3。

表3 两组患者尿TGF-β1和血清ET-1水平比较

3 讨论

CAN的病因复杂，涉及到肾移植手术前后供、受体之间的一系列免疫因素以及非免疫因素[6]，如HLA位点错配、急性排斥反应、免疫抑制剂使用不当、如供肾保存冷、缺血时间过长、高血压、血脂紊乱、缺血再灌注损伤等。CAN临床表现主要是肾功能持续性下降、蛋白尿、高血压[7]。羟苯磺酸钙已有40多年的历史，初时主要用于治疗糖尿病视网膜病变，近来众多研究表明其对于糖尿病肾病也有较好的疗效[8，9]。本研究发现羟苯磺酸钙能降低血肌酐和提高肌酐清除率，提示其能明显改善CAN患者的肾功能。尽管既往研究发现羟苯磺酸钙可以通过减轻足细胞足突融合和减少足细胞的脱落，从而减轻早期糖尿病肾病蛋白尿[10]，但在本次实验中我们发现羟苯磺酸钙并未降低CAN患者的尿蛋白，其原因与CAN的病因复杂，其病理与糖尿病肾病存在差异有关。

肾脏纤维化是CAN典型的病理学特征，其发生机制主要是肾间质内细胞外基质合成与降解失衡。致纤维化因子与抗纤维化因子的相互作用、相互影响贯穿于纤维化全过程[11，12]。TGF-β1是一个关键的致纤维化因子，它通过smad蛋白介导胞内信号传导，可刺激这些细胞活化、增殖并分泌大量的Ⅰ型、Ⅲ型、Ⅳ型胶原及纤维连结蛋白和层粘蛋白等细胞外基质(extracellular matrix，ECM)成分[13-15]。近来研究表明CAN患者肾组织中TGF-β1 mRNA表达量明显升高，且尿TGF-β1的浓度与CAN的远期预后呈正相关[16，17]。本次研究我们也发现羟苯磺酸钙能降低CAN患者尿TGF-β1，提示羟苯磺酸钙可能通过降低CAN患者TGF-β1的表达，改善肾脏纤维化，从而改善肾功能。

ET-1是目前发现的最强的内源性缩血管物质，能够改变肾脏血流动力[18]，研究发现慢性移植肾肾病的大鼠肾脏中ET-1表达亦显著升高。同时，ET-1可能通过上调TGF-β1 mRNA的表达来参与CAN的发展，因此ET-1表达升高是CAN的发生原因之一[19]。既往研究表明，羟苯磺酸钙可通过降低血浆和肾皮质ET-1的水平，保护血管内皮，减轻肾脏病理损伤，保护糖尿病肾病肾脏功能[20]。基于以上研究，我们推测羟苯磺酸钙可能会通过抑制ET-1的表达从而延缓CAN的进展。我们的研究发现服用羟苯磺酸钙3个月的CAN患者血清ET-1显著降低。因此，减少ET-1的表达，可能是羟苯磺酸钙延缓CAN进展的重要机制。

综上所述，本研究发现羟苯磺酸钙对CAN有一定疗效，且其机制可能与降低TGF-β1和ET-1水平有关。本研究的病例数较少，且并未检测患者肾脏组织中TGF-β1和ET-1的表达情况，还需进一步实验来探索羟苯磺酸钙对CAN的疗效和机制。

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