血清肿瘤标志物和自身抗体与肺癌患者临床病理特征的相关性研究

刘苗苗 南岩东 陈艳丽 谢永宏 金发光

既往研究显示，近年来肺癌的患病率和病死率均呈现出递增的趋势[1-3]。由于肺癌被发现时多属于中晚期，预后较差，严重影响患者生活质量及精神状态，带来了沉重的社会负担。因此，肺癌的早发现、早诊断，早治疗对于提高肺癌患者的生存率尤为重要。肿瘤标志物与肿瘤相关抗原自身抗体已被证实与多种肿瘤的发生发展有关并广泛应用于肿瘤的临床辅助诊断中[4-6]。由于肿瘤标志物和自身抗体的种类较多，研究者们针对不同的肿瘤类型进行特定分析，目前在肺癌研究过程中检测较为一致的肿瘤标志物为CEA、FRT、NSE、CYFRA21-1、CA50、SCC和CA125；自身抗体为P53、PGP9.5、SOX2、GAGE7、GBU4-5、MAGEA1和CAGE。新近研究表明，肿瘤标志物与自身抗体在肺癌患者中的表达水平呈正相关[7-8]，可能具有检测互补作用，对肺癌早期诊断具有一定的临床价值。但针对肿瘤标志物与自身抗体的联合检测应用到具体到某个临床病理特征的相关性分析尚无研究报道。本研究旨在不同类型肺癌患者中联合肿瘤标记物与自身抗体，进而评价两者在肺癌早期诊断中的价值。

对象和方法

一、研究对象

收集我院呼吸内科2016年1月至2017年1月就诊的肺癌患者65例，其中男性患者42例，女性患者23例，中位年龄62岁；按病理类型分为腺癌(adenocarcinoma)38例，鳞癌(squamous cell carcinoma)17例，小细胞肺癌(small cell carcinoma)10例；按TNM分期为Ⅰ期7例，Ⅱ期5例，Ⅲ期12例，Ⅳ期41例。肺癌的诊断标准依据中国临床肿瘤学会(CSCO)制定的《原发性肺癌诊疗指南 2016.V1》。所有患者均未接受放化疗、靶向药物治疗或手术等治疗。

二、研究方法

所有患者均空腹抽取静脉血10 ml，置于低温离心机中，以离心半径8 cm，3 500 r/min，离心5 min后吸取上层血清，保证在8 h内完成相关检测。 7种肿瘤标志物和7种自身抗体酶联免疫(ELISA)检测试剂盒及其配套试剂盒购自杭州凯保罗公司；Synergy 2 型酶联仪(Bio-Tek公司)。严格按照试剂盒说明书,用 ELISA检测7 种肿瘤标志物和自身抗体，读取酶联检测仪位于450 nm处的吸光度(A450 nm)值，各肿瘤标志物试剂盒参考标准(U/ml或ng/ml)分别为：CEA<3.4、FRT<219、NSE<13、CYFRA21-1<3.3、CA50<24、SCC<2、CA125<35；各自身抗体试剂盒参考范围(U/ml)分别为：p53<13.1、PGP9.5<11.1、SOX2<10.3、GAGE7<14.4、GBU4-5<7.0、MAGEA1<11.9、CAGE<7.2。

三、统计学方法

结 果

一、血清肿瘤标志物与肺癌患者临床病理特征关系

FRT、CYFRA21-1在年龄≥60岁的肺癌患者具有高表达水平(t=2.205，t=2.509；P=0.031，P=0.015)；NSE、CYFRA21-1分别在小细胞肺癌、鳞癌中具有高表达水平(P<0.05)；在性别、有无吸烟、临床分期方面的不同肺癌患者与血清标志物水平无统计学差异(P>0.05)，见表1。

表1 肿瘤标志物与肺癌患者临床病理特征关系

注：aP=0.001，腺癌vs. 小细胞癌；bP=0.003，鳞癌vs. 小细胞癌；cP<0.001，腺癌vs. 鳞癌；dP=0.005，鳞癌vs. 小细胞癌

二、自身抗体与肺癌患者临床病理特征关系

P53表达水平与肺癌临床分期有统计学差异(F=3.367，P=0.024)，Ⅲ期肺癌患者的P53表达水平最高；年龄、性别、有无吸烟、病理类型方面的不同肺癌患者与自身抗体水平无统计学差异(P>0.05)，见表2。

三、血清肿瘤标志物与自身抗体在肺癌患者病理类型中的关联性

腺癌中，CEA与GBU4-5正相关(r=0.343，P=0.038)，FRT与PGP9.5、SOX2正相关(r=0.375，r=0.399；P=0.020，P=0.013)，CYFRA21-1与P53、PGP9.5、SOX2正相关(r=0.376，r=0.378，r=0.405；P=0.024，P=0.023，P=0.014)，SCC与PGP9.5、SOX2正相关(r=0.385，r=0.340；P=0.017，P=0.037)，见表3；鳞癌中，CEA与GAGE7正相关(r=0.578，P=0.015)，NSE与GBU4-5、MAGE A1正相关(r=0.514，r=0.556；P=0.042，P=0.025)，CYFRA21-1与PGP9.5、GAGE7正相关(r=0.559，r=0.512；P=0.024，P=0.043)，而小细胞肺癌中，肿瘤标记物与自身抗体不具有相关性，见表4。

表2 自身抗体与肺癌患者临床病理特征关系

注：aP=0.011，Ⅰ期vs. Ⅲ期；bP=0.023，Ⅱ期vs. Ⅲ期；cP=0.012，Ⅲ期vs. Ⅳ期

四、血清肿瘤标志物与自身抗体在肺癌患者临床分期中的关联性

临床分期方面，Ⅰ期肺癌患者CA50与P53、SOX2之间负相关(r=-0.857，r=-0.857；P=0.014，P=0.014)，CA125与GBU4-5、CAGE之间负相关(r=-0.886，r=-0.857；P=0.019，P=0.014)，见表5；Ⅱ期肺癌患者CEA与MAGE A1负相关(r=-0.900，P=0.037)，FRT与P53、PGP9.5、GBU4-5正相关(r=0.900，r=0.900，r=0.900；P=0.037，P=0.037，P=0.037)，CA50与MAGE A1，CA125与GAGE7之间均为负相关(r=-1.000，P=0.000；r=-1.000，P=0.000)，见表6；Ⅲ期肺癌患者CEA与P53、CAGE正相关(r=0.650，r=0.673；P=0.022，P=0.017)，NSE与P53、PGP9.5、MAGE A1之间正相关(r=0.645，r=0.642，r=0.636；P=0.032，P=0.033，P=0.035)，CYFRA21-1与P53、PGP9.5、CAGE间正相关(r=0.609，r=0.716，r=0.651；P=0.047，P=0.013，P=0.030)，SCC与GBU4-5、CAGE间正相关(r=0.700，r=0.591；P=0.011，P=0.043)，见表7；Ⅳ期肺癌患者CYFRA21-1与PGP9.5，SCC与SOX2之间均为正相关(r=0.321，P=0.044；r=0.361，P=0.044)，见表8。

表3 肿瘤标志物与自身抗体在腺癌患者中的关联性(n=65)

表4 肿瘤标志物与自身抗体在鳞癌患者病理中的关联性(n=65)

表5 肿瘤标志物与自身抗体在Ⅰ期患者中的关联性(n=65)

表6 肿瘤标志物与自身抗体在Ⅱ期患者中的关联性(n=65)

表7 肿瘤标志物与自身抗体在Ⅲ期患者中的关联性(n=65)

表8 肿瘤标志物与自身抗体在Ⅳ期患者中的关联性(n=65)

讨 论

肺癌由于恶性程度高，早期发现难等特点，其预后和5年生存率并不理想，已成为严重威胁人类健康的主要疾病之一[9]。既往研究表明血清肿瘤标志物与自身抗体具有肺癌辅助诊断作用，并且肿瘤标记物在临床工作中扮演着评估疗效及病情监测的角色[10]。理想的血清分子标记物应具有高灵敏度且与患者的临床病理特征相关，才能更好在早期肺癌筛查、诊断及预后中起到事半功倍的作用。

本研究中，我们观察到7项血清肿瘤标志物中FRT、CYFRA21-1在老年患者中表达较高，可能是随年龄增加，FRT、CYFRA21-1在肺癌患者体内合成增高所致。既往有报道称，FRT在肿瘤早期合成量明显增加[11-12]，故FRT在老年患者早期肺癌中可能具有一定的诊断价值，这与本研究结果较一致。而吸烟史及性别因素对肿瘤标志物在肺癌中的诊断无临床意义。关于肿瘤标志物对肺癌病理类型鉴别结果显示，NSE表达水平在小细胞肺癌中明显高于鳞癌和腺癌，鳞癌的CYFRA21-1表达水平明显高于小细胞肺癌和腺癌，然而CEA、NSE、CA50、SCC、CA125在肺癌患者病理类型方面不具有统计学差异。Molina等[13]也得出相同结论，并认为联合检测NSE与CYFRA21-1对于鉴别NSCLC与SCLC具有较高的准确度。既往有研究显示，Ⅳ期腺癌患者CEA血清浓度较Ⅰ-Ⅲ期者升高，Ⅳ期NSCLC患者的CYFRA 21-1血清浓度升高明显[14]，NSE主要对广泛期SCLC患者具有较好诊断作用。然而本研究未发现肿瘤标记物与肺癌临床分期之间的相关性，考虑与研究样本量较小有关，才未得出TNM分期越晚，肿瘤标记物血清浓度越高的结论，可能需在大样本条件下进一步研究肺癌分期与血清肿瘤标记物之间的关系。

自身抗体检测结果显示，肺癌患者在年龄、性别、有无吸烟史方面与自身抗体表达水平无相关性。同时不同病理类型的肺癌患者亦与自身抗体水平之间无统计学差异，PGP9.5、SOX2、GAGE7、GBU4-5、MAGEA1和CAGE 6项自身抗体与肺癌临床分期无统计学差异，证明6项自身抗体检测不易受临床基线资料影响，可广泛应用于早期肺癌诊断中。P53表达水平在Ⅲ期明显高于其他阶段，提示P53可能为肺癌发展的早期标志物。Chapman 等[15]观察到P53、CAGE和GBU4-5在Ⅰ-Ⅱ期NSCLC与SOX2在SCLC中灵敏度及特异度均较高，可作为肺癌早期辅助诊断指标。Hibi等[16]也报道PGP9.5的表达与癌变的病理阶段有密切联系。出现分歧可能由于本研究对象数量过少、未进行前瞻随机研究以及种族不同所引起。

有研究表明对早期NSCLC患者使用CEA，CA125和CYFRA21-1和一种自身抗体(NY-ESO-1)联合检测[17]，能提高肺癌早期诊断敏感性，这为我们联合肿瘤标志物和自身抗体提供了可行性依据。两者联合检测在腺癌与鳞癌中呈正相关，CEA与GBU4-5，FRT与PGP9.5、SOX2，CYFRA21-1与P53、PGP9.5、SOX2，SCC与PGP9.5、SOX2分别在腺癌中呈正相关。CEA与GAGE7，NSE与GBU4-5、MAGE A1，CYFRA21-1与PGP9.5、GAGE7分别在鳞癌中呈正相关。尤其是CYFRA21-1与PGP9.5联合可提高对非小细胞肺癌的检出。CYFRA21-1是细胞角蛋白中间丝的亚单位，表达于上皮细胞和上皮细胞来源的恶性肿瘤细胞，PGP9.5是一种泛素水解酶，主要对细胞蛋白进行泛素化修饰和降解，两者之间可能存在共同调节细胞周期和死亡的重要机制，需要进一步深入研究二者相互作用的机理。

综上所述，血清肿瘤标志物与自身抗体检测对于早期肺癌具有辅助诊断价值，可作为诊断肺癌的补充工具。肿瘤标志物和自身抗体的联合检测对于区分肺癌类型具有重要的临床意义，尤以NSE与CYFRA21-1和CYFRA21-1与PGP9.5最具有代表性。同时血清肿瘤标志物与自身抗体之间具有相关性，其联合检测可提高肺癌的检测准确率，并且相关联合指标对肺癌组织分型及临床分期的判定也具有一定的参考价值。

参 考 文 献

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