溃疡性结肠炎患者肠道菌群变化及与TNF-、IL-10、NO 的关系

王青，沃铭毅，沈彦，贾鹏强

溃疡性结肠炎（UC）是一种结肠和直肠慢性非特异性炎症性疾病，病变主要局限于大肠黏膜及黏膜下层[1]。UC症状以腹泻为主，也常伴有腹痛、便血、呕吐等症状。有研究认为[2]，UC的发病与肠道菌群的改变有着密切的联系。人体肠道内寄生着10万亿个细菌，它们能影响体质量、消化能力、抵御感染和自体免疫疾病的患病风险，还能控制人体对癌症治疗药物的反应。在炎症性肠病状态下，肠道菌群发挥着重要的作用[3-4]。本研究探讨UC患者肠道菌群的变化，并分析其与肿瘤坏死因子（TNF）-、白细胞介素（IL）-10及一氧化氮（NO）的关系，报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择2015年11月至2017年2月在浙江省人民医院就诊的UC患者86例，均符合《炎症性肠病诊断与治疗的共识意见（2012年·广州）》中UC的诊断标准[5]；排除有心脑血管等疾病患者，近期使用抗生素患者，有腹部手术史患者。按照疾病状态分为活动期组（41例）和缓解期组（45例），并选择40例健康体检者作为对照组。活动期组男23例，女18例；年龄29～46岁，平均（33.6±6.7）岁。缓解期组男24例，女21例；年龄31～44岁，平均（37.3±7.1）岁。对照组男18例，女22例；年龄26～48岁，平均（36.9±7.5）岁。3组一般资料差异无统计学意义（＞ 0.05）。

1.2 方法

1.2.1 肠道菌群检测 收集研究对象粪便0.5 g，于小瓶内加入4.5 ml厌氧稀释液，震荡至粪便均质化。准备7个无菌试管，按照10倍稀释原则稀释直至达到10―8，再取20 l接种于不同培养基中。肠球菌采用需氧培养基培养，双歧杆菌、乳酸杆菌、消化球菌采用厌氧培养基培养。1.2.2 炎症因子检测 抽取研究对象空腹静脉血 5 ml，采用酶联免疫吸附法（ELISA）测定肿瘤坏死因子-（TNF-）、白细胞介素（IL）-10的水平，采用硝酸还原酶试验检测一氧化氮（NO）的水平。

1.3 统计方法 采用SPSS19.0统计软件进行分析。计量资料以均数±标准差表示，多组比较采用方差分析，多重比较采用LSD-检验；计数资料比较采用2检验；相关分析采用Pearson相关性分析。＜0.05为差异有统计学意义。

表1 3组肠道菌群变化情况

表2 3组TNF-、IL-10、NO变化情况

表3 肠道菌群和TNF-、IL-10、NO的相关性

2 结果

2.1 3组肠道菌群变化情况 活动期组肠球菌、大肠杆菌数量均明显高于缓解期组和对照组（均P＜0.05），双歧杆菌、乳酸杆菌、消化球菌数量均明显低于缓解期组和对照组（均P＜0.05）；缓解期组和对照组在肠球菌、大肠杆菌、双歧杆菌、乳酸杆菌、消化球菌数量差异均无统计学意义（均P＞0.05）。见表1。

2.2 3组TNF- 、IL-10、NO变化情况活动期组TNF-和NO水平均明显高于缓解期组和对照组（均P＜0.05），IL-10水平明显低于缓解期组和对照组（均P＜0.05）；缓解期组和对照组的TNF-和NO水平差异均无统计学意义（均P＞0.05），但缓解期组的IL-10水平高于对照组（P＜0.05）。见表2。

2.3 肠道菌群和TNF-、IL-10、NO相关性 UC患者肠道菌群的变化与TNF-、IL-10、NO水平具有相关性。见表3。

3 讨论

UC属于消化内科常见疾病，临床主要表现为腹泻、腹痛和便血，结肠镜下可见直肠部位溃疡形成，病变可延伸至近端结肠。有研究表明，不同时期的UC患者体内的肠道菌群会发生改变[6]。肠道菌群是人体肠道的正常微生物，可分有益菌、有害菌和中性菌。有益菌，也被称为益生菌，主要是各种双歧杆菌、乳酸杆菌、消化球菌等，是人体健康必不可少的要素，可以合成各种维生素，参与食物的消化，促进肠道蠕动，抑制致病菌群的生长。有害菌，如肠球菌等，数量一旦失控便会大量生长，可引发多种疾病，产生致癌物等有害物质，或影响免疫系统功能。中性菌，如大肠杆菌等，是具有双重作用的细菌，在正常情况下对健康有益；一旦增殖失控，或从肠道转移到身体其他部位，就可能引发许多问题。各种细菌在消化道系统中相互依存，共同作用，维持机体动态平衡。有研究表明[7]，在肠道炎症性疾病状态下，肠道菌群会影响肠黏膜的免疫系统功能，进而诱发机体产生免疫反应，导致UC的发生。本研究显示，活动期组肠球菌、大肠杆菌数量均明显高于缓解期组和对照组（均P＜0.05），双歧杆菌、乳酸杆菌、消化球菌数量均明显低于缓解期组和对照组（均P＜0.05），说明活动期UC患者体内肠道菌群数量发生改变，使原有的平衡被破坏，且双歧杆菌、乳酸杆菌、消化球菌等有益菌数量减少，肠球菌等有害菌数量增多，导致肠黏膜功能减弱，引起肠道发生炎症反应[8]。

TNF-是重要的炎症启动因子，主要由单核巨噬细胞形成，在细胞急性反应、凋亡等过程均具有重要作用。IL-10有免疫调节和抗炎作用，在肠道免疫中发挥着重要的作用。NO广泛存在于胃肠道、食管中。Ikonomi等[9]指出，NO 在UC患者肠黏膜组织中合成增加，提示可能参与UC致病过程中的组织损伤和炎症反应。本研究发现，活动期组TNF-和NO水平均高于缓解期组和对照组（P＜0.05），IL-10水平明显低于缓解期组和对照组（均P＜0.05），说明UC可导致TNF-和NO水平的增加以及IL-10水平的降低。本研究还发现，TNF-和NO与肠球菌、大肠杆菌呈正相关（均P＜0.05），与双歧杆菌、乳酸杆菌、消化球菌呈负相关（均P＜0.05），即TNF-和NO水平越高，UC患者体内的肠球菌和大肠杆菌数量越多，而双歧杆菌、乳酸杆菌、消化球菌数量越少；IL-10与肠球菌、大肠杆菌呈负相关（均P＜0.05），与双歧杆菌、乳酸杆菌、消化球菌呈正相关（均P＜0.05），即IL-10水平越高，UC患者体内的肠球菌和大肠杆菌数量越少，而双歧杆菌、乳酸杆菌、消化球菌数量越多。

综上所述，UC患者肠道菌群数量发生改变，活动期UC患者变化程度更加明显，且通过测定TNF-、IL-10、NO的水平可有效评估UC患者病情。

参考文献：

[1] 解春静,庄彦华,栾雨茏.溃疡性结肠炎发病机制中免疫因素的研究进展[J].细胞与分子免疫学杂志,2013,29(8)：889-892.

[2] 金博.肠道菌群移植与溃疡性结肠炎[J].世界华人消化杂志,2017,25(1)：23-30.

[3] 李贞贞,王影,唐立.肠道菌群在炎症性肠病发病中的作用[J].中国微生态学杂志,2015,27(11)：1350-1354.

[4] 褚源,王巧民.不同分期溃疡性结肠炎患者黏膜相关菌群的变化及意义[J].安徽医科大学学报,2014,49(10)：1444-1447.

[5] 胡品津,钱家鸣,吴开春,等.我国炎症性肠病诊断与治疗的共识意见(2012年·广州)[J].内科理论与实践,2013,8(1)：61-75.

[6] 刘志威,王学群,李甜甜.溃疡性结肠炎患者肠道菌群变化的临床意义[J].胃肠病学和肝病学杂志,2016,25(5)：554-556.

[7] 陈玉霞,詹学.肠道菌群与炎症性肠病[J].中华临床医师杂志：电子版,2014,8(8)：1561-1566.

[8] 崔路佳,王裕宣.溃疡性结肠炎患者肠道菌群改变与炎性指标的相关性研究 [J].海南医学,2014,25(20)：3014-3016.

[9] Ikonomi E,Rothstein RD,Ehrlich AC,et al.Measurementof fractional exhaled nitric oxideasamarker of diseaseactivity in inflammatoryboweldisease[J].Journal of Gastroenterology,Pancreatology&Liver Disorders,2016,3(1)：10.