杜忠伟 胡志强 亢学平 王 旭 李 健 王 鑫
不同灵芝菌株林下仿野生栽培对比试验
杜忠伟 胡志强 亢学平 王 旭 李 健 王 鑫*
(延边朝鲜族自治州农业科学院,吉林 延边 133000)
以12个灵芝菌株为试验材料,采用林下覆土出菇的试验方法,对比在相同环境条件下不同灵芝菌丝体的长势、子实体形态特征。结果表明,不同灵芝菌株在相同条件下生长差异明显,以编号为12即龙泉市农业局的灵芝菌种综合性状较好,适合于林下仿野生栽培。
灵芝;菌株;菌丝体;仿野生;子实体
灵芝()在我国有着悠久的历史文化,深受人们的推崇,是著名的药用真菌,广泛分布于我国东部地区。国内外对其研究、生产和应用十分重视,已研发出较多药用和保健用产品。灵芝含有的灵芝多糖、三萜类化合物等成分有显著的药理作用,对抗肿瘤、保肝护肝、降血糖血脂、调节心血管系统等有很好的功效[1~5]。目前我国大部分灵芝栽培以温室人工栽培为主,少有林下仿野生栽培,而灵芝的产量、质量及有效成分的积累在很大程度上受栽培原料及栽培环境条件的影响[6,7]。我们通过引进国内不同地方的灵芝菌株,在吉林延边地区进行林下仿野生栽培试验,测定比较不同菌株菌丝生长状态和子实体形态,以选育出适合本地区林下仿野生栽培的优良灵芝品种。
表1 菌株编号及来源
从不同地区引进12个灵芝菌株样本,试验编号和来源如表1所示。
母种培养基选用麦麸浸汁,配方为麦麸50 g、琼脂粉15 g、葡萄糖20 g、磷酸二氢钾3 g、硫酸镁1.5 g、水1 000 mL。原种培养基配方:硬杂木木屑86%、稻糠10%、豆粉2%、白灰1%、石膏1%。试验采用段木栽培法,选用桦树、栎树等硬杂木。
试验所用母种、原种在延边朝鲜族自治州农业科学院实验室制作;栽培袋制作和仿野生林下试验地点选在吉林省和龙市头道镇林地。
(1)母种的制作。配制好的培养基装入试管中,经高压灭菌、摆斜面、冷却后移入超净工作台中,紫外线杀菌30 min。每个菌株制作25支试管菌种,放入恒温培养箱25 ℃暗培养,经10天左右长满试管,记录母种菌丝长满试管时间,并及时挑出感染杂菌的试管。
(2)原种的制作。培养基按比例配好后,混合均匀,使含水量为65%,装入栽培袋中,经高压灭菌,冷却后移入超净工作台中接种,每个菌株接种100个料袋,每支试管接4个料袋。将制作好的原种转移到发菌室,25 ℃恒温培养。
(3)栽培段制作。将硬杂木枝桠材切段捆在一起,直径为20 cm左右,装入规格为22×43×0.003(cm)的聚乙烯栽培袋中,采用常压灭菌,温度升至100 ℃后保持13 h,再焖24 h出锅。灭菌结束待料包温度降至40 ℃左右时接种。之后将所有试验袋统一移入培养室进行避光培养,培养室温度控制在24~28 ℃,空气相对湿度控制在70%左右,并保持培养室内空气流通。发菌期间及时将污染杂菌的菌袋挑出。菌丝长满袋后放置10天左右,当袋口出现菌皮时,移至林下进行仿野生栽培。记录菌丝长满菌袋的时间。
(1)出菇管理。菌丝满袋后移入林下覆土出芝。选择三分阳七分阴的林地坡地,覆土前脱掉塑料袋,将菌段竖直摆放。菌段间隔10 cm左右,5个菌段摆成一排。摆好后在菌段面上覆盖约3 cm厚的泥土。挖好排水沟,保证出芝场地不低洼积水,覆土后30天左右开始出原基。记录覆土时间、出芝时间、采收时间、产量和外观品质等。
(2)采收。在天气转冷、灵芝成熟而未弹孢子时采收并测量子实体的大小,经晾干后称重,计算平均大小和干重。
母种接种后2~3天菌丝开始萌发,经10天左右长满试管,相同接种时间和培养条件下,12个灵芝菌株的菌丝体长势存在差别(表2),其中编号为8、9、10、12的菌株菌丝长势好,长满试管斜面快,菌丝洁白;编号为2、3、7的菌株菌丝长势弱,生长速度慢,菌丝稀疏,且产生黄色色素。
2月中旬制作栽培袋,菌丝满袋时间为4月中下旬,养菌时间在60天左右,因东北气温较低,5月下旬林下覆土栽培,经一个月左右时间出现原基。试验证明覆土产生原基的快慢与菌丝长势成正相关(表2)。12、8、9和10号菌株,覆土产生原基时间分别为27天、28天、28天和28天。其余菌株均超过30天。2号菌株最慢,35天才产生原基。
表2 不同灵芝菌株周期生长对比
注 :菌丝长势“+”多表示菌丝粗壮浓白,“+”少表示菌丝长势较弱。
9月中旬灵芝子实体达到成熟,弹射孢子前对各品种进行拍照(图1),采收后测量子实体的菌盖大小和菌柄长短并计算平均值。晒干后,每品种随机挑选20个样本,测每个子实体干重并计算平均值。结果,平均干重以12号菌株较高,为60.25 g;编号11和3居次,分别为51.22 g和50.18 g(表3)。
通过对12个灵芝菌株的菌丝生长和在林下仿野生出菇的对比试验,发现12号灵芝菌株菌丝生长速度快,子实体菌盖呈暗红色,菌盖大而厚,菌柄短,表现性状优良,子实体形态更接近野生灵芝,与其他菌株存在明显的差异。本试验灵芝菌株的子实体形态受当地的气候条件影响明显,因此因地制宜选育出适合本地区的灵芝菌种,对于发展林下仿野生栽培灵芝产业有着重要的意义。继之,应对适合林下仿野生栽培的菌株进行进一步的试验研究,以观察其稳定性,并测定灵芝多糖、萜类化合物等的含量。
图1 试验菌株的灵芝子实体照片
表3 子实体形态特征及单重
[1] 戴玉成, 曹云, 周丽伟, 等. 中国灵芝学名之管见[J]. 菌物学报, 2013, 32(6): 947-952.
[2] 于华峥, 刘艳芳, 周帅, 等. 灵芝子实体、菌丝体及孢子粉中多糖成分差异比较研究[J]. 菌物学报, 2016, 35(2): 170-177.
[3] 邓海林, 吴佩颖, 王建新. 灵芝的研究进展[J]. 时珍国医国药, 2005, 16(2): 141-143.
[4] 张晓云, 杨春清. 灵芝的化学成分和药理作用[J]. 国外医药·植物药分册, 2006, 21(4): 152-155.
[5] 吕文辉, 张源. 灵芝的药用价值[J]. 中华综合临床医学杂志, 2008, 10(4): 71.
[6] 叶美凤, 覃勇荣, 刘旭辉, 等. 桂西:北野生灵芝和人工栽培灵芝多糖含量比较[J]. 北方园艺, 2010(14): 186-188.
[7] 周春红, 董佳. 人工栽培灵芝与野生灵芝活性成分的比较分析[J]. 中国食物与营养, 2010(12): 65-68.
现代农业产业技术体系建设专项(CARS-20)
杜忠伟(1989—),男,农学硕士,研究实习员,从事食药用菌栽培育种研究,E-mail:337230214@qq.com。
,E-mail:wangxin5887@163.com。
S646
A
2095-0934(2018)02-096-03