儿童严重脓毒症溶酶体膜蛋白分子变化及意义

常海霞，张丽波，张中馥

(1.河北省儿童医院急诊科，河北 石家庄 050031；2.河北省军区门诊部内科，河北 石家庄 050081)

脓毒症目前可作为导致小儿死亡的最常见的一种危重疾病，对患儿的身心健康造成了较大的影响。据调查研究资料显示，该病的病死率可高达30%～50%之间，总结其发病机制主要是因炎症反应、凝血活化及纤维抑制等相互作用所形成的级联反应，同时凝血系统的活化在脓毒症发生发展过程中占有重要的环节与地位[1-2]。另外，血小板(platelet,PLT)在炎症与凝血之间存在的复杂过程也可作为血小板活化的标志，而溶酶体膜蛋白分子可作为一类用于活化血小板的膜糖蛋白[3]。CD63又被称为溶酶体相关膜蛋白3(LAMP3)，属于四次跨膜蛋白超家族成员，存在于许多类型细胞的表面，可能与诸多疾病的发生发展具有一定的相关性。本文针对严重脓毒症患儿的溶酶体膜蛋白分子水平进行相关研究，结果报告如下。

1资料与方法

1.1一般资料

选取河北省儿童医院2015年3月至2016年3月收治的小儿脓毒症患儿90例，均接受了血液、尿液、痰液等标本检测，并进行了胸部X线、超声及CT检查来判断感染的部位。按照2008年国际严重脓毒症、脓毒症休克治疗指南[4]诊断。排除了合并肿瘤性疾病、先天性疾病、接受器官移植或长时间服用免疫功能类药物者。按照患儿病情严重程度分为一般脓毒症组(符合脓毒症诊断标准，但仍未达到严重脓毒症标准)及严重脓毒症组(脓毒症合并脏器功能不全及组织低灌注压)，每组各45例，一般脓毒症组中男25例，女20例，年龄在5个月至2岁之间，平均年龄为(1.25±0.02)岁；严重脓毒症组中男24例，女21例，年龄在4个月至3岁之间，平均年龄为(1.27±0.04)岁；另选择健康体检儿童40例作为对照组，其中男24例，女21例，年龄在4个月至3岁之间，平均年龄为(1.29±0.04)岁。三组的一般资料均无明显差异(均P>0.05)，具有可比性。全部患儿家属均签署了知情权同意书，本研究通过医院伦理委员会核对批准。

1.2方法

患儿入院后2h内，在未接受抗生素治疗前第1天、接受抗感染治疗后的第7天，采用流式细胞术对其外周血溶酶体膜蛋白分子水平进行检测。将收集到的3mL空腹静脉血放置在3.8%的枸橼酸钠试管中，采用流式细胞仪对溶酶体膜蛋白分子水平进行检测[5]，采用全自动血球分析仪对血小板的参数进行测量。

1.3统计学方法

采用SPSS 19.0统计学软件对数据进行分析，计量资料采用均数±标准差(χ±S)表示，均值比较采用t检验，组间比较采用方差分析，P<0.05为差异均有统计学意义。

2结果

2.1三组儿童入院后外周血CD63及血小板水平情况

三组的外周血CD63水平和PLT水平比较，差异均具有统计学意义(均P<0.05)；一般脓毒症组、严重脓毒症组分别与对照组比较，外周血CD63水平均较高(t值分别为4.346、3.902，均P<0.05)，PLT水平均较低(t值分别为5.123、4.773，均P<0.05)；严重脓毒症组与一般脓毒症组比较，外周血CD63水平较高(t=5.464，P<0.05)，PLT水平较低(t=6.021，P<0.05)，差异均具有统计学意义，见表1。

表1三组外周血CD63和PLT水平的比较结果(χ±S)

Table 1 Comparison of CD63 and PLT levels of peripheral blood among three groups(χ±S)

组别例数(n)CD63(%)PLT(×109/L)对照组401．62±0．36212．36±42．56一般脓毒症组455．78±0．45110．25±35．24严重脓毒症组4511．52±1．7680．57±34．78F7．0215．362P<0．05<0．05

2.2严重脓毒症组患儿治疗前后外周血CD63及血小板水平对比

严重脓毒症组在入院治疗前、入院后第1天、入院后第7天的CD63和血小板水平比较差异均具有统计学意义(均P<0.05)，见表2。

严重脓毒症组患儿在入院后第1天与入院治疗前和入院后第7天相比CD63水平均较高(t=3.457，P=0.022；t=4.126，P=0.022，PLT水平均较低(t=4.012，P=0.018；t=5.945，P=0.139)；严重脓毒症组患儿在入院后第7天与入院治疗前相比CD63水平较低(t=3.982，P=0.019)，PLT水平较高(t=4.452，P=0.015)，见表2。

表2严重脓毒症组患儿治疗前后外周血CD63及PLT水平比较结果(χ±S)

Table 2Comparison of CD63 and PLT levels of peripheral blood in patients with severe sepsis before and after treatment(χ±S)

治疗时间例数(n)CD63(%)PLT(×109/L)入院治疗前4510．98±1．6780．55±40．67入院后第1天4514．23±1．5074．23±24．11入院后第7天452．89±0．53197．23±46．25F7．7835．214P<0．05<0．05

3讨论

3.1儿童脓毒症的发病原因

脓毒症作为一种能够引起多脏器功能障碍综合征的常见病，是重症监护室(intensive care unit，ICU)内导致患者死亡的最常见原因。据近年来的研究报道指出，能够引起脓毒症的细胞及其分析机制可总结为，患者在抵制炎症并有效维持自稳方面的天然生理机制尚不清楚，因此，目前尚无有效的治疗方法[6]。有研究报道指出，脓毒症时可产生较为严重的炎性反应及凝血方面的障碍，均可导致多器官功能衰竭的发生与发展。另外，作为疾病发生发展的生理基础，发生活化的血小板正巧能够作为连接炎性反应及凝血反应之间的有效桥梁，有效地促进了疾病的进展[7]。有临床资料显示，严重的脓毒症及发生了脓毒性休克的患者，其体内存在着异常改变的血液流变及血小板功能，且血小板数与脓毒症的严重程度可呈负相关关系，而脓毒症患者正是因为遭受着不同程度的缺氧、酸中毒、内毒素及休克等因素的影响，使得血管内皮受损、血小板过度聚集及全身感染等一系列情况[8-9]。结合以往研究发现，血小板在脓毒症的发生发展中可能起着重要的作用，一方面能够对自身功能进行有效的调节，同时还可能对周围的血细胞功能进行有效的调节，血小板的重要功能与作用是参与着血栓形成的发生与发展，而其功能的发挥与其表面的CD63具有密切的相关性[10]。

3.2儿童严重脓毒症溶酶体膜蛋白分子水平变化及其临床意义

CD63作为溶酶体颗粒膜蛋白的一种，在静止的血小板表面不会具有较高的表达水平，但在血小板发生活化后，CD63分子则能够迅速的表达，并对血小板及中性粒细胞的黏附与连接过程产生有效的促进诱导作用，同时还与血小板的聚集及血栓形成具有密切的相关性[11]。因此，对CD63水平进行检测可作为判断脓毒症发生发展及治疗的一项重要指标。本研究结果显示，一般脓毒症与严重脓毒症与对照组相比外周血CD63水平较高，PLT水平较低，严重脓毒症组与一般脓毒症组相比外周血CD63水平较高，PLT水平较低，差异均具有统计学意义(均P<0.05)。结果提示，脓毒症患儿的血小板激活程度与疾病的严重程度存在一定的关系，通常可体现为病情越严重，血小板激活程度越高，脏器功能损伤就越严重[12]。而经过规范的治疗后，严重脓毒症组患儿入院后第1天与入院治疗前相比CD63水平较高，PLT水平较低，入院后第7天与入院时治疗前、入院后第1天相比CD63较低，PLT较高，差异均具有统计学意义(均P<0.05)。结果提示，在经过治疗后，脓毒症患儿的感染得到了有效的控制，而对CD63的监测不仅能够有效地反应出疾病的严重程度，同时可用于观察判断疗效，为临床用药给予有效的指导，具有重要意义。

综上所述，溶酶体膜蛋白分子在儿童严重脓毒症中具有较高的水平，促进了血小板参数水平的降低，可能加重了脓毒症的病情。由于本次研究样本量有限，且未能长期随访，因此期望通过进一步深入研究以获得更加精确的结论。

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