抗纤益心浓缩丸对大鼠下腔静脉血栓形成及凝血功能影响*

王振涛 张晓丹 吴 鸿 柴松波 常红波

（1.河南省中医院，河南 郑州 450002；2.上海中医药大学，上海 200032；3.河南中医药大学，河南 郑州 450046）

抗纤益心浓缩丸是本院临床经验方，由黄芪、红参、益母草、丹参、泽兰、等组成，具有益气、活血、利水的功效。前期临床观察和实验研究表明，抗纤益心方应用于扩张型心肌病（气虚血瘀证）患者，在改善临床症状、血流动力学、心功能及抑制心室重构等方面均取得良好疗效［1-3］，为方便患者应用，现已将其研发制作丸剂。本实验在前期实验的基础上，就抗纤益心浓缩丸在抗静脉血栓形成及其部分凝血功能方面进行实验研究。现报告如下。

1 材料与方法

1.1 实验动物 SD大鼠，雌雄各半，体质量（200±20）g，由北京维通利华实验动物技术有限公司提供，合格证号：1140700105088。

1.2 试药与仪器 抗纤益心浓缩丸由红参、益母草、丹参、泽兰、麦冬、黄芪、升麻、茯苓、白术组成（由河南中医药大学药学院药剂室提供）。华法林钠片（2.5 mg/片，上海信宜九福药业有限公司，批号：H31022123）。水合氯醛（郑州派尼有限公司生产，批号：20100614）。凝血酶时间（TT）测定试剂盒（德国 Siemens，批号：45625）。凝血酶原时间 （PT）测定试剂盒 （德国Siemens，批号：546887）。部分活化凝血酶原时间（APTT）测定试剂盒（德国 Siemens，批号：557191）。

1.3 干预方法 1）抗纤益心浓缩丸对静脉血栓的影响。取40只SPF级SD大鼠，雌雄各半，随机分为4组，即模型对照组（等量生理盐水）、中药高剂量组（18.8 g/kg），中药低剂量组（4.7 g/kg），华法林钠组（1.1 mg/kg）。 各组大鼠每日给药1次，连续灌胃1周。末次给药30 min后，进行深静脉血栓形成造模［4］，将大鼠以4%水合氯醛麻醉，用安尔碘常规消毒腹部，沿其腹部正中线剪开进腹，将腹腔内全部肠管移出，暴露血管，用沾满生理盐水的湿纱布包裹肠管，后置于腹部一侧，用棉签逐步分离下腔静脉，于左肾静脉下方用粗丝线结扎下腔静脉，将暴露的肠管回纳腹腔，依次连续缝合腹腔，于结扎下腔静脉4 h后，打开腹腔，在结扎位置下方2 cm处用止血钳夹闭管腔，并用小剪刀剪断瘀血段血管，剖开瘀血段管腔，镊子取出血栓，放于滤纸上，沾去血液，称取血栓湿质量。后放置烘干机处烘干24 h，称取血栓干质量。2）抗纤益心浓缩丸对大鼠凝血功能的影响。按上述实验方法，在剖取瘀血段前，将各组大鼠腹主动脉取血，以 3.8%的枸橼酸钠（1∶9）抗凝，3000 r/min 离心15 min，分离血浆待测。按试剂盒说明测定APTT、PT、TT。

1.4 统计学处理 应用SPSS19.0统计软件。计量资料以（±s）表示。多组间比较，若方差齐，用方差分析，若方差不齐则用非参数检验，两两组间比较用t检验。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 各组大鼠静脉血栓干、湿质量比较 见表1。中药高、低剂量组及华法林钠组均可以减轻结扎大鼠下腔静脉所形成的血栓的干、湿质量。与模型对照组相比，差异有统计学意义（P＜0.05）。

表1 各组大鼠静脉血栓干、湿质量比较（mg，±s）

表1 各组大鼠静脉血栓干、湿质量比较（mg，±s）

与模型对照组比较，△P＜0.05。

组 别 n 血栓湿质量 血栓干质量模型对照组 1 0 2 6.2 3±4.4 2 9.9 0±3.1 4中药高剂量组 1 0 1 5.1 1±4.3 9△ 5.0 4±0.8 4△中药低剂量组 1 0 2 2.6 7±3.3 5△ 6.8 4±1.9 1△华法林钠组 1 0 1 1.7 1±1.3 8△ 1.4 8±0.3 5△

2.2 各组大鼠凝血功能比较 见表2。中药高、低剂量及华法林钠组均能延长大鼠PT、TT、APTT。与模型对照组相比，中药高剂量组及华法林钠组均能延长PT、TT、APTT，差异具有统计意义（P＜0.01）。 中药高剂量组与华法林钠组相比，作用相当，差异无统计学意义（P ＞0.05）。

表2 各组大鼠凝血功能比较（s，±s）

表2 各组大鼠凝血功能比较（s，±s）

与模型对照组比较，△P＜0.05，△△P＜0.01。

组别 n P T T T A P T T模型对照组 1 0 1 3.4 1±1.4 6中药高剂量组 1 0 2 4.0 2±2.5 3△△中药低剂量组 1 0 1 5.1 4±1.6 1 4 0.5 3±1 2.0 4 1 7.0 5±1.5 7 5 0.8 5±1 2.6 0△△ 3 6.2 7±4.9 7△△3 7.8 3±6.6 5 2 0.5 2±3.1 0华法林钠组 1 0 2 5.9 9±3.0 9△△5 3.5 5±3.7 2△△ 3 9.5 3±4.1 5△△

3 讨 论

近些年，中医药在治疗扩张型心肌病方面发挥了重要作用。根据疾病的临床表现本病可归属于中医“喘证”“胸痹”“心悸”等范畴。笔者在长期治疗本病的实践中归纳其临床特点，结合有关文献及一些医家认识，认为本病早期以气虚为本，瘀血为标。晚期患者出现心肾阳气衰微，失去温煦功能，逐渐出现瘀血、痰浊、水湿，但总以气虚阳虚为本。其中气虚是中心环节，因此笔者认为治疗扩张型心肌病可予益气活血法，拟抗纤益心方治疗。方中丹参活血化瘀，通经止痛，凉血清心。实验研究显示［5］，丹参可以明显抑制血小板聚集、降低血液黏稠度、扩张微血管、增加血流量，从而具有较好的抗血小板聚集、防止血小板活化、防止血栓形成的作用。泽兰可活血、祛瘀、利水。黄芪益气、固表、利水，研究［6］显示黄芪可能通过抑制血管内皮细胞PAI-1表达和活性发挥抗血栓作用。益母草清热解毒，通经活血，利水消肿，现代药理研究显示［7-12］，益母草提取物具有抗血栓，抗血小板聚集，改善微循环等作用。

研究中对照药选用华法林，是目前临床中最常用经典的抗凝药之一，其通过抑制凝血因子的活化抑制新的血栓形成，限制血栓的扩大和延展，抑制在血栓的基础上形成新的血栓，抑制血栓脱落和栓塞的发生，有利于机体纤溶系统清除已经形成的血栓。静脉血栓形成［13］主要是由于静脉损伤、血流缓慢、血液高凝引起血液在血管内不能正常的凝结，阻塞静脉管腔，导致血栓的形成。实验结果显示中药高、低剂量组与模型对照组对比，能够减少静脉血栓干湿质量，但是效果没有华法林钠组显著。表明抗纤益心浓缩丸可以抑制静脉血栓的形成，但是效果没有抗凝药物华法林钠的作用明显。

凝血功能的测定主要是指测定 APTT、PT、TT［14］。APTT反应内源性凝血系统的凝血功能，因子Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ、Ⅻ的水平对APTT的水平有直接影响；PT是反应外源性凝血系统的凝血功能，能反应血浆凝血酶原的水平，也可以反应凝血因子Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ的水平活性；TT反应凝血、抗凝血及纤维蛋白溶解系统功能。对凝血功能的检测可以了解药物的相关凝血功能［15-18］。上述实验显示，与模型对照组相比，抗纤益心浓缩丸高、低剂量组及华法林钠组均能延长PT、TT、APTT，差异具有统计意义（P＜0.05），其中，高剂量与华法林钠组作用更明显（P＜0.01）；高剂量组与华法林钠组相比，作用相当，差异无统计学意义（P＞0.05）。说明抗纤益心浓缩丸可能通过延长APTT、PT、TT，达到一定的预防血栓形成的作用。

综上所述，抗纤益心浓缩丸可以减少静脉血栓干湿质量，亦能延长APTT、PT、TT，从而说明抗纤益心浓缩丸具有一定抑制血栓形成的作用。这可能与抗纤益心浓缩丸对血液运行及凝血系统影响有一定的关联，但具体机制有待进一步探究。

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