吉非替尼联用中药复方治疗非小细胞肺癌的研究

李 楠，李剑男

（1.中国人民解放军第455医院，上海 200052；2.长春中医药大学药学院，长春 130117）

肺癌是我国多发性恶性肿瘤之一，具有极高的致死率[1]，肺癌的发病率和病死率位居恶性肿瘤之首。其中小细胞肺癌（NSCLC）约占肺癌总体发病率的80%以上，且大约70%的患者在确诊时病情已属中晚期，失去了手术彻底根治的机会。随着肺癌发病机制及其生物学特性的研究不断深入，以吉非替尼为代表的表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂（EGFR-TKI）在EGFR基因敏感的晚期NSCLC患者治疗上取得了突破性的进展，但同时不可避免地伴随着不良反应及耐药情况的发生，阻碍了后续的治疗。

1 抗肿瘤实验研究

1.1 抗肿瘤机制 肖烈钢等[2]采用MTT法观察了吉非替尼联用加味四君固本汤的含药血清对人非小细胞肺癌细胞系A549和Hcc827增殖情况的影响。加味四君固本汤由人参、白术、茯苓、炙甘草、黄芪等药物组成，具有扶正固本、活血解毒的功效。结果表明，吉非替尼抑制 A549 和 Hcc827 细胞增殖的半数抑制浓度（IC50）分别为 46.18 µmol/L 和 61.99 µmol/L（P＜0.05）；加味四君固本汤作用于肺癌细胞后，随着浓度的逐渐增加，其对癌细胞抑制率逐渐增高（P＜0.05）；加味四君固本汤与吉非替尼联用则加强了吉非替尼对 A549和 Hcc827 细胞增殖抑制作用（P＜0.05）。表明吉非替尼与加味四君固本汤联合用药可协同抑制A549 和Hcc827 细胞增殖。马峰[3]采用流式细胞仪观察不同剂量的益气通络解毒方含药血清联用吉非替尼对人肺腺癌 H1975 细胞凋亡情况的影响。用免疫组化法观察不同剂量组中移植瘤细胞中的凋亡相关蛋白 Caspase-3 表达量的变化。 用Western blotting 法观察各组移植瘤细胞中血管内皮生长因子（VEGF）表达量的变化。体外实验结果表明，益气通络解毒方联用吉非替尼可以有效抑制肺癌H1975细胞的增殖和凋亡。其机制可能是通过上调凋亡蛋白Caspase-3的表达。体内实验结果说明，益气通络解毒方联用吉非替尼能够有效抑制BALB/c 裸鼠移植瘤的生长，其机制可能是通过上调凋亡蛋白 Caspase-3 的表达量，下调 VEGF表达量，从而发挥抑制肿瘤血管生成的药理作用。

1.2 逆转耐药机制 孙玺媛等[4]取人肺腺癌 PC-9 细胞及人肺腺癌获得性耐吉非替尼 PC-9R细胞株，以血清药理学理论为基础，采用MTT 和 West-Blot 、Realtime PCR 等实验技术，观察金复康口服液对非小细胞肺腺癌吉非替尼获得性耐药情况的影响。金复康口服液由黄芪、北沙参、麦冬、女贞子（酒制）、山茱萸、绞股蓝、淫羊藿、胡芦巴（盐炒）、石上柏、石见穿、重楼、天冬等中药组成。该方具有益气养阴、清热解毒的功效。实验结果表明金复康口服液不仅能有效抑制PC-9 肺腺癌细胞的生长，还能抑制耐吉非替尼 PC-9R细胞的生长，并呈时间及剂量依赖性。金复康联用吉非替尼后对PC-9R细胞的增殖抑制作用明显增强，吉非替尼的IC50明显降低。金复康口服液逆转PC-9R细胞对吉非替尼的耐药倍数为 11.3 倍，表明两药有协同作用。金复康口服液联合吉非替尼给药组的P-EGFR 基因的mRNA 表达量显著低于吉非替尼组。该实验表明金复康口服液对抗吉非替尼获得性耐药可能与下调 p-EGFR基因的表达有关。

杨小兵[5]通过建立获得性耐药非小细胞肺癌裸鼠皮下移植瘤模型来观察吉非替尼联合扶正抗癌方对晚期NSCLC增效的作用机制。扶正抗癌方组成，太子参30 g、白术15 g、黄芪30 g、炒薏苡仁30 g、甘草10 g、山慈姑30 g、白花蛇舌草30 g、龙葵30 g、石见穿30 g、八月扎30 g、蛇泡簕30 g、莪术15 g。具有健脾益气，补肺化痰，清热解毒，祛瘀散结等功效。先给60只裸鼠右腋下接种对吉非替尼低度耐药的H1650细胞株。造模成功后进行随机分组：空白对照组（0.9%生理盐水）、吉非替尼组（5 g/mL）、中药低剂量组（6.2 g/mL）、中药高剂量组（12.4 g/mL）、低剂量联合药组，高剂量联合药组。每组10只裸鼠。然后每天给裸鼠胃内给药0.2 mL，共给药15 d。给药结束后，测量各组裸鼠转移瘤体积、抑瘤率，并对瘤体及靶器官进行切片观察，检测微管密度、增殖指数，Tnuel法检测凋亡指数，用免疫组化法检测EGFR、ERK、AKT及其磷酸化蛋白的表达情况。实验结果表明，联合用药组对裸鼠非小细胞肺癌H1650移植瘤的抑制优于单用吉非替尼组或单用中药组，且高剂量联合用药组作用效果最佳；联合用药组诱导H1650移植瘤细胞凋亡情况也优于单用吉非替尼和单用中药组。联合用药组对AKT、ERK及P-ERK表达下调优于单用中药组和单用吉非替尼组。扶正抗癌方的作用机制是通过下调AKT、ERK及P-ERK等基因表达而增强吉非替尼的疗效。实验证明扶正抗癌方与吉非替尼联合用药有协同抑制肿瘤生长，增加抗癌疗效。

2 临床研究

2.1 减毒增效 于文瀚[6]选取99例非小细胞肺癌患者（KPS＞50），根据中医辨证分为5个类型，肺脾气虚型（健脾益气，服用黄芪、党参、茯苓、白术等）、肺阴虚型（滋阴润肺，服用沙参、玄参、麦冬、百合等）、气阴两虚型（益气养阴，服用黄芪、党参，沙参，麦冬、百合等）、瘀热内结型（祛湿化痰兼化瘀，服用陈皮，半夏，瓜蒌，胆南星等）、气滞血瘀型（行气化瘀，服用黄芪，赤芍，丹参，郁金等）。患者每天服用相应中药汤剂加吉非替尼250 mg/片。15 d为1个疗程，共6个疗程。结果：6个月存活率94.9%，1年69.7%。痤疮样皮疹发生率68.7%，脱皮发生率20.2%，皮肤瘙痒发生率44.8%，腹泻为62.1%，恶心呕吐为4.0%，转氨酶生高率为3.0%，鼻出血为7.1%，无间质性肺炎的发生。表明吉非替尼联用中药可以有效改善临床症状，稳定病灶，延缓病情的发展。李新泽等[7]选取206 例中晚期NSCLC患者，随机平均分为 2 组，对照组 103 例口服替尼 250 mg，1 次/d；观察组 103 例给予吉非替尼加中药复方，1次/d。中药复方组成为人参、天冬、麦冬、杏仁、牡蛎各10 g，生黄芪、沙参各15 g，白花蛇舌草、半枝莲、夏枯草各 20 g，蜈蚣 2条，咳嗽较重者加浙贝母与半夏，胸痛者加田七与延胡索，咯血者加白及、白茅根、仙鹤草，大便干结者加大黄、玄参。在治疗 16 周后统计近期疗效。结果：观察组完全缓解率及临床总有效率均明显高于对照组；观察组治疗后KPS评分明显高于对照组及治疗前；观察组中腹泻、恶心呕吐等不良反应发生率明显低于对照组。表明吉非替尼联用中药复方治疗晚期非小细胞肺癌可以有效提高治疗有效性，延长患者的无进展生存期，并减少毒副反应。

2.2 延缓耐药 康小红等[8]观察40例晚期肺腺癌患者服用肺岩宁方加吉非替尼（或厄洛替尼）后的临床疗效和延缓吉非替尼耐药现象发生的时间。实验方法为晚期表皮生长因子受体（EGFR）突变的肺腺癌患者40例，分为2组，对照组18例（吉非替尼或厄洛替尼）；治疗组22例（吉非替尼或厄洛替尼加肺岩宁方）。治疗直至疾病进展或不能耐受不良反应为止。观察近期临床疗效、不良反应及疾病进展时间。结果：对照组和治疗组的临床有效率分别为61.11%和68.18%，疾病控制率分别为88.89%和90.91%。与药物相关主要不良反应为皮疹和轻度腹泻，2组比较，差异无统计学意义。中位疾病进展时间，对照组和治疗组分别为9.5月和12.0月，肺岩宁方延缓吉非替尼（或厄洛替尼）耐药2.5月。实验说明肺岩宁方具有一定延缓或阻止吉非替尼（或厄洛替尼）耐药现象发生的作用。

张慧敏[9]观察 60 例非小细胞肺癌患者服用益气通络解毒方加吉非替尼（或厄洛替尼）的临床疗效及延缓吉非替尼耐药性出现的时间情况。随机分为治疗组30例（益气通络解毒方 +吉非替尼/厄洛替尼），对照组30例（吉非替尼/厄洛替尼）。接受治疗4周后进行疗效评价。实验结果表明在生存质量方面：治疗组生活质量评分高于对照组。2组 PFS分别为 12.4 个月和 9.5个月，治疗组 PFS 延长了2.9个月。表明益气通络解毒方有一定的延缓或防治吉非替尼/厄洛替尼耐药的作用。

3 结语

吉非替尼是一种表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂，其作用效果好，对与癌细胞增殖、生长、存活有关的信号传导通路有着强烈的拮抗作用。吉非替尼能通过促进癌细胞凋亡、抗癌细胞血管生成、抗癌细胞分化增殖和抗癌细胞迁移等方面实现精准抗癌[10]。吉非替尼疗效好，但不良反应大；靶点单一，极易产生耐药性。中药复方是根据中医药理论，采用辨证施治的方法调配而成。中药复方注重调节患者整体内环境，能够促进体内环境平衡稳定。因此中药复方能够增强机体免疫力，从而提高患者对吉非替尼的耐受性，减轻其毒副反应。中药复方含有多种抗癌活性成分[11-15]，具有低毒、安全、多靶点等特点，能多途径、多阶段

地逆转肺癌细胞对吉非替尼的耐药性，增强药物疗效。因此吉非替尼联用中药复方具有攻、补兼施，标、本兼治的作用，是有效的治疗晚期非小细胞肺癌的临床治疗方案。

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