抗骨增生片的制备工艺研究

刘秀梅，贺含珍，郭倩倩，葛春丽，陈 楠

（1.郑州人民医院 药学部，河南 郑州 450003；2.河南农业职业学院，河南 郑州 450000）

抗骨增生片是七种中药组成的成方制剂，主要包括熟地黄、骨碎补、鹿衔草、肉苁蓉、鸡血藤、淫羊藿、莱菔子，它是通过煎煮法制备而得，该制剂收载于《卫生部药品标准》中[1]。抗骨增生片的功效包括补肾、活血、止痛等。主要用于治疗肥大性脊椎炎，跟骨刺，颈椎病，增生性关节炎等，是临床上比较常用的中成药之一[2-5]。本文在原部颁标准的基础上，对抗骨增生片的制备工艺进行了一系列的研究，筛选并优化了制备工艺。现将制备工艺优化的结果报道如下。

1 仪器与材料

LC-10ATVP 型高效液相色谱仪，KQ3200型超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司），SPD-10AVP紫外检测器，AB265-S型分析天平（梅特勒-托利多仪器（上海）有限公司），7725i手动进样器，AT330柱温箱（日本岛津），N2000色谱数据工作站（浙江大学智达信息工程有限公司），LP502型电子天平（常熟市百灵天平仪器有限公司），WFH-203型三用紫外分析仪（上海精科实业有限公司）。

乙腈（色谱纯）（美国Fisher公司生产），重蒸馏水（自制），淫羊藿苷对照品（由中国药品生物制品检定所提供，批号：110737-200312）处方药材（均购于河南省郑州市张仲景大药房），其它试剂均为分析纯。

2 工艺条件的筛选

2.1 药材的来源、鉴定以及前处理

抗骨增生片处方中的七味药材，均收载于《中国药典》2015年版一部。根据药典规定，挑出各药材的杂质及非药用部位，筛出灰尘。各药材经检验合格后入药。

2.2 药材炮制

抗骨增生片处方中的骨碎补、莱菔子两种药材分别用烫法、炒法炮制，方法如下：

2.2.1 骨碎补的炮制：除去骨碎补原药材的非药用部分及杂质，洗净，润透，切片，然后干燥。将洁净河砂用武火炒热，河砂滑利容易翻动之后，将骨碎补净药材加入锅中，不断的翻动药材，当药材鼓起，呈红棕色，并且绒毛呈焦黄色时，取出药材，筛去砂子，放凉，去除绒毛。

2.2.2 莱菔子的炮制：将莱菔子原药材的杂质除去，洗净药材，然后将药材干燥。取净莱菔子，将莱菔子用文火炒至微鼓起且有爆裂声和香气时取出，放凉。

2.3 粉碎部分的考察

取处方中1/2量的鸡血藤药材粉碎成细粉直接入药，这样既能保存药物的疗效，又能让鸡血藤粉成为稀释剂，还能促进片剂崩解，同时也利于研究中将浓缩后的稠膏进行干燥。按20倍的处方量称取鸡血藤，取鸡血藤药材分3批各1.36 kg，分别置于粉碎机中粉碎。将粉碎后的鸡血藤药材过100目筛，考察鸡血藤药材的出粉率，见表1。

2.4 加水量的考察

水煎煮工艺的优化试验：在原工艺中，熟地黄等六味药材与剩余的鸡血藤药材加水进行煎煮入药，只有水煎次数（煎煮两次）和时间（第一次3小时，第二次2小时），但没有加水量的描述，本研究以出膏率和淫羊藿苷为指标，考察煎煮工艺中加水倍数，现将考察条件及结果描述如下：

2.4.1 以出膏率为指标的考察试验：将七种药材按10倍量处方的比例进行称量，即每份药材含熟地黄2.4 kg、鹿衔草1.36 kg、鸡血藤0.68 kg、骨碎补1.36 kg、淫羊藿1.36 kg、莱菔子0.86 kg、肉苁蓉1.36 kg。将称量的药材分为三组，第一组加8倍量的水，煎煮3小时，第二组加6倍量的水，煎煮3小时，第三组加4倍量的水，煎煮3小时，分别过滤之后各组再加水煎煮2小时，分别滤过，将两次滤液合并，再进行浓缩，干燥，得到干浸膏，结果见表2 。

2.4.2 以淫羊藿苷含量为指标的考察试验：根据表2中加水量、提取时间和提取次数进行试验并得干浸膏。以淫羊藿苷为指标，考察加水倍数。

设定加水倍数为每次按药材量的8倍、6倍、4倍进行考察，以淫羊藿苷含量为指标，进行测定。

①色谱条件与系统实用性

测定波长的选择在190～400 nm波长范围用紫外分光光度法对淫羊藿苷对照品溶液进行扫描，发现在波长215 nm、270 nm处有最大吸收，查阅药典及相关文献多选择270 nm为测定波长。

流动相的选择 参考药典中淫羊藿含量测定项下的流动相及相关文献[6-8]，经过反复试验，确定乙腈－0.1%磷酸溶液（27：73）为流动相；流速为1 mL﹒min-1。

试验温度 柱温：30 ℃。

色谱柱的选择 选十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；Shim-pack VP-ODS柱（4.6×250 mm，5 μm）为色谱柱。

经过测定 按淫羊藿苷峰计算，理论塔板数应不低于2000。

保留时间 取一定量的供试品、对照品及阴性样品溶液进行测定，试验结果表明，以270 nm波长为测定波长，选用上述的流动相时，供试品溶液和对照品溶液在相同的保留时间处有吸收峰（保留时间在21分钟左右），与其它组分能达到基线分离R＞1.5。

②对照品溶液的制备 精密称取适量淫羊藿苷对照品，加甲醇制成每1 ml含0.026 mg的溶液，即得对照品溶液。

③供试品溶液的制备 精密称定表2中的一定量干膏，将干膏置于具塞锥形瓶中，精密加入25 ml稀乙醇，称定重量。超声处理（功率250 W，频率25 k Hz）1小时，放冷，再称定重量，用稀乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得各供试品溶液。

④ 含量测定 分别精密吸取对照品溶液和各供试品溶液各10 μl，注入高效液相色谱仪测定，结果见表3。

2.5 浓缩与干燥工艺

2.5.1 浓缩与干燥：按20倍的处方比例称取各药材三份，每份药材含熟地黄4.8 kg、鹿衔草2.72 kg、鸡血藤1.36 kg、骨碎补2.72 kg、肉苁蓉2.72 kg、淫羊藿2.72 kg、莱菔子1.72 kg，加6倍量的水，煎煮两次，第一次3小时，第二次2小时，滤过，合并二次滤液，减压浓缩至相对密度为1.22～1.24（60℃）的稠膏，干燥，制得干膏。

2.5.2 出膏率的测定：按上述试验操作所得干膏进行粉碎，称定重量，得到出膏率，测定结果见表4。

3 结果

表1 出粉率的考察

由表1结果可见，3批鸡血藤药材出粉率分别为97.79%、 98.53%、96.32%，出粉率较好，符合工艺要求。

表2 熟地黄等7味水煎煮出膏率

*药材总量：9.38 kg

表3 加水倍数的不同对淫羊藿苷提取的影响

由表2结果可见，熟地黄等7味药材提取时间分别为第一次3小时、第二次2小时，提取2次，加水量为8倍、6倍、4倍水时，得出的出膏率分别为24.43%、23.54%、20.02%。表3试验结果可见，8倍量、6 倍量、4倍量水研究所得的淫羊藿苷的含量分别为0.254%、0.239%、0.179%。

表4 出膏率试验

根据表4可见，三批药材得到的干膏重分别为4.47 kg、4.24 kg、4.50 kg，出膏率分别为23.83%、22.60%、23.99%。以上研究表明8倍量和6 倍量水煎煮提取得到的淫羊藿苷含量和出膏率都比较接近，为了节省原料，选用每次加水6倍量煎煮，即可使淫羊藿药材中淫羊藿苷的含量达到最高的目的。

4 结论

本研究在原部颁标准的制备工艺基础上，对抗骨增生片的制备工艺进行了优化研究，优化出的制备工艺条件合理、可行。研究得出抗骨增生片的最佳制备工艺为：首先将鸡血藤1/2处方量的药材粉碎成细粉，再将剩余的鸡血藤药材与剩余的熟地黄等六味药材加6倍量的水，总共煎煮两次，第一次3小时，第二次2小时，将煎出的药液滤过，将两次的滤液合并，减压浓缩到相对密度为1.22～1.24（60 ℃）的稠膏，再将上述鸡血藤粉末加入并混合，干燥，粉碎，加入适量的辅料，将粉末及辅料混匀，进行制粒和干燥，压制成1000片，包糖衣，即得抗骨增生片成品。