HSP90β 在结直肠癌组织中的表达情况及其与临床病理特征的关系分析

邵 宇 陈 平 陆 俊 王 涛 史 俊

（宜兴市人民医院胃肠外科 江苏无锡 214200）

结直肠癌（colorectal carcinoma，CRC）目前已成为全世界发病率仅次于肺癌、 乳腺癌与前列腺癌的第四大常见恶性肿瘤［1］。 在我国，结直肠癌也是目前最常见的恶性肿瘤之一， 其发病率和死亡率逐年上升，已经成为我国重要的公共卫生问题。 2015 年中国癌症统计数据显示， 我国结直肠癌新发病例37.6万，其中死亡病例19.1 万［2］。因结直肠癌患者就诊时已多处于晚期，伴随肿瘤的转移，手术根治困难，预后差。热休克蛋白（heat shock protein，HSP）是一组细胞内分子伴侣蛋白质，具有重要生物学功能，肿瘤细胞在受到药物等外界刺激时可诱导生成HSP， 拮抗细胞的凋亡。 HSP90 是HSP 中的一类蛋白，以是否含丰富的谷氨酰胺片段可分为HSP90α 和HSP90β亚型。 本研究旨在探讨HSP90β 在结直肠癌组织中表达情况及其与临床病理特征的关系，现报告如下。

1 材料和方法

1.1 材料与方法 以宜兴市人民医院普外科于2000 年1 月至2007 年12 月间行结直肠癌肿瘤切除术的218 结直肠癌患者为例， 各收集结直肠癌组织石蜡标本1 份。 所纳入患者的临床资料包括手术日期、性别、年龄、肿瘤位置、肿瘤组织分级、肿瘤TNM 分期（UICC 第八版）、肿瘤临床分期等。 本研究已通过医院伦理委员会审核。

1.2 主要试剂 山羊抗人HSP90β 多克隆抗体（Santa Cruz）；SP 免疫组化试剂盒、DAB 显色试剂盒（北京中杉金桥生物技术有限公司）。

1.3 实验方法 山羊抗人HSP90β 多克隆抗体的浓度为1:100。 标本蜡块切片后，按试剂盒说明书进行免疫组化染色。对于染色结果的评估，参照双评分半定量法［3］：（1）染色强度计分，以无染色为0 分、淡黄色为1 分、棕黄色为2 分、棕褐色为3 分；（2）阳性细胞染色数量计分， 以未见阳性细胞为0 分、＜25%计为1 分、26%～50%记为2 分、51%～75%记为3 分、＞75%记为4 分。 将所得的两个分数相乘，使用SPSS软件绘制ROC 曲线得到分界值5.500， 将0～4 分定义为HSP90β 低表达，6～12 分定义为HSP90β 高表达。

1.4 观察指标 （1）观察HSP90β 在结直肠癌细胞中的表达情况；（2）分析HSP90β 的表达水平与患者临床病理参数之间的关系。

1.5 统计学方法 使用SPSS 21.0 软件进行数据统计分析。HSP90β 的表达水平与患者临床病理参数之间的关系使用χ2检验进行比较。 以P ＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 HSP90β 在结直肠癌组织中的表达情况HSP90β 主要表达在细胞质区域，见图1。

图1 HSP90β 在结直肠癌组织中的表达情况（×100，SP）

表1 HSP90β 的表达水平与患者临床病理参数之间的关系（n）

2.2 HSP90β 的表达水平与患者临床病理参数之间的关系 HSP90β 的表达水平与T 分期、N 分期以及临床分期有关（均P ＜0.05），与性别、年龄、肿瘤部位、组织分级及M 分期无关（均P ＞0.05）。 见表1。

3 讨 论

结直肠癌是消化系统常见的恶性肿瘤之一，发病率和死亡率均较高。 目前认为其发病与多种因素有关，遗传学、分子生物学、生物技术等多学科的发展对研究结直肠癌的发生发展过程具有重要的意义。

HSP 作为在生物界中普遍存在的一类蛋白质，广泛参与细胞的生长、分化、发育，其维持细胞生存的作用导致其与肿瘤的生长有密切关系［4］。 HSP90作为其中一类蛋白，在肿瘤的发生发展、癌基因与抑癌基因之间的相互作用以及细胞的增殖转化中起到重要的作用［5］。 在细胞中，HSP90β 与癌基因、抑癌基因的产物结合，通过形成蛋白复合体，介导构象的成熟及转运，从而参与细胞的转化过程。同时，HSP90β 在细胞增殖过程中，作为分子伴侣影响蛋白构象，从而参与细胞周期［6］。 有研究表明，HSP90β 在恶性肿瘤细胞系的表达水平较正常组织明显升高， 也提示HSP90β 可能参与了细胞的恶性增殖过程［7］。 本研究中，HSP90β 的表达水平与结直肠癌T 分期、N 分期以及临床分期有关，与上述文献内容相符。 此外，有报道称，HSP90β 与肿瘤对化疗药物的耐药性的产生有关， 主要与参与细胞耐药相关蛋白构象的成熟与定位、 下调细胞凋亡相关基因表达及蛋白酶活性等有关［8-9］。因此，进一步研究HSP90β 在结直肠癌耐药中的表达规律及与预后关系， 可能为临床合理的治疗提供一定的理论依据。 本研究由于随访数据的欠完善，对于HSP90β 表达水平与患者预后、对化疗药物耐药情况的相关性未能做进一步分析， 有待后续研究。

综上所述，HSP90β 的不同表达水平与T 分期、N 分期以及临床分期有关， 提示了其可能参与了结直肠癌的发生发展过程。