中药在创面愈合中促创面生长因子表达的研究进展※

张文恺许 超姜 献周红云范 鑫涂冬鹏

（1 浙江中医药大学第二临床医学院，浙江 杭州 310053；2 浙江中医药大学附属第二医院骨伤科，浙江 杭州 310005）

作为人体正常的生物过程，创面愈合是通过止血、炎症、增殖和重塑四个精确和高度程序化的阶段实现的，其中四个阶段必须以正确的顺序和时间框架进行[1]。任何一个阶段受到影响，创面愈合都将会受到干扰[2]。当创面愈合的阶段发生干扰时，新血管的生成将会有助于许多恶性、缺血性、传染性和免疫性疾病的发生[3]。创面愈合的关键阶段需要伤口基部肉芽组织的新血管的生成，其中可溶性生长因子以及细胞-细胞和细胞-基质相互作用都在激活内皮细胞开始血管生成中发挥作用。随后活化的内皮细胞、血小板、单核细胞和成纤维细胞释放必要的血管生成生长因子，如血管内皮生成因子 （vascular endothelial growth factor，VEGF)，转化生长因子 (transforming growth factor-beta，TGF-β)，允许内皮细胞通过细胞外基质侵入和迁移，增殖并形成新的未成树小管[4]。通过近年来研究发现中药促创面愈合的作用机制跟其能促进相关生长因子的分泌有关，故针对近几年来中药促进创面愈合的临床及实验研究内容展开综述。

1 血管内皮生长因子 (VEGF)

在创面愈合的早期，VEGF不仅促进血管内皮细胞及血管外膜成纤维细胞增殖，并且还能调节血管通透性，使血管内皮细胞加速迁移，因而能促进创面新血管的生成，为创面提供营养物质，加快创面的愈合[5-6]。

于兴兵等[7]为观察地龙提取液对于糖尿病足的临床疗效，将符合标准的92例患者随机分成治疗组和对照组，发现使用地龙提取液的治疗组创面愈合时间快于对照组，治疗组患者血清VEGF的含量在治疗第7 d起高于对照组，提出地龙提取液加速创面愈合可能跟提升VEGF的水平有关。李善华等[8]为探究玫及乳膏对大鼠Ⅲ期压疮溃疡面新生肉芽组织中VEGF的影响及作用机制，将120只大鼠随机选中80只，将选中的80只大鼠造模后分为模型组（外敷生理盐水纱布组）和实验组（玫及乳膏治疗组），另外40只为对照组，并于治疗的第1，3，7，14 d取新生肉芽组织检测TGF-β1的含量，统计创面愈合时间及愈合率，结果显示第14 d实验组VEGF含量最高，实验组与模型组在第7 d和14 d中VEGTGF-β1含量的差异有统计学意义，得出玫及乳膏能促进大鼠Ⅲ期压疮溃疡面新生肉芽组织中VEGF的表达，提高创面修复速度及愈合率。张振等[9]将SD大鼠造模后随机分3组，在造模后第1，3，7，10和14 d分析创面愈合率以及血管内皮生长因子的表达情况。发现伤后第3天（实验组）创面外敷五谷虫0.3 g组和（阳性对照组）创面外敷京万红软膏0.3 g组中VEGF的表达高于（阴性对照组）每个创面外敷凡士林0.3 g组，且实验组的表达高于阳性对照组，得出五谷虫能促进大鼠背部急性创面愈合及上调创面血管内皮生长因子的表达。孙传秀等[10]将32只新西兰兔造模后随机分成4组，其中（D组）骨髓基质干细胞（BMSCs）移植联合中药治疗组溃疡创面愈合迅速，且创面组织中VEGFmRNA和蛋白较其它组显著增加，得出BMSCs移植配合中药治疗创面愈合的机制可能跟上调VEGF的表达有关。

2 转化生长因子 （TGF-β）

TGF-β是调节各种细胞类型的增殖，分化和死亡的分泌蛋白，是一种有效的免疫抑制剂，并且TGF-β信号传导的干扰与自身免疫，炎症，和癌细胞有关。现已发现TGF-βs至少有6种亚型，且基本上都分布于所有的组织和器官[11]。在创面愈合过程中TGF-β为重要的调控因子，能够引发炎症反应，调节细胞外基质的生成及促进肉芽组织形成等[12]。如TGF-β作用于皮肤损伤处的成纤维细胞，促使其合成胶原蛋白、蛋白多糖等，并且抑制细胞外基质降解酶的产生，促进该酶降解物的分泌，从而增强细胞与基质的结合，促使创面局部纤维化及创面皮肤张力增加，进而促进创面的愈合[13]。由此可知TGF-β的表达对于创面愈合有着积极的作用。

成纤维细胞为创面肉芽组织中最主要的细胞之一，在整个创面愈合过程中有着重要的作用，其中TGF-β1对成纤维细胞有明确的靶向分化作用。ZHANG QI[14]等使用黄芪与生地黄质量比为2∶1的水煎提取物-NF3水煎剂作用于人成纤维细胞，与空白组相比，NF3水煎剂能促进人成纤维细胞的迁移与增殖，运用PCR技术发现TGF/Smad通路中一些基因改变，Western-blot检测结果表明NF3水煎剂能上调TGF-β的表达，推测NF3促进成纤维细胞的增殖，其作用机制可能以上调TGF-β的表达来发挥作用。黄志官等[15]将大鼠造模后随机分为3组，伤后第3天起给模型人参组使用人参煎剂灌胃，安静组灌等量生理盐水，健康对照组不给予任何对比处理，持续14 d常规观察创面愈合情况，并在伤后第10天，17天断尾取血检测IL-1β，TNF-α，TGF-β1的含量，发现伤后第10天，17天人参组中IL-1β，TNF-α水平低于模型安静组，人参组伤后第10天血清中TGF-β1明显高于模型安静组，且人参组创面愈合时间加快，得出人参对创面愈合的积极作用，可能跟改善创面炎症免疫反应及TGF-β1、IL-1β等的相关通路表达有关。朱孟国等[16]运用自拟骨愈方联合急诊手术观察跟骨SandersⅡ～Ⅲ型闭合骨折HIF-1α和VEGF表达的影响，发现观察组手术时间，手术出血量及伤口愈合时间均少于对照组，且观察组患者血清中TGF-β的含量显著高于对照组，得出自拟骨愈方联合急诊手术治疗可降低跟骨SandersⅡ-Ⅲ型闭合骨折的术后并发症，加快创面愈合并促进骨折愈合。

3 成纤维细胞生长因子 (FGF)

20世纪30年代，成纤维细胞生长因子 (FGF)作为一种活性物质被发现，认为是由下丘脑，垂体分泌的多肽，目前发现24种不同种类的FGF，且存在于多种生物组织和器官中，其对消化系统、骨骼系统和皮肤软组织具有多种功能，FGF主要包括酸性FGF(aFGF)和碱性FGF(bFGF)两大类，现研究发现FGF是促进局部病灶形成的促进因子[17]，ZHANG X等[18]在OSM增强血管及改善心肌梗死后心功能的研究中提出bFGF通过促进微血管形成，影响细胞的增殖分化，改善创面供血等进而促进创面愈合。

郭光丽等[19]为探究紫归解毒膏对大鼠创面修复作用的机理，将大鼠造模后随机分3组，结果发现紫归解毒膏组大鼠在伤后3 d，7 d中bFGF的表达高于马应龙组和空白组，且创面愈合时3组中bFGF的含量均无差异，说明伤后的3 d，7 d中，紫归解毒膏组上调了bFGF的表达，提出紫归解毒膏促进创面愈合的机理可能跟促进组织修复细胞的增殖，上调肉芽组织中生长因子的表达有关。石慧青等[20]为阐明生肌象皮膏促进糖尿病大鼠溃疡愈合的作用机制，将大鼠造模后，取第1，3，7，14，21 d创面肉芽组织检测bFGF的表达，发现生肌象皮膏组与糖尿病凡士林组、糖尿病生理盐水组比较，生肌象皮膏组明显上调了创面肉芽组织中bFGF的表达。何利雷等[21]将大鼠造模后随机分成3组，各组大鼠均在第3，7，14天取部分创面及少许周围的正常皮肤，检测其创面肉芽组织中bFGF的表达，发现3 d，7 d，14 d中健脾益气组、活血化瘀组与模型组相比，其大鼠创面组织中bFGF含量均明显增强，在3 d，7 d时健脾益气组中bFGF的表达高于活血化瘀组，但在第14天2组bFGF含量无明显差异，说明健脾益气法对于创面损伤严重的软组织，能增强其创面组织中bFGF的表达。吕长遥等[22]为揭示六合丹对家兔皮肤感染创面愈合过程中SP MMP-1及bFGF表达的影响，将大鼠造模后分成5组，从造模第1天起开始换药，结果发现六合丹组的bFGF在换药后3 d，7 d和14 d的表达均强于紫草油组和模型组。

4 表皮生长因子 （EGF）

表皮生长因子（EGF）是一种多功能的生长因子。对多种组织细胞都能诱导其生长、迁移，促使分化基因表达等作用。其缺乏或过度表达，则会破坏组织细胞增殖凋亡的动态平衡，导致疾病的发生。EGF在创面愈合过程中，对外胚层和内胚层来源的一些组织有促分裂和刺激合成代谢的作用，因而能提高创面愈合速率。EGF不仅能产生趋化信号促进创面修复，还是VEGF和FGF的有丝分裂原，同时能促基质内纤维蛋白，胶原蛋白，弹性蛋白等的合成，从而提高创面愈合速率[23]。

潘建西等[24]为探索中药外用制剂促进创面愈合的机制，将50只大鼠造模后随机分成5组，治疗第7天发现高剂量生肤灵组中大鼠创面肉芽组织中EGF的含量明显高于模型组，低剂量生肤灵组中大鼠创面肉芽组织中EGF的含量也明显升高，且肉芽组织生长旺盛，得出生肤灵能够刺激创面细胞产生表皮生长因子进而促进创面愈合。高恒清等[25]为探讨中药复发硝苦汤促进创面愈合和抑制创面过度瘢痕化的机理，将造模后的16只兔的64个创面随机分为4组，治疗后检测结果显示硝苦汤组创面的平均毛细血管数量较其他组均较高，且肉芽组织中EGF蛋白表达均高于其他组，得出中药复发硝苦汤能够促进兔背部人粪污染手术创面的愈合，并且其促进创面愈合的机理可能与上调EGF的表达有关。何德才等[26]探讨外用中药复方芪竭膏对大鼠创面愈合作用的机理，将造模后大鼠随机分3组，结果显示复方芪竭膏组创面愈合率明显高于其他2组，其作用机制可能为上调EGF的表达来提高胶原蛋白的含量以促进创面愈合。

5 问题与展望

虽然近年来中药在促进创面愈合中对促创面生长因子表达影响的研究取得了一些进展，但其研究思路和实验方案的设计大部分都相同，没有创新型的方案，所获得的实验数据大部分都有相似的结果，现对于更深入的实验研究仍未被提出，所以其研究结果仍然止步于表面的研究。

中医学对于创面愈合的治疗效果显著，为进一步推广中医药的发展，为人民卫生健康事业做贡献，对于今后的研究笔者认为应从以下几个方面着手，第一：可以进行单味药的实验，筛选其最有促进作用的中药，并联合单味中药进行不同的配伍，观察其不同配伍条件下所产生的作用。第二：可以通过筛选出最有效的单味中药中的有效成分，针对其中的一些有效成分进行实验，筛选出对于创面愈合最有效的中药有效成分，同时也可以做中药不同有效成分组合治疗创面愈合的研究。第三：对于已知能促进促愈因子分泌的方剂，应确定其主要以促进哪类因子分泌为主。