RP-HPLC法测定复方消旋山莨菪碱滴眼液硫酸软骨素以氨基葡萄糖计的含量

栾雨

（江苏省镇江药品检验所 江苏 镇江 212003）

复方消旋山莨菪碱滴眼液是为复方制剂。用于治疗青少年假性近视眼。本文通过RP-HPLC法测定复方消旋山莨菪碱滴眼液中硫酸软骨素以氨基葡萄糖的含量，进一步提高了该药标准，方法简便、快速，重现性。

1.仪器与试药

1.1 仪器

BP211D型电子天平（赛多利士）；Agilent1260高效液相色谱仪，UVA检测器（美国Agilent公司）

1.2 试药

D-盐酸氨基葡萄糖对照品(中国药品生物制品检定所140649-201505 100%)；水为二次重蒸水；乙腈为色谱纯；复方消旋山莨菪碱滴眼液（镇江恒新药业有限公司，批号：160903，160902，160901）

2.实验方法

2.1 色谱条件

色谱柱：Agilent C-18柱（3.9 mm×250mm，5um），流动相：水（水2000mL加磷酸1mL，用KOH溶液调节pH值至3.0）—乙腈(3:2)，流速：1.0mL/min，检测波长195nm，理论塔板数：10000。

2.2 对照品溶液制备：

精密称取在105℃干燥至恒重的盐酸氨基，葡萄糖对照品适量，加流动相稀释成1mg/ml的溶液。

2.3 样品溶液的制备

精密量取本品10mL，置100mL量瓶中，加流动相溶解稀释至刻度，摇匀滤过，取续滤液。

图1 盐酸氨基葡萄糖对照品

2.4 标准曲线制备的制备

取盐酸氨基葡萄糖对照品溶液0.3mg/ml，分别进样1.0、2.0、3.0、4.0、5.0μl，以峰面积（y）为纵坐标，相应浓度（x）为横坐标进行线性回归，y=1772.1x-1.04 R=1，线性范围0.3～1.5mg。结果表明种峰面积与浓度呈良好的线性关系。见图1、2。

图2 品色图谱

2.5 精密度测定

取对照品溶液，重复进样5次，记录峰面积分别为837.82、840.10、839.33、841.24、837.21。平均值为 839.14。RSD为 0.2%。

2.6 重复性测定

按照拟订的含量测定方法，取同批号样品5份，分别制备样品供试液，在上述色谱条件下测定5次，盐酸氨基葡萄糖的RSD为 1.06%。

2.7 稳定性试验

在本试验条件下，样品溶液室温放置12h，每隔一段时间进样10μL记录峰面积。氨基葡萄糖峰面积平均值为677.6，RSD分别0.3%。

2.8 回收率试验

取氨基葡萄糖适量配制成1.1mg/ml，取1.0ml加入到样品中照样品测定法测定，测得结果：氨基葡萄糖回收率平均值为99.9%，RSD 为 0.4%。

2.9 样品测定

取样品溶液和对照品溶液，各进样10μL，读取峰面积值，按外标法计算含量，结果见表1。

表1 样品含量测定结果（n=3）

3.讨论

3.1 通过实验得知在195nm处有较大吸收，其它成分在该波长处无干扰，因此可选择此波长作为检测波长。

3.2 采用HPLC法测定中复方消旋山莨菪碱滴眼液以水氨基葡萄糖计的含量与原UV生物显色法比较，结果一致，但方法简便、准确、重现性好。原UV过程繁琐，影响因素多，耗时长，不利于生产环节的质量控制。

[1]国家药典委员会，国家食品药品监督管理局国家药品标准新药转正第47册，化学工业出版社，2004，47.

[2]HPLC-ELSD法测定盐酸氨基葡萄糖胶囊中盐酸氨基葡萄糖的含量-淮阴师范学院学报（自然科学版）2015(1).