甘肃省鱼类 常见寄生虫性疫病 诊断技术

康鹏天

甘肃省水产养殖类型较多，包括池塘、流水、河坝、水库、山溪等，每年可生产成鱼1.5万吨以上，但是随着养殖规模的增大，养殖技术的提高，渔业病害成为渔业发展和生产中重要的一部分，也是造成危害和损失最严重的一个因素。一旦发生渔业病害，就会造成不同程度的经济损失，阻碍渔业的可持续发展。我省渔业病害中寄生虫为易发、常发疫病，也是容易诊断的疫病，笔者根据多年经验和查阅相关资料，总结出了我省鱼类常见寄生虫性疫病诊断技术，可以直接指导基层渔业技术推广部门、养殖户自行诊断，及时发现寄生虫鱼病并有效治疗。

1.诊断材料及要求

1.1 材料和试剂

1.1.1 材料

普通光学显微镜、双筒解剖镜、放大镜、载玻片、盖玻片、镊子、手术刀、手术剪、解剖针、吸水纸、培养皿、滴管、解剖盘等。

1.1.2 试剂

0.85%生理盐水、30‰人工配制海水、4%～5%和10%的福尔马林、70%酒精、硝酸银、甘油胶胨、肖氏液、聚乙烯醇。

配置试剂用水应符合GB/T 6682-2008的要求。

1.2 采样量

用于检查诊断的鱼应有一定数量，检查时采集的样品至少5～10尾。也可按照OIE《水生动物疾病诊断手册》的采样方法进行采样。

1.3 样品及运输

用于实验室检查的病鱼应是活体，运输时应在采集的病鱼中加注原池水进行活体运输。每个容器只装运同一种病鱼送至实验室。运输过程中应采取充氧、降温等措施。

1.4 病原体记数

按不同感染部位采集组织，进行观察。记录显微镜检查时的倍数和该倍数下的虫体数量。孢囊用数字说明，虫体数为同一玻片中3个视野的平均数。

2.车轮虫病

2.1 现场样品目检

检查鱼体。病鱼鱼体发黑，失去光泽，食欲不振，离群独游或成群围绕池边狂游，鱼苗可出现“白头白嘴”或“跑马”（环游不止）症状。当寄生数量少时宿主鱼不显症状，但大量寄生时，鳃丝上有大量黏液分泌，形成一层黏液层，根据上述的症状可以初步确诊。

2.2 实验室检测

2.2.1 体表

用解剖刀刮取体表少许黏液，置于载玻片上，滴一滴清洁水，用镊子将组织黏液分散，盖上盖玻片，用拇指轻轻压片制成水封片，在显微镜（10×10以上镜头）下检查。

2.2.2 鳍

剪下各鳍，置于载玻片上，滴一滴清洁水，显微镜（10×10以上镜头）下检查。

2.2.3 鳃

鳃丝黏液较多时，用解剖刀刮取少许黏液，置于载玻片上，滴一滴清洁水，用镊子将组织黏液分散，盖上盖玻片，用拇指轻轻压片制成水封片，在显微镜（10×10以上镜头）下检查。

鳃丝黏液较少时，用剪刀将左右两边的鳃完整地取出，放在培养皿里（要分开放置），并附上左右标记。剪取一小块鳃组织（应从每一边鳃的第一片鳃片接近两端的位置剪取），放在载玻片上，滴一滴清洁水，盖上盖玻片轻压制成水封片，在显微镜（10×10以上镜头）下检查。

2.3 结果判定

目检症状结合镜下观察，100倍显微镜下平均每视野内车轮虫计数达到10个及10个以上时，判定为车轮虫病；车轮虫计数不足10个时，判定为车轮虫感染。

3.斜管虫病

3.1 现场样品目检

检查鱼体。病鱼体瘦发黑，呼吸困难，鱼苗有拖泥症状。当寄生数量少时宿主鱼不显症状，但大量寄生时，皮肤及鳃丝有大量黏液分泌，体表形成苍白色或淡蓝色的一层黏液层。

3.2 实验室检测

诊断时滴加试剂为0.85%生理盐水，其他步骤同4.2。

3.3 结果判定

目检症状结合镜下观察，100倍显微镜下平均每视野内斜管虫计数达到10个及10个以上时，判定为斜管虫病；斜管虫计数不足10个时，判定为斜管虫感染。

4.小瓜虫病

4.1 现场样品目检

检查鱼体。病鱼体色发黑，消瘦，游动异常，体表或鳃上可见1mm左右的小白点，病情严重时，鱼体表伴大量粘液，用镊子刮下白点或黏液，放在解剖盘上，滴一滴生理盐水，静置1～2min，在光亮的地方仔细观察，如果见到一个个白色小圆球在慢慢地游动，且大多数集中在水滴的边缘，根据上述的症状可以初步确诊。

4.2 实验室检测

4.2.1 体表

用解剖刀刮取体表两侧黏液，置于载玻片上，滴一滴生理盐水，用镊子将组织黏液分散，盖上盖玻片，用拇指轻轻压片，在显微镜或解剖镜下检查。

4.2.2 鳍

目检正常的鱼，剪下各鳍，置于载玻片上，滴一滴生理盐水，解剖镜下检查。

目检鱼体各鳍如有溃烂或白点，用镊子刮取溃烂或白点部位，置于载玻片上，滴一滴生理盐水，用盖玻片盖上轻压，解剖镜或显微镜下检查。

4.2.3 鳃

用剪刀将左右两边的鳃完整地取出，放在培养皿里（要分开放置），并附上左右标记。剪取一小块鳃组织（应从每一边鳃的第一片鳃片接近两端的位置剪取），放在载玻片上，滴一滴生理盐水，盖上盖玻片轻压，在解剖镜或显微镜下检查。如鳃上肉眼可见白点或孢囊，则用镊子刮取白点或孢囊，或取整片鳃丝压片，显微镜下检查。

4.3 结果判定

目检症状结合镜下观察，40倍显微镜下平均每视野内小瓜虫计数达到10个及10个以上时，判定为小瓜虫病；小瓜虫计数不足10个时，判定为小瓜虫感染。

5.刺激隐核虫病

5.1 现场样品目检

滴加试剂为30‰人工配制海水，其他步骤同6.1。

5.2 实验室检测

诊断时滴加试剂为30‰人工配制海水，其他步骤同6.2。

5.3 结果判定

目检症状结合镜下观察，40倍显微镜下平均每视野内刺激隐核虫计数达到10个及10个以上时，判定为刺激隐核虫病；刺激隐核虫计数不足10个时，判定为刺激隐核虫感染。

6.粘孢子虫病

6.1 现场样品目检

粘孢子虫的多数种类，寄生于鱼的体表、鳃、肠道及体腔，都表现出肉眼可见的症状，即白点状或白色的瘤状孢囊，孢囊形状和大小不规则，颜色灰白而不透明。用镊子取下一个孢囊放在载玻片上，滴一滴生理盐水，用盖玻片盖上轻压，如孢囊破裂并流出乳白色液体，可初步诊断为粘孢子虫病。

6.2 实验室检测

6.2.1 镜检

在400倍显微镜下，压破的孢囊液体中清晰可见孢子，可诊断为粘孢子虫病。一个孢囊中有成千上万个孢子虫。

6.2.2 体表

检查体表，用解剖刀刮取鳞片下的瘤状物，置于载玻片上，加一滴生理盐水，盖上盖玻片轻压，显微镜下检查。

6.2.3 鳍

检查方法参见6.2.2，镜检倍数为400倍。

6.2.4 鳃

检查方法参见6.2.2，镜检倍数为400倍。

6.2.5 体腔

打开鱼体腹腔，仔细观察显露出的部位有无可疑病变。如发现白点，或较大孢囊，有可能是粘孢子虫寄生。用镊子刮取白点部位或孢囊置于载玻片上，滴一滴生理盐水，盖上盖玻片轻压，见孢囊破裂后，显微镜下检查。

6.2.6 肠道

将肠道外壁上所有脂肪去除干净，把肠前后伸直摆在解剖盘上。将肠分为前、中、后三段，各取一段，用剪刀从与肠平行的方向剪开一个小小切口，用镊子从切口上取一小滴内容物放在载玻片上，滴一滴生理盐水，盖上盖玻片轻压，显微镜下检查，每段同时检查两片标本。剪开肠道后，如见白点或孢囊附着，直接用解剖刀刮取白点或孢囊于在载玻片上，压片后，显微镜下检查。

6.3 病原体记数及结果判定

6.3.1 病原体记数

6.3.1.1 计数符号用“+”表示：“+”表示有；“ ++”表示多；“ +++”表示很多。

6.3.2.1 高倍显微镜400倍一个视野下，有1～20个虫体时记“+”，21～50个虫体时记“++”，50 个以上的虫体时记“+++”。

6.3.2 结果判定

检出粘孢子虫则判定为粘孢子虫病。

7.指环虫病

7.1 现场样品目检

当虫体大量寄生时，病鱼体表可见一层灰白色的黏液，鱼体失去光泽，游动极不正常。

7.2 实验室检测

该病不会出现白点或孢囊，无须此步检测。其他步骤参见6.2。

7.3 结果判定

目检症状结合镜下观察，40倍显微镜下平均每视野内指环虫计数达到5个及5个以上时，判定为指环虫病；指环虫计数不足5个时，判定为指环虫感染。

8.头槽绦虫病

8.1 现场样品目检

严重感染时，体重减轻，显得瘦弱，不摄食，体表发黑，离群水面，口常张开。鱼肠前段第一盘曲膨大成胃囊状，直径较正常增大3倍，并使肠壁异常扩张，形成皱襞萎缩。肠前段伴有慢性炎症，肠道会出现机械性堵塞。

8.2 实验室检测

8.2.1 解剖

剖开鱼腹，剪开前肠扩张部位，即可见白色带状虫体聚居。

8.3 结果判定

检出头槽绦虫则判定为头槽绦虫病。

（通联：730030，甘肃省渔业技术推广总站 兰州市中山路113号 电话：13659414531）