联合检测Hsp90α、CEA和CA19-9在大肠癌诊断中的应用*

梁勇明，冯广满，詹前柱，冼土生，黄少浩

(中山市黄圃医院检验科，广东 中山 528429)

近年由于人们饮食结构和生活方式的改变、环境污染及人口老龄化的加重，我国大肠癌的发病率正逐年上升，严重危害公众健康。70%的新诊断大肠癌患者为III期和IV期，预后很差，因此早期诊断和治疗是提高大肠癌治疗疗效及改善患者预后的关键[1]。目前热休克蛋白90α(Hsp90α)、癌胚抗原(CEA)和糖类抗原19-9(CA19-9)是临床上最常用的大肠癌早期诊断的辅助诊断肿瘤标记物，由于其具有快速、简单、创伤小等优点，很容易被患者接受。本研究旨在探究大肠癌患者Hsp90、CEA和CA19-9在大肠癌患者血液中表达情况，评价三种标志物联合检测对大肠癌的诊断价值，且分析其与临床病理分化程度的关系，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

收集2015年1月至2016年12月就诊于我院的大肠癌患者100例和大肠癌高危人群150例，同时选取健康查体的正常人50例为对照组。大肠癌患者均经B超、纤维肠镜、CT和病理检查明确诊断。大肠癌的高危人群包括以下几类：有下消化道出血症状者，尤其是便血、大便次数增多、粘液便及腹痛者；有大肠癌家族史的患者；慢性溃疡性结肠炎患者；有家族性腺瘤性息肉病和遗传性非息肉病性结直肠家族史的成员。

1.2 方法

所有研究对象均采集空腹静脉血5mL，采集血清时加入总体积1%的抗凝剂，室温或4℃静置半小时后，800～1000rmp×5min分离取上清；采集血浆时不加抗凝剂，立即离心800～1000rmp×5min分离取上清。血液标本采集后均放置-20℃冷冻或4℃保存备用。采用电化学发光法检测血清CEA、CA19-9水平，使用Roche Elecsy2010全自动电化学发光仪和提供的配套试剂盒严格按操作步骤进行检测；采用ELISA法检测血浆Hsp90α水平，检测试剂盒购自上海江莱生物科技有限公司。

1.3 观察指标

正常参考范围：Hsp90α<82.06ng/mL，CEA<3.40ng/mL，CA19-9<39ng/mL，联合检测时一项或一项以上为阳性都为联合检测阳性，三项同为阴性时为联合检测阴性。观察Hsp90α单独检测和联合检测对大肠癌诊断的灵敏度、特异性和有效性。计算公式：灵敏度=真阳性率，特异性=真阴性率，有效性=正确诊断率。

1.4 统计学方法

2 结 果

2.1 各组人群三种肿瘤标记物水平比较

大肠癌患病组的血浆Hsp90α、血清CEA和CA19-9水平明显高于健康对照组和大肠癌高危组(P<0.05)，健康对照组的血浆Hsp90α及血清CEA、CA19-9水平与大肠癌高危组相比，差异无统计学意义(P>0.05)。

表1 各组人群血浆Hsp90α及血清CEA、CA19-9水平比较

与健康对照组比较，*P<0.05；与大肠癌高危组比较，#P<0.05

2.2 不同病理分化程度大肠癌患者三种肿瘤标记物的水平差异

三组不同病理分化程度的100例大肠癌患者的血浆Hsp90α、血清CEA和CA19-9水平无显著性差异(P>0.05)。

表2 不同病理分化程度大肠癌患者三种肿瘤标记物的水平比较

2.3 联合检测三种肿瘤标记物对大肠癌诊断的评价

Hsp90α单独检测的灵敏度为71.00%，特异性为84.67%，有效性为55.67%；联合检测组的灵敏度为87.00%，特异性为74.67%，有效性为61.67%。Hsp90α组的灵敏度明显低于联合检测组，但特异性较高，以上差异均有统计学意义(P<0.05)。

表3 联合检测三种肿瘤标记物对大肠癌诊断的评价(n)

3 讨 论

大肠癌包括直肠癌和结肠癌，是临床上最常见的恶性肿瘤之一，其发病率和死亡率分别位于第三位和第四位，早期诊断和治疗是提高大肠癌治疗疗效及改善患者预后的关键。肿瘤标志物在肿瘤患者体内的含量远远超过健康人群，在肿瘤普查、诊断、判断预后和转归、评价治疗疗效和高危人群随访观察等方面都具有较大的实用价值。

Hsp90α是一种高度保守的分子伴侣，在细胞内含量丰富，作为一个全新的肿瘤标志物被学者所关注。分泌型Hsp90α在帮助肿瘤细胞转移和提高肿瘤细胞侵袭力方面具有重要的作用，其分泌量与肿瘤细胞恶性程度正相关[2]。此外，辅助诊断临床试验结果显示，Hsp90α符合率优于癌胚抗原和细胞角蛋白[3]。目前研究已经证明Hsp90α是肺癌相关肿瘤标志物，可用于肺癌患者病情监测和疗效评价，对手术和内科治疗的肺癌患者血浆中Hsp90α含量进行动态监测，发现其浓度变化与患者病情变化具有明显相关性[4]。Hsp90α也可作为早期诊断肝癌的血清学肿瘤标志物，具有较高的临床应用价值[2]。另一方面，研究表明Hsp90α还具有广谱的特性，在乳腺癌、结直肠癌、前列腺癌、胰腺癌、胃癌中也有表达[1]。前期有研究结果表明Hsp90α的表达与结肠癌的浸润进展密切相关[4]。本研究结果显示大肠癌患病组的血Hsp90α水平明显高于健康对照组和大肠癌高危组，检测Hsp90α对大肠癌人群的筛查及早期诊断有重要的意义。

CEA是最早用于临床也是目前最常用的结直肠癌肿瘤血清标记物，当血清CEA水平比正常值持续升高5～10倍时，强烈提示有恶性肿瘤，尤其是大肠癌的存在，然而其也存在灵敏度高特异性不高的不足，在肿瘤早期诊断作用不明显[5]。CA19-9在胰腺癌、胆囊癌和结肠癌中有较高的阳性率[6]。CEA和CA19-9是消化道肿瘤患者实验室常规检测的标志物，研究认为两者与大肠癌的TNM分期、浸润深度、分化程度、病理类型、淋巴结转移等因素有关，可能成为结直肠癌术后复发或转移的预测因子[7-8]。有研究表明低分化结直肠癌CEA、CA19-9水平显著高于高分化结直肠癌[9]，而本研究结果显示三组不同病理分化程度的大肠癌患者的血浆Hsp90α、血清CEA和CA19-9水平无显著性差异，可能与筛选样本时的偏移和样本量较小有关。本研究数据统计结果还显示Hsp90α联合CEA和CA19-9检测后对大肠癌诊断的灵敏度明显提高，但特异性有所下降，进一步验证此诊断结果值仍需大样本多中心的实验。

综上所述，联合检测Hsp90α、CEA和CA19-9对大肠癌辅助诊断的价值较高，有助于大肠癌的早期诊断。

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