35%氟唑·嘧菌酯微囊悬浮-悬浮剂高效液相色谱分析

胥亚云，吴建兰，曹新梅，陈玲玲，高枭颖(联合国南通农药剂型开发中心，江苏南通 226006)

35%氟唑·嘧菌酯微囊悬浮-悬浮剂高效液相色谱分析

胥亚云，吴建兰，曹新梅，陈玲玲，高枭颖
(联合国南通农药剂型开发中心，江苏南通 226006)

采用高效液相色谱法，以色谱柱ZORBAX SB-C18(4.6×l50 mm，5 μm)为固定相，以甲醇和水为流动相，用二极管阵列检测器(DAD)，在225 nm，同时测定35%氟唑·嘧菌酯微囊悬浮-悬浮剂中的有效成分。结果表明，氟环唑和嘧菌酯的线性相关系数分别为0.999 7、0.999 6，标准偏差分别为0.027、0.18，变异系数分别为0.53%、0.60%，平均回收率分别为99.8%、99.5%。

氟环唑；嘧菌酯；高效液相色谱；分析

氟环唑(epoxiconazo1e)属内吸型三唑类杀菌剂，兼具保护和治疗作用，其作用机理是抑制病菌甾醇的合成，从而使病菌细胞壁的形成受到阻碍[1]。嘧菌酯(azoxystrobin)是内吸型甲氧基丙烯酸酯类农药，能够抑制真菌线粒体的呼吸作用来阻止其能量的合成，能够有效防治白粉病、叶斑病、霜霉病等病害，被广泛应用于稻谷、果蔬等农作物，且对作物安全性高[1]。二者合用，氟环唑对嘧菌酯防治水稻纹枯病有明显的增效作用[2]。35%氟唑·嘧菌酯微囊悬浮-悬浮剂为南通联农佳田作物科技有限公司的产品，主要用于小麦纹枯病、稻瘟病、稻曲病的防治。目前氟环唑和嘧菌酯单剂的分析方法已有报道[3,4]，但尚未见该复配制剂分析方法公开报道。本文采用液相色谱法同时测定试样中氟环唑和嘧菌酯的含量，方法简便、准确，适用于农药制剂质量控制。

1 试验部分

1.1 仪器与试剂

仪器：安捷伦1200高效液相色谱仪；二极管阵列检测器(DAD)；色谱柱：Agilent ZORBAX SB-C18(4.6×l50 mm，5 μm)，不锈钢柱；过滤器：滤膜孔径约0.45 μm。

水：新蒸二次蒸馏水；甲醇：色谱级；氟环唑标样：已知质量分数98.6%(上海市农药研究所)，嘧菌酯标样：已知质量分数98.2%(上海市农药研究所)；试样：35%氟唑·嘧菌酯微囊悬浮-悬浮剂(南通联农佳田作物科技有限公司)。

1.2 色谱条件

流动相：甲醇/水=63/37(体积比)；流速：1.0 mL/min；柱温：室温；检测波长：225 nm；进样体积：5 μL。保留时间：嘧菌酯约为5.3 min，氟环唑约为11.4 min。

1.3 测定步骤

1.3.1 标样溶液的配制

称取氟环唑标样0.04 g和嘧菌酯标样0.24 g (均精确至0.000 2 g)，置于50 mL容量瓶中，用甲醇溶解并定容，作为标准储备溶液。准确移取上述溶液10 mL于另一50 mL容量瓶中，以流动相定容，摇匀，过滤，备用。

1.3.2 试样溶液的配制

称取试样0.8 g(精确至0.000 2 g)，置于50 mL容量瓶中，用甲醇超声溶解10 min，冷却后用甲醇定容。准确移取上述溶液10 mL于另一50 mL容量瓶中，以流动相定容，摇匀，过滤，备用。

1.3.3 测定

在上述色谱条件下，待仪器基线稳定后，连续注入数针标样溶液，计算各针峰面积的变化率，直至相邻2针峰面积变化≤1.0%后，方可进行样品分析。进样顺序为：标样溶液、试样溶液、试样溶液、标样溶液。典型色谱图见图1、2。

图1 氟环唑和嘧菌酯标样色谱图

图2 35%氟唑·嘧菌酯微囊悬浮-悬浮剂色谱图

1.3.4 计算

将测得的2针试样溶液以及试样前后2针标准溶液中氟环唑(或嘧菌酯)的峰面积分别平均，试样中氟环唑(或嘧菌酯)的质量分数W(%)按下式进行计算：

式中：A1为标样溶液中氟环唑(或嘧菌酯)峰面积的平均值；A2为试样溶液中氟环唑(或嘧菌酯)峰面积的平均值；m1为氟环唑(或嘧菌酯)标样的质量，g；m2为试样的质量，g；p为氟环唑(或嘧菌酯)标样的质量百分含量，%。

2 结果与讨论

2.1 检测波长的选择

检测波长直接影响峰面积的大小，选择任一浓度的混合标准溶液进样，通过DAD检测器，在190～400 nm范围内进行光谱扫描，得到氟环唑和嘧菌酯的紫外吸收光谱图(图3、4)。从图可以看出，二者的最大吸收波长分别为205 nm和201 nm，考虑到甲醇的截止波长为205 nm，为了避免溶剂的干扰，选择225 nm作为检测波长。

图3 氟环唑光谱图

图4 嘧菌酯光谱图

2.2 流动相的选择

为了得到较好的峰形、合适的保留时间及较高的分离度，首先选择甲醇-水体系作为流动相。在Agilent ZORBAX SB-C18(4.6×l50 mm，5 μm)色谱柱上比较不同体积配比甲醇-水流动相的洗脱能力，发现甲醇/水体积比为63/37时，2种物质分离度良好，峰形对称，且保留时间适当。因此选择甲醇/水=63/37(体积比)作为流动相。

2.3 方法的线性相关性测定

用移液管分别移取1.3.1中的标准储备液1.0、2.0、5.0、8.0、10.0 mL于5个25 mL容量瓶中，用甲醇稀释，定容至刻度摇匀，制成系列标准溶液。在上述色谱条件下测其峰面积。分别以浓度和峰面积为X轴和Y轴，绘制线性关系曲线(图5、6)，得到回归方程，分别为y氟环唑=5 949x+5.233 3，y嘧菌酯=15 197x+233.31，相关系数分别为R氟环唑=0.999 7，R嘧菌酯=0.999 6。

2.4 方法精密度试验

对同一样品进行5次平行测定。统计结果为：氟环唑的含量平均值为5.03%，标准偏差为0.027，变异系数为0.53%；嘧菌酯的含量平均值为30.23%，标准偏差为0.18，变异系数为0.60% (表1)。

表1 方法精密度试验

图5 氟环唑线性关系图

图6 嘧菌酯线性关系图

2.5 方法准确度试验

在已知含量的5个平行样品中，分别加入1.3.1中的标准储备溶液1、2、3、4、5 mL，按照上述色谱条件和操作方法进行分析，测得加标回收结果(表2)。结果显示，氟环唑的回收率为97.55%～100.63%，平均回收率为99.8%；嘧菌酯的回收率为98.37%～100.62%，平均回收率为99.5%。

表2 准确度试验

2.6 结论

试验结果表明，本方法可以测定35%氟唑·嘧菌酯微囊悬浮-悬浮剂中2种有效成分的含量。方法线性关系良好，精密度和准确度高，操作简便、快捷，是一种较为实用的分析方法。

[1] 刘长令. 世界农药大全:杀菌剂卷[M]. 北京: 化学工业出版社,2006:122－126,286.

[2] 李阳,俞永健,郑仕华,等. 氟环唑对嘧菌酯防治水稻纹枯病的增效作用[J]. 浙江农业科学,2014,(8): 1222－1224.

[3] 陈振山,王素丽,刘丰茂. 氟环唑高效液相色谱分析[J]. 农药,2004,43(12): 557－558.

[4] 于康平,李泽方,徐韶康,等. 嘧茵酯的高效液相色谱分析[J]. 农药,2008,47(4): 275－276.

HPLC analysis of Epoxiconazo1e·Azoxystrobin 35% ZC

XU Yayun,WU Jianlan,CAO Xinmei,CHEN Lingling,GAO Xiaoying
(UN Nantong Pesticide Formulation Development Center,Nantong 226006,Jiangsu. China)

A method was established for the separation and determination of epoxiconazo1e and azoxystrobin in epoxiconazo1e·azoxystrobin 35% ZC by HPLC using methanol and water as mobile phase,ZORBAX SB-C18column as stainless steel pillar stuffed,DAD,and 225 nm wavelength. The results showed that the linear correlation coeficients for epoxiconazo1e and azoxystrobin were 0.999 7 and 0.999 6,the standard deviations were 0.027 and 0.18，the variation coeffients were 0.53% and 0.60%,the average recovery was 99.8% and 99.5% respectively.

epoxiconazo1e; azoxystrobin; HPLC; analysis

10.16201/j.cnki.cn31-1827/tq.2017.06.12

TQ450.7

A

1009-6485(2017)06-0056-03

胥亚云，Tel: 0513-83538462，E-mail: nantongxyy@163.com。

2017-09-05。