Rh系统类抗体在临床输血中的鉴定及应用(附1例分析)

王晓华，骞田



·论著·

Rh系统类抗体在临床输血中的鉴定及应用(附1例分析)

王晓华，骞田

目的：通过对1例自身免疫性溶血性贫血患者(AIHA)Rh系统类抗体的鉴定与分析，指导临床安全、有效地用血。方法：应用盐水法、抗人球蛋白法及酸放散等试验对患者血浆和放散液中的抗体进行鉴定，并结合其自身红细胞血型抗原分析其抗体特异性。结果：患者血浆及放散液中抗体具有抗-D特异性，且自身红细胞抗原RhD为阳性，具备Rh血型系统类抗体的血清学特征，经鉴定为类抗-D抗体。予D抗原阴性血液配合性输注，临床输注有效。结论：少数AIHA患者自身抗体具有类Rh血型系统特异性，在临床输血中应予相应抗原阴性的血液配合性输注，保障临床用血安全、有效。

自身免疫性溶血性贫血；Rh血型系统； 类抗体； 输血

临床输血过程中，经常会遇到自身免疫性溶血性贫血患者输血治疗的情况，该类患者血浆中的自身抗体大多数没有特异性，与自身红细胞凝集，也与所有供者的红细胞凝集，这就增加的配血的难度，很难找到相容的血液制品；也有极少数的自身抗体有类似于血型抗体的“特异性”。笔者就近期实验工作中遇到的1例类Rh系统的自身抗体鉴定分析如下。

1 资料与方法

1.1 资料 患者女，56岁。于2016年2月因脑梗塞入院，后追加诊断自身免疫性溶血性贫血；患者入院后备血,抗体筛查结果为阳性。

1.2 方法 (1)仪器及试剂：TD-3A型微柱孵育器，FTQ型离心机(长春博研)，离心机(KUBOTA KA-220)、DK-600型电热恒温水槽；抗球蛋白微柱凝胶卡(长春博讯)；单克隆抗-A，抗-B，ABO反定型细胞，单克隆抗-D(IgM)，抗-E，抗-C，抗-e，抗-c，抗人球蛋白试剂、不规则抗体筛检细胞(20157041)、谱细胞(批号20160104)以上试剂均为上海血液生物产品，酸放散试剂盒(长春博讯)，各种试剂均在有效期之内使用。(2)实验方法：血型鉴定采用盐水试管法和微柱凝胶法，不规则抗体筛选试验及交叉配血分别采用盐水试管法、抗人球蛋白凝胶技术检测。用盐水法和微柱凝胶抗球蛋白法对标本进行抗体筛检和鉴定。直接抗人球蛋白试验同时使用多抗和单抗-IgG和抗-C3检测，对抗-IgG阳性患者红细胞进行酸放散，方法按照操作说明书，对放散液进行抗体检测。

2 结果

2.1 血型鉴定 患者血型为AB型，RhD阳性，Rh表型CcDEe，直接抗人球蛋白试验：多抗及抗-IgG均为阳性，抗-C3为阴性。见表1。

2.2 抗体筛选 取患者血清与筛选细胞及自身细胞在盐水介质反应为阴性，抗人球蛋白方法均为阳性。见表2。

2.3 抗体鉴定及放散实验 为进一步确定该抗体有无特异性，取患者血清与谱细胞在盐水介质及抗人球蛋白介质反应，结果7，9号为阴性反应，其余细胞均为阳性反应，根据反应格局，说明患者血清中存在类抗-D抗体。采用酸放散的方法对患者红细胞进行放散，放散液与谱细胞反应，如果浓度太高，进行稀释。放散液反应格局同血清，放散液中抗体特异性与血清中一致。见表3。

表1 ABO和Rh血型鉴定及直接抗球蛋白试验结果

表2 抗体筛选结果

表3 抗体鉴定结果

2.4 交叉配血实验 选择与患者同型的AB型RhD阴性的供血者洗涤红细胞进行交叉配血实验，盐水法、抗人球蛋白法主侧均为阴性，同时加一RhD阳性悬浮红细胞做对照，盐水法主侧均无凝集溶血，抗人球法主侧凝集，进一步验证了类抗-D抗体存在。经血液配合性实验，为患者备血2个单位，输注效果良好，无输血反应，血红蛋白有所上升。后患者经激素及其他等对症治疗之后情况好转，未再输血。

3 讨论

自身免疫性溶血性贫血(AIHA)是机体免疫功能调节紊乱，产生了针对自身红细胞的抗体和(或)补体，自身抗体吸附于红细胞表面导致红细胞溶血[1]。该类患者血浆中的自身抗体大多数没有特异性，与自身红细胞及所有供者的红细胞凝集；也有少部分自身抗体具有“特异性”，即类同种特异性自身抗体。患者血型为AB型，RhD阳性，抗体筛查结果为阳性，进一步谱细胞血清和放散液抗体鉴定发现具有抗-D特异性，而患者血型为RhD阳性，这与自身血型结果相矛盾。患者单抗-IgG阳性，对其红细胞进行放散，结果放散液中抗体特异性同血清中一致，可排除同种抗体的存在[2]。另外，患者贫血严重，取其红细胞做自身抗体吸收不太可取，患者血清血清中抗体量少(血清与谱红细胞反应强度≤1+)，其强度不足以掩盖明显的同种抗体,因此我们未进行自身吸收试验[3]。患者为自身免疫性溶贫患者，因自身免疫性血管炎导致脑出血，结合病史，考虑该抗体为类同种特异性自身抗体。

Rh系统是血型系统中最复杂的血型系统，少数AIHA患者的自身抗体具有的血型特异性以Rh特异性为多见[4]。Rh系统中又以类抗-e抗体最常见[5]，其次抗-c,-E,-D,-C均可见报道。关于产生类抗-D抗体产生的机制尚未明确，有报道认为可能与D抗原D变异体有关，D变异体导致D抗原表达减弱或者性质上的改变，这些个体都有可能出现类D抗体，其产生的原因还有待进一步探讨[6]。

AIHA患者输血的危险性远远大于普通患者,输血不当就会加重溶血。因此，对AIHA的输血治疗应严格掌握其输血指征,要充分考虑其输血的必要性和危险性[7]。大多数AIHA患者自身抗体没有特异性，在病情危急紧急输血时，配血方案采取最低不相容原则即选取凝集度最低的血液少量输注。输注时放慢速度，密切观察。对于少数AIHA患者自身抗体有类特异性，我们在为患者输血时，应选择配合型血液输注，先不必考虑患者自身相应的抗原，避开类抗体特异性的红细胞抗原进行输注。有报道认为避开类抗体特异性的红细胞可以明显延长体内存活时间，国内报道的类抗体方面的文献还是以主张避开类抗体方案为主[3]也有人主张类同种自身抗体AIHA患者可能不引起急性或延迟溶血性输血反应。如果AIHA患者血清中只含有类同种自身抗体，不一定要输注抗原阴性红细胞，有同种抗体的患者才有必要输注抗原阴性红细胞，上述观点只是一种推测，还需要大量的实验来证实[8]。患者有类抗-D抗体，经血液配合性实验，为之备AB型RhD阴性洗涤红细胞2个单位，输注效果良好，无输血反应，血红蛋白有所上升。后患者经激素及其他等对症治疗之后情况好转，未再输血。

[1] 王明慧，杨涛，方春燕，等．不同输血方法在自身免疫性溶血性贫血患者中的效果分析[J]．现代医学，2014，42(8):880-883.

[2] 黄海东，李婉红，王丽阳，等.Rh血型系统类抗体在临床输血中的检测与研究[J]．中国卫生检验杂志，2016，26(1):62-63.

[3] 向东，刘曦，王健莲，等.红细胞温自身抗体的血清学特点分析及配血对策[J]．中国输血杂志，2008，21(12):924-926.

[4] 杨绍明，兰炯采，胡利亚，等.自身免疫溶血性贫血患者抗体筛选观察[J]．中国实验血液学杂志，2004，12(6):849-851.

[5] 李翠莹，徐弘，何花，等.类抗-C、类抗-e检出1例[J]．中国输血杂志，2010，23(6):478-479.

[6] 杰夫·丹尼尔．人类血型[M].朱自严译.北京:科学出版社，2007:232-267.

[7] 汪传喜，田兆嵩.AIHA病人的输血前检查和成分输血[J]．中国输血杂志，2000，13(1):61-65.

[8] 袁文声，易峰，何锐洪，等.自身免疫性溶血性贫血患者的类同种自身抗体检测及其输血对策探讨[J]．实验与检验医学，2015，33(4):403-409.

Identification and application of Rh blood group system similar antibodies in clinical blood transfusion(a case analysis attached)

WANGXiao-hua，QIANTian．

(DepartmentofTransfusion,TheFirstPeople'sHospitalofLianyungang,Jiangsu222002,China)

Objective:To offer guide for the safety and effectiveness of clinical blood use by identification and analysis of Rh blood group system similar antibodies in patients with autoimmune hemolytic anemia (AIHA).Methods：Saline method, antiglobulin test and acid elution test were employed to identify the antibodies in plasma and elution, and the antibodies' specificity was analyzed by combining its own red blood cell group antigen.Results:The antibodies had the serological characteristics of Rh blood group system which were identified as similar anti-D antibody.The antibodies in plasma and elution had anti-D specificity and its red blood cell RhD antigen were positive.The clinical effect was better in the case of cooperative D antigen-negative blood transfusion.Conclusion:The small number of AIHA patients with the specificity of similar Rh blood group system should be infused with corresponding antigen negative blood with antibodies in order to ensure the safety and effectiveness of clinical blood use.

Autoimmune hemolytic anemia; Rh blood group system; Similar antibodies; Blood transfusion

江苏省连云港市第一人民医院 输血科，222002

王晓华(1981-)，女，主管技师，研究生。

10.14126/j.cnki.1008-7044.2017.01.013

R 457.11

A

1008-7044(2017)01-0034-03

2016-08-25)