实验准备及技术人员在提高医学微生物学教学质量中的作用

李雪萍，潘婷婷，钱利生，袁正宏，瞿涤

复旦大学基础医学院病原生物学系，医学分子病毒学教育部/卫生部重点实验室，上海 200032

实验准备及技术人员在提高医学微生物学教学质量中的作用

李雪萍，潘婷婷，钱利生，袁正宏，瞿涤

复旦大学基础医学院病原生物学系，医学分子病毒学教育部/卫生部重点实验室，上海 200032

实验课是现代医学微生物学课程中不可或缺的部分。然而，在考虑医学微生物学实验教学改革时，我们往往忽略了实验课教学准备工作及实验技术人员在高质量完成教学任务中的重要性。本文结合复旦大学2000年前、2000—2010年及现阶段医学微生物学实验教学改革情况，分析并讨论实验课教学准备工作必须考虑的问题及所需实验条件，提出实验技术人员素质及实验课教学准备在保证医学微生物学实验教学质量中的重要性，为医学微生物学实验教学改革提供借鉴。

医学微生物学；医学微生物学实验课；实验准备；实验室生物安全；实验技术人员

现代社会发展迅猛，新的微生物和突变微生物不断出现，并引发各种新型传染病及疾病，对人类健康和社会经济发展造成重大影响。因此，给医学生传授医学微生物学相关知识，对培养医学专门人才、预防和控制传染病、提高人类健康水平有积极作用。医学微生物学理论课主要讲授人体健康和疾病相关病原微生物的生物学特性、致病特征、诊治等理论知识，实验操作则有助于加强学生的理解及理论与实践的融会贯通，已成为现代《医学微生物学》课程中不可或缺的部分。然而，在考虑医学微生物学实验教学改革时，我们往往忽略了实验课教学准备工作及实验技术人员在高质量完成教学任务中的重要性。本文结合复旦大学医学微生物学实验教学内容，总结和探讨了实验课教学准备及实验技术人员在保证医学微生物学实验教学质量中的重要性。

1 实验教学准备是医学微生物学实验教学改革中必要考虑的因素

为培养学生的动手能力及发现问题、分析问题、解决问题能力，结合临床实际发展需求，应不断改进医学微生物学实验教学内容。在医学微生物学实验课教学改革设计和实施过程中，必须从实验准备所需条件、工作量及实验人员综合素质等出发，考虑所开设实验内容的可行性。根据医学科学和技术发展及临床实践的需要，我们在保留医学微生物学核心实验内容的基础上，适当增加或调整了部分内容(表1)。

随着我国对实验室生物安全管理的加强，我们在医学微生物学实验课中也突出了生物安全教育和无菌操作培养，增加了相关生物安全教育和实践内容。因此，在准备实验材料时，应提前购置足量的生物安全相关个人防护装备(手套、防护服、帽子、口罩等)，保证所需用量。在实验课前后，督促带教教师要求学生按规范操作，进行个人防护装备的穿戴和脱卸以及正确的方法洗手。此外，通过参观生物安全三级/二级(biosafety level 3/biosafety level 2，BSL-3/BSL-2)实验室或医院临床检验科，加强学生的生物安全意识；通过消毒灭菌实验，验证不同消毒方法或消毒剂的抗菌效果，增强学生的生物安全实战能力。

从医学微生物学教学实验室的生物安全考虑，实验中我们采用“肠道标本的分离鉴定”替代涉及致病性金黄色葡萄球菌的“血标本分离鉴定”；采用临床常用的法国梅里埃公司生化反应条替代原传统肠道菌生化反应(试管法)。这样一方面减少教学准备工作量，另一方面使学生实际操作经历从标本采集、分离、革兰染色、纯化转种、生化反应、药敏试验到结果读取这一临床常规细菌检测的全过程，提高综合素质。此外，因目前性病的发病率显著升高，我们在实验内容中增加了临床梅毒初筛试验，即梅毒抗体检测试验——快速血浆反应素试验(rapid plasma reagin test，RPR)。为减少实验准备工作量，在不影响教学质量的情况下，用“细菌耐药质粒接合试验”替代 “细菌耐药质粒转化试验”；病毒学实验中的“细胞传代培养、病毒接种和病变观察实验”改为“正常细胞和病变细胞的显微镜观察”示教。

表1医学微生物学实验课程内容的改进及对实验课准备的要求

Tab.1Improvedmedicalmicrobiologicalexperimentalcourseandpreparationofexperiments

开设医学微生物学实验课内容2000年前2000—2010年2010年后增加的理由/意义实验目的对实验课准备的要求及工作原则细菌学实验室生物安全教育和实践2003年SARS暴发后，我国颁布了实验室生物安全相关法律法规，加强培养学生的生物安全意识，并进行相应防范参观BSL⁃3/BSL⁃2实验室或医院临床检验科，增加学生对实验室生物安全的了解；病原微生物实验操作过程中加强个人防护；按照法律法规要求，进行实验废物的处置，定点回收和焚烧 细菌形态及特殊结构观察示教同左同左通过细菌形态和特殊结构的示教，帮助学生加深理解和掌握不同病原体的致病性、免疫性、诊断及预防由于示教片易褪色和损坏，需及时更新补充；因购买的示教片质量不佳，有时需实验准备人员自己制作；督促并检查带教老师于示教后必须及时清理示教片，同时须将示教显微镜镜头的镜油擦干净，归位

续表1

续表1

续表1

表2目前不再开设的实验内容

Tab.2Canceledexperimentcontents

实验名称实验内容开设时间不继续开设的原因改进细菌质粒转化大肠埃希菌氨苄西林耐药质粒转化(含抗生素平板、普通平板)1997—2005年实验准备工作量大，实验步骤多，影响实验结果的因素多，实验成功率低改为耐药质粒接合试验。实验准备工作量减少，学生操作成功率提高，有助于加深理解细菌种间或种内基因水平传递病毒感染所致细胞病变学生操作：细胞传代，病毒接种，观察细胞病变1997—2011年实验条件要求高，实验准备工作量大，对带教教师要求高，实验室生物安全风险高改为示教血标本分离鉴定(金黄色葡萄球菌)标本分离，单菌落革兰染色和转种，生化反应，药敏试验1990—2004年金黄色葡萄球菌致病性较强，实验室生物安全风险高改为肠道标本分离鉴定(2000年后)细菌的生化反应试管法，IMViC试验1990年前实验准备工作量大，生化反应实验内容有限在“肠道标本的分离鉴定”综合实验中，生化反应采用生化反应条(API，法国梅里埃公司)药敏试验纸片法和试管稀释法1997年前仅针对药学院本科生在“肠道标本的分离鉴定”综合实验中，采用纸片法药敏试验。面对所有医学本科生抗“O”试验玻片凝集试验2005年前临床上已很少开展抗“O”检测改为RPR凝集试验肥达试验试管凝集试验2015年前临床上已很少开展肥达试验流感病毒血凝与抑制试验流感病毒血凝试验与血凝抑制试验2000—2013年高致病性禽流感出现后，活禽市场关闭，新鲜鸡血采集困难，且实验室生物安全风险高改为示教

从实验室生物安全、实验准备工作量及临床实际开展的检测项目等方面考虑，有些传统的医学微生物学实验已不再列入医学微生物学实验课的教学内容(表2)。如传统的抗“O”试验、肥达试验等在临床上已不采用，且试剂准备工作量较大；因人高致病性禽流感的流行，相关管理部门关闭活禽市场，致使抗凝鸡血难以获取，同时考虑到生物安全问题，取消了原“流感病毒血凝与血凝抑制试验”的示教。

2 实验技术人员是保证医学微生物学教学质量的重要组成部分

医学微生物学实验教学存在实验内容多、学生多等情况，每个学生要完成十多个实验。在拥有完善医学微生物学教学条件(硬件)及充分实验教学准备工作的情况下，准备实验教学的技术人员及带教青年教师是完成实验教学的主体，其专业素养和敬业精神决定了教学质量。

2.1 实验教学中实验技术人员的素质要求

准备医学微生物学实验教学的技术人员不仅需具备较高的个人思想素养、扎实的专业基础知识、娴熟的操作技能，还需有严谨求实、认真仔细的工作作风，耐心、不计较个人得失、不讲情面的工作态度及良好的沟通能力[1-2]。为了能够做好充分的实验教学准备工作，实验技术人员必须做到：熟悉医学微生物学实验室生物安全的相关法律法规，根据国家要求与课程负责人共同制订教学实验室生物安全管理制度；具有良好的医学微生物学专业知识；熟练掌握医学微生物学规范操作技能；熟悉实验内容，做好预实验，且必须对每个实验步骤所用到的器材和试剂及其特性和规格了然于胸；根据实验教学内容的安排，整体考虑开设实验所必须准备的器材和试剂数量，并充分估计准备实验教学所需工作量，必要时及时向课程负责人寻求帮助；具有较强的实验室管理能力[3-5]。

2.2 实验技术人员在实验带教教师培养中的作用

目前，各高等院校均要求教师具有相应的学位，并有开展科学研究的能力，但教师来源和专业背景不一(多学科)，对所任教专业缺乏系统培训。因此，对青年教师开展医学微生物学规范操作培训，使其熟悉和掌握规范操作技能，已成为整个教学实验中不可或缺的一部分。只有合格的老师才能教出合格的学生。

由于医学微生物学实验教学的特殊性，为了保证教学质量，实验技术人员必须参与对带教教师进行系统的医学微生物学规范操作培训。培训内容包括：实验室安全(水、电、火、化学)及生物安全(个人防护、污染废物处置等)；实验课中突发事件的应急处置；实验准备过程及实验课所需相关材料；规范的医学微生物学实验操作技能。此外，实验技术人员还需与课程负责人共同指导青年教师完成实验课的总管任务，督促实验课总管协助并完成相关实验准备工作，这也对进行教学准备的实验技术人员提出了更高的要求。

2.3 实验技术人员在实验室安全管理中的重要作用

近年来，各地高等院校发生多次实验室安全事故，在社会上造成不良影响。因此，实验室的安全是确保实验教学有序进行的前提。目前，各单位将实验室安全作为头等大事来抓，由法人负责，建立层层负责的安全管理制度，各院系按照自身特点制订相关实验室安全制度。实验技术人员在整个实验教学过程中，除进行大量教学准备工作外，还应对医学微生物学教学实验室的生物安全及其他安全起执行、监督及管理的重要作用。

2.3.1实验技术人员在实验室安全管理中的职责每次实验后，技术人员要督促带教教师与学生做好消毒和清理工作；在学生离开实验室后，带教老师要再检查一遍水、电、煤及门窗，确保做到断水、断电、断煤气、关闭门窗，并登记签名；凡遇节假日及寒暑假，都要进行一次安全检查；所有配制化学药品的容器都要贴上清晰标签，以标明化学药品的特性和潜在危险；不同化学药品应储存于相应药品柜；装有腐蚀性液体的容器，储存位置应尽可能低，并加垫收集盘，以防倾洒引起安全事故；将有可能发生化学反应的药品试剂分开储存，以防相互作用产生有毒烟雾、火灾，甚至爆炸；挥发性物品需特殊储存条件，严禁在实验室储存剧毒药品[6-7]。

2.3.2实验技术人员在实验室生物安全中的职责由于医学微生物学教学实验内容可能涉及第三类、第四类病原微生物，教学准备室一般定位为生物安全二级实验室，应在当地卫生监督所备案，并按生物安全二级实验室要求进行管理。实验技术人员应要求教师和学生不得将与实验无关的物品带进实验室；进实验室穿戴个人防护用品(工作服、手套、帽子，必要时戴口罩)，不可穿露脚趾鞋、背心或短裤/短裙；每个实验室必须配备基本医药箱及多种消毒剂，便于实验过程中突发状况的应急处理；裸露在外的伤口，必须包扎好，方可进入实验室；实验过程中必须严格遵守实验操作规范，碰到疑问及时请教，不得盲目操作；实验中产生的各种污染废弃物需按规定放置于不同容器，以便高压蒸汽灭菌后送医疗废弃物回收站；学生实验结束后，离开实验室前须先用消毒液浸泡手，再洗手，方可离开，严禁穿着防护服或戴手套进入清洁的公共场所[8-9]。

总之，医学微生物学是临床医学及相关学科的根基和桥梁，实验教学是其重要组成部分。实验准备工作是实验教学的基石，实验技术人员是教学团队的重要成员，关系到医学微生物学实验教学质量及整体教学任务的完成和改革。只有充分做好医学微生物学实验教学准备工作，并要求实验技术人员不断提高专业知识水平和操作技能，才能在教学改革中发挥特长，提高教学水平，保证教学质量。

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[3] 顾福萍.提高医学微生物学实验准备工作质量的探讨 [J].实用医技杂志，2006，13(9)：1584-1585.

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[5] 黄燕.完善医学微生物学实验准备的体会 [J].广西中医学院学报，2007，10(3)：151-152.

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[8] 邵长玲，孔军伶，沈瑞莲，梅秋芳.病原微生物实验室生物安全隐患及防范措施 [J].现代医药卫生，2010，26(23)：3655-3656.

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s. QU Di, E-mail: dqu@shmu.edu.cn；YUAN Zhenghong, E-mail: zhyuan@shmu.edu.cn

Criticalimpactsofexperimentpreparationandactivecontributionsbytechniciansinmedicalmicrobiologicalexperimentalcourse

LI Xueping, PAN Tingting, QIAN Lisheng, YUAN Zhenghong, QU Di

DepartmentofMedicalMicrobiologyandParasitology,KeyLaboratoryofMedicalMolecularVirologyofMinistriesofEducationandHealth,SchoolofBasicMedicalSciences,FudanUniversity,Shanghai200032,China

Experimental course is an essential and indispensable part of modern medical microbiology teaching. Unfortunately, in the reform of experiment teaching of medical microbiology, we often overlook the importance of the preparation of experimental course in fulfilling high-quality teaching. In this paper, we reviewed the status of medical microbiological experimental course in three stages: before 2000, 2000-2010 and 2011-present. Then we analyzed and discussed on the considerations in the preparation of experimental courses as well as the requirements of experimental conditions, and suggested that highly competent technicians play an important role in experiment teaching of medical microbiology.

Medical microbiology; Medical microbiological experimental course; Preparation of experiment; Laboratory biosafety; Laboratory technician

国家自然科学基金(81571955)，上海市精品课程项目和上海市重点课程建设项目(SHFDEN020131001006)

瞿涤，袁正宏

2017-08-10)

评选优秀论文通知

为更快、更好地传播微生物学与感染病学领域的研究发展和成果，提高本刊刊登的论文质量，提升作者论文的撰写水平，《微生物与感染》编委会决定每年举行优秀论文年度评选活动。从本刊当年刊登的文章中选取优秀论文予以表彰，设一等奖(奖金3 000元)、二等奖(奖金1 000元)，所有奖金由复旦大学上海医学院“一健康基金”提供。获奖者除获得奖金之外，还将获取相应的荣誉证书和本刊次年全年杂志。望广大作者积极投稿。

《微生物与感染》编委会