中药水煎剂与β-内酰胺类抗菌药物联合使用对常见致病菌的抗菌作用研究

胡洁玲 张天灵 吴帆 郑晓鑫 缪建春

中药水煎剂与β-内酰胺类抗菌药物联合使用对常见致病菌的抗菌作用研究

胡洁玲 张天灵 吴帆 郑晓鑫 缪建春

目的观察中药水煎剂与β-内酰胺类抗菌药物联合使用对常见致病菌的抗菌作用.方法30株首次临床分离株, 其中金黄色葡萄球菌 (Sa)、肺炎链球菌(Sp)、大肠埃希菌(E. coli)、铜绿假单胞菌(Pa)、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)分离株各6株, 使用纸片扩散法分别对使用含苯唑西林、头孢唑啉、头孢呋辛或头孢他啶等β-内酰胺类抗菌药物的纸片, 以及使用中药水煎剂(连翘、金银花、黄芩、鱼腥草)分别合用苯唑西林、头孢唑啉、头孢呋辛和头孢他啶等β-内酰胺类抗菌药物的纸片测量抑菌环直径.结果单用苯唑西林、头孢唑啉、头孢呋辛或头孢他啶等β-内酰胺类抗菌药物的抑菌环平均直径分别为23.8、24.2、25.4、27.8 mm, 中药水煎剂分别合用苯唑西林、头孢唑啉、头孢呋辛和头孢他啶等β-内酰胺类抗菌药物的抑菌环平均直径分别为42.4、42.0、45.8、52.2 mm, 分别增加18.6 、17.8 、20.4、24.4 mm.结论中药水煎剂与β-内酰胺类抗菌药物联合使用可增强对金黄色葡萄球菌、肺炎链球菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌等常见致病菌的抗菌作用.

中药水煎剂;β-内酰胺类抗菌药物;常见致病菌;抗菌作用

中药在临床应用中常相互配伍使用.本实验选用连翘、金银花、黄芩、鱼腥草共四种中药, 均为临床常用的清热解毒类药物, 药理上均具有较强的抗菌、抗病原微生物、增强巨噬细胞吞噬能力等作用.β-内酰胺类抗菌药物为临床广泛使用的抗感染药物, 在治疗感染性疾病中具有起效快、针对性强等特点.本实验选用具有代表性意义的β-内酰胺类抗菌药物, 分别为青霉素类:苯唑西林;第一代头孢菌素:头孢唑啉;第二代头孢菌素:头孢呋辛;第三代头孢菌素:头孢他啶.根据中西药的特点, 联合使用时能加强抗菌作用和增强耐药性[1].本文探讨连翘、金银花、黄芩、鱼腥草四种中药混合的水煎剂分别与苯唑西林、头孢唑啉、头孢呋辛和头孢他啶联合使用的体外抗菌作用, 为临床中西药结合治疗感染性疾病, 有效缓解日趋严重的细菌耐药问题, 为合理用药提供依据.现报告如下.

1 材料与方法

1.1 实验菌株 由本院2016年12月～2017年3月患者首次临床分离的临床分离株30株.金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus, Sa)、肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae, Sp)、大肠埃希菌(Escherichia coli, E. coli)、铜绿假单胞菌(Pseudomonas aerugi-nosa, Pa)、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(Methicillinresistant Staphylococcus aureus, MRSA)分离株各6株, 分别来自痰、血、尿及分泌物标本.排除同一患者同一部位的重复菌株.

1.2 培养基 Mueller-Hinton琼脂原料、含5%脱纤维羊血的Mueller-Hinton琼脂原料.

1.3 实验器材 电热恒温营养箱、高压蒸汽灭菌器、电子显微镜、电冰箱、玻璃器皿、微量加样枪、游标卡尺、酒精灯、接种环.

1.4 纸片 抗菌药物纸片采用英国的OXOID药敏纸片.中药水煎剂纸片(自制):将连翘、金银花、黄芩、鱼腥草各5 g(均购自国药控股深圳药材有限公司), 分别略粉碎后混合,加水150 ml常温浸泡30 min, 大火加热至沸腾转为小火保持微沸30 min, 每隔10 min搅拌1次, 然后将药液过滤收集.药渣继续加水100 ml, 同法再煎20 min过滤收集煎液, 两次煎液混合浓缩至20 ml, 药物浓度相当于1 g/ml, 装于试管中至高压蒸汽灭菌15 min, 取出后置4℃冰箱存放备用[2].

1.5 菌株培养 取金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌等菌株少许接种于Mueller-Hinton琼脂培养基中, 36℃培养24 h;取肺炎链球菌菌株少许接种于含5%脱纤维羊血的Mueller-Hinton琼脂培养基中, 36℃培养24 h.

1. 6 方法 选用纸片扩散法测定琼脂平板中苯唑西林、头孢唑啉、头孢呋辛、头孢他啶等β-内酰胺类抗菌药物单独或与中药水煎剂联用的情况下, 各药敏纸片对各受试菌的抑菌变化.

2 结果

单用苯唑西林、头孢唑啉、头孢呋辛或头孢他啶等β-内酰胺类抗菌药物的抑菌环平均直径分别为23.8、24.2、25.4、27.8 mm, 中药水煎剂(连翘、金银花、黄芩、鱼腥草)分别合用苯唑西林、头孢唑啉、头孢呋辛和头孢他啶等β-内酰胺类抗菌药物的抑菌环平均直径分别为42.4、42.0、45.8、52.2 mm, 分别增加 18.6 、17.8 、20.4、24.4 mm.见表 1.

表1 β-内酰胺类抗菌药物单用或与中药水煎剂联用抑菌环直径(mm)

3 讨论

金黄色葡萄球菌是革兰阳性球菌, 易引起皮肤和各种器官的化脓性感染, 当机体免疫力降低时也可引起败血症和脓毒血症.肺炎链球菌在自然界中分布广泛, 可引起细菌性肺炎、脑膜炎、支气管炎等疾病.大肠埃希菌在自然界广泛存在,是机会致病菌, 常引起泌尿系统感染、腹膜炎及腹泻等, 当机体免疫功能受损或抵抗力下降时易引起败血症, 易对抗菌药物产生耐药.铜绿假单胞菌为临床上常见的条件致病菌之一, 细菌侵袭力弱但抗药性强, 可引起皮肤和皮下组织感染、中耳炎、呼吸系统及泌尿系统感染、败血症等.耐甲氧西林金黄色葡萄球菌是对异恶唑青霉素耐药的金黄色葡萄球菌,是引起医院相关性和社区相关性感染的主要病原体之一, 可引起皮肤及软组织化脓性感染、骨髓炎、肺炎、泌尿及中枢神经系统感染、菌血症和心内膜炎等, 以产生β-内酰胺酶,分解药物而对抗菌药物产生高度耐药.抗菌药物在细菌性感染疾病的治疗中发挥着巨大作用, 使细菌感染性疾病得到有效控制.青霉素对革兰阳性菌敏感, 对革兰阴性菌杀菌作用较弱.头孢他啶等第三代头孢类抗菌药物对革兰阳性菌的抗菌作用不如头孢唑啉和头孢呋辛等第一、二代头孢类抗菌药物, 但对革兰阳性菌作用增强, 对铜绿假单胞菌有效.二代头孢类对革兰阳性菌抗菌效果较一代差, 对革兰阴性菌作用优于一代, 一、二代头孢类抗菌药物对铜绿假单胞菌均不明感.由于长期大量和不合理使用抗菌药物, 也导致细菌耐药、菌群失调、耐药菌增多、继发感染、病程延长、治疗无效等一系列严重问题, 常见致病菌威胁人类的健康已成为全球医疗卫生界面临的难题.

传统中药作为中华民族宝贵的文化遗产, 在治疗感染性疾病中, 其药理作用具有抗菌谱广、毒副作用小等优势, 越来越多的在预防和控制细菌性感染疾病方面产生广泛而积极的影响[3], 中药制剂联合抗菌药物进行常见致病菌感染治疗的研究逐渐受到重视.多数中药具有显著而广谱的抗菌活性, 比如本实验所选的中药连翘、金银花、黄芩、鱼腥草等,均具有较强的抗菌、抗病原微生物、增强巨噬细胞的吞噬能力, 对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、肺炎链球菌等多种菌有抑制作用[4].其中药功能和药理作用分别为:连翘苦寒, 清热解毒、消肿散结、疏散风热, 具有抗病原生物(如金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌、痢疾杆菌、伤寒杆菌等)、抗炎、解热、影响免疫功能、保肝作用等;金银花甘寒质轻, 清热解毒、疏散风热, 具有抗炎解热、抗菌、抗病毒、抗过敏、促进免疫功能、促进白细胞吞噬、双向调节免疫、降低胆固醇、抗肿瘤等作用, 连翘和金银花配伍后对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌等呼吸系统、泌尿系统、皮肤脓液中的常见致病菌均有不同程度的抑菌和杀菌作用[5];黄芩苦寒, 清热燥湿、泻火解毒, 有抗炎解热、抗菌、抗病毒、抗过敏、抗氧化及抗肿瘤、促进细胞免疫、增强机体非特异性免疫功能等作用.研究证明, 黄芩及其主要组份不仅对大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌等有较强的抑菌作用, 且与β-内酰胺类抗菌药物可发挥协同效应, 显著降低抗菌药物的 最低抑菌浓度(MIC), 增加细菌对抗菌药物的敏感性[6];鱼腥草辛寒质轻,清热解毒、消痈排脓、利尿通淋, 具有抗菌、抗病毒、抗炎、利尿、促进免疫功能及镇静作用, 鱼腥草素对金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌有明显的抑制作用, 对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌有直接杀灭作用, 在治疗呼吸系统、消化系统、外科、五官科、妇科等感染性疾病方面临床疗效肯定, 具有明显的抗病毒与抗菌作用[7].另外, 金银花、黄芩、鱼腥草均具有抗过敏作用, 可拮抗抗菌药物的过敏反应;金银花、连翘、黄芩均具有保肝作用, 可很好地对抗抗菌药物常见的肝损害.在本研究中, 与单用β-内酰胺类抗菌药物相比, 连翘、金银花、黄芩、鱼腥草配伍的中药水煎剂与β-内酰胺类抗菌药物联合使用, 抑菌环的直径明显增加, 表明中西药合用,通过不同的作用途径, 抗菌活性更强, 药物动力学更好, 细菌耐药性更好, 明显优于单独使用西药或中药.

连翘、金银花、黄芩、鱼腥草等传统抗菌中药通过清热、燥湿、解毒、疏散风热等作用达到调节人体自身免疫功能,增强机体防御和抗感染能力, 与β-内酰胺类抗菌药物联用可逆转细菌耐药性[8].因此, 探讨中药的抑菌作用, 中西药结合, 相互取长补短, 指导临床合理使用中药协同抗菌药物治疗常见致病菌感染, 对有效的缓解细菌耐药日趋严峻的问题, 达到合理用药的目的有着积极的意义.

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10.14164/j.cnki.cn11-5581/r.2017.22.107

2016年度深圳市龙岗区医疗卫生项目立项课题(项目编号:2016060316592349)

518000 深圳市龙岗区第六人民医院药剂科(胡洁玲张天灵 缪建春);深圳市龙岗中心医院药剂科(吴帆);深圳市龙岗区第六人民医院检验科(郑晓鑫)

2017-10-12]