非小细胞肺癌患者肺癌自身抗体检测的临床意义

时广利 张鑫桐 尹颜军 白万秋 孙勇

非小细胞肺癌患者肺癌自身抗体检测的临床意义

时广利 张鑫桐 尹颜军 白万秋 孙勇

目的探讨血清7种肺癌自身抗体在非小细胞肺癌(NSCLC)患者中的水平及其临床意义。方法采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测健康人、肺部良性疾病患者和NSCLC患者血清中7种肺癌自身抗体(p53、PGP、SOX2、GAGE7、GBU4-5、MAGEA1、CAGE)的表达量，并计算它们诊断肺癌的敏感性和特异性。结果NSCLC患者血清中7种肺癌自身抗体的表达水平显著高于健康人对照组和肺部良性疾病组，差异有统计学意义(Plt;0.05)；肺癌自身抗体p53、PGP、GBU4-5和CAGE在Ⅲ期+Ⅳ期NSCLC中的表达水平显著高于Ⅰ期+Ⅱ期(Plt;0.05)；血清7种肺癌自身抗体对NSCLC检测的敏感性为54.5%、特异性为94.3%；7种肺癌自身抗体对I期、II期NSCLC检测的敏感性为34.6%。结论血清肺癌自身抗体的检测对于NSCLC的辅助诊断和早期诊断有一定的价值。

非小细胞肺癌；肺癌自身抗体；辅助诊断

肺癌是全球范围内最常见的恶性肿瘤之一，严重威胁着人类的健康，其发病率和死亡率均排在第一位。肺癌患者中非小细胞肺癌(NSCLC)大约占80%左右，NSCLC的5年存活率不到20%，而及时发现并治疗的ⅠA期NSCLC患者，其5年生存率可达80%左右[1]。由其可见，及时发现和治疗早期肺癌能够大大提高NSCLC患者的生存率。人体的免疫系统能够对正在生长的肿瘤产生免疫反应，对肿瘤的免疫应答包括体液免疫应答和细胞免疫应答，并产生大量的自身抗体，使得在肿瘤早期就能检测到高表达的自身抗体。本文重点研究血清7种肺癌自身抗体在NSCLC患者中的临床意义，评价其对NSCLC辅助诊断和早期诊断方面的临床应用价值。

资料与方法

一、研究对象

初治NSCLC患者130例，选自2016年2月至2016年11月首都医科大学附属北京胸科医院初治住院患者，男性78例、女性52例。所有患者以往没有接受过放疗或者化疗，并且全部经过组织学或细胞学方法确诊。肺部良性疾病组56例，为北京胸科医院收治确诊的肺炎或肺结核患者，其中男性26例、女性30例。健康对照组50名，为首都医科大学附属北京胸科医院体检健康职工，其中男性24名、女性26名，身体各项检测指标正常、无急性和慢性等疾病。

二、研究方法

采集NSCLC患者、肺部良性疾病患者和健康人空腹静脉血4mL，所有标本分离出血清，-20℃冻存，集中进行检测。全部标本均采用酶联免疫吸附法(ELISA)进行7种肺癌自身抗体的检测，包括肿瘤蛋白p53(p53)、神经元胞质蛋白基因产物(PGP)、干细胞转录因子(SOX2)、G抗原7(GAGE7)、肿瘤抗原(GBU4-5)、肿瘤-睾丸抗原(MAGEA1)、CAGE。检测试剂盒由杭州凯保罗生物技术有限公司生产，应用Thermo Multiskan酶标仪进行测定。

三、统计学方法

统计学分析应用SPSS17.0软件进行,计量资料以均数±标准差表示，并进行数据正态性分布检验，计量资料呈正态分布采用t检验，率的比较采用χ2检验，Plt;0.05时为差异具有统计学意义。

结 果

一、NSCLC患者和对照组血清中肺癌自身抗体的表达量

NSCLC患者血清中7种肺癌自身抗体(p53、PGP、SOX2、GAGE7、GBU4-5、MAGEA1、CAGE)的表达量均显著高于肺部良性疾病组和健康人组，差异有统计学意义，Plt;0.05。(见表1)。

表1 血清肺癌自身抗体在NSCLC和对照组中的表达量(均数±标准差)

二、NSCLC患者血清中肺癌自身抗体的表达量

7种血清肺癌自身抗体在肺鳞癌和肺腺癌中的表达量无显著性差异(Pgt; 0.05)；血清肺癌自身抗体p53、PGP、GBU4-5和CAGE在Ⅲ期+Ⅳ期NSCLC中的表达水平显著高于Ⅰ期+Ⅱ期，差异有统计学意义，Plt;0.05。(见表2)。

表2 血清肺癌自身抗体在NSCLC中的表达量(均数±标准差)

注：Ⅲ期+Ⅳ期与Ⅰ期+Ⅱ期比较，a,b,c,dPlt;0.05

三、血清肺癌自身抗体对NSCLC诊断的敏感性、特异性

7种血清肺癌自身抗体对NSCLC检测的敏感性为54.5%，特异性为94.3%；7种血清肺癌自身抗体对Ⅲ期+Ⅳ期NSCLC检测的敏感性明显高于Ⅰ期+Ⅱ期，差异有统计学意义(Plt;0.01)；7种血清肺癌自身抗体对鳞癌和腺癌检测的敏感性无统计学差异，Pgt;0.05。(见表3)。

表3 血清肺癌自身抗体对NSCLC检测的敏感性(%)

注：腺癌与鳞癌比较，aPgt;0.05；Ⅲ期+Ⅳ期与Ⅰ期+Ⅱ期比较，bPlt;0.01

讨 论

目前，肺癌最常用的诊断方法主要有痰脱落细胞检查、支气管镜以及胸部X线等影像学检查。但是，支气管镜的检查方式为侵入性，对患者有较大的创伤性，并且每次未必能够刷检到癌细胞。痰脱落细胞和胸部X线检查对于肺癌辅助诊断的敏感性较低，不是理想的诊断方法。尽管目前有学者建议肺癌的常规筛查可以用低剂量螺旋CT的方法，但是低剂量螺旋CT用于肺癌的筛查无标准化的方案，其临床应用价值仍处于探讨阶段[2-3]。血液肿瘤标志物在肿瘤筛查中有着重要的临床价值，并且具有取材方便、创伤性小、价格相对低廉、容易复检等优点。但是，目前临床上常用肿瘤标志物(CEA、NSE、Cyfra21-1等)的敏感性较低，尤其是在检测早期肺癌(Ⅰ期+Ⅱ期)中的敏感性只有15%左右，这些肿瘤标志物在NSCLC的辅助诊断中有较大的局限性[4]。因此，目前临床非常需要特异性和敏感性都比较理想的肺癌肿瘤标志物，尤其是检测早期肺癌的肿瘤标志物。

在肿瘤发病早期，机体的免疫系统可识别肿瘤细胞内表达异常的蛋白，即肿瘤相关抗原(TAAs)。TAAs的过表达、突变、错误折叠、异常退化等改变可导致癌症患者产生自身反应性免疫应答，并产生针对这些抗原的自身抗体，少量TAAs刺激即可引起B细胞产生大量的自身抗体[5]。因此，检测TAAs的自身抗体可作为肺癌早期诊断的分子标记物。p53基因调控肿瘤的发生、生长及凋亡过程，多种癌症存在p53基因的突变和过表达，并能在血清中检测到p53蛋白的自身抗体[6]。焉春花[7]等的研究发现，NSCLC中PGP的表达与其神经内分泌分化关系密切。有研究[8]表明，利用免疫组化法检测转录因子SOX2在肺鳞癌组织中的表达率可达到69%，在腺癌组织中的表达率为4.5%，在SCLC中的表达可达70%。GBU4-5作为肺癌早期筛查的标志物之一，和CAGE与其他不同的肺癌标准物联合可明显提高肺癌的诊断效率[9]。幸雯[10]等的研究表明，肿瘤-睾丸抗原(NY-ESO-1)、肿瘤蛋白P53(P53)、细胞周期素依赖性蛋白激酶2(CDK2)、膜联蛋白A2(annexinA2)、胰岛素样生长因子mRNA结合蛋白1(IMPl)、泛素l(ubiquilinl)以及磷酸甘油酸变位酶(PGAMl)共7种自身抗体在NSCLC中检测的敏感性为68.7%，特异性为91.1%。

本研究用ELISA法检测健康人、肺部良性疾病患者和NSCLC患者血清中7种肺癌自身抗体(p53、PGP、SOX2、GAGE7、GBU4-5、MAGEA1、CAGE)的表达量，研究结果显示：NSCLC患者血清中7种肺癌自身抗体的表达水平显著高于健康人对照组和肺部良性疾病组，差异有统计学意义(Plt;0.05)；肺癌自身抗体p53、PGP、GBU4-5和CAGE在Ⅲ期+Ⅳ期NSCLC中的表达水平显著高于Ⅰ期+Ⅱ期(Plt;0.05)；血清7种肺癌自身抗体对NSCLC检测的敏感性为54.5%、特异性为94.3%；7种肺癌自身抗体对I期、II期NSCLC检测的敏感性为34.6%。结果表明，NSCLC患者血清7种肺癌自身抗体的检测对于NSCLC的辅助诊断和早期诊断有一定的临床应用价值。今后研究将进一步增加样本量及样本类型，探讨肺癌自身抗体在肺癌疗效监测和预后判断方面的临床应用价值。

[1] 刘慧，李永怀，桂淑玉．肺癌患者血清肿瘤标记物检测的临床意义及预后评估[J]．临床肺科杂志，2014，19(12)：2219-2223.

[2] 冯继宁，贾文雍，屠亚芬.低剂量螺旋CT在健康体检人群中的肺癌筛查分析[J]．中国医学创新，2016，13(33)：62-64．

[3] 唐威，吴宁，黄遥，等.4690例无症状健康体检者低剂量CT早期肺癌筛查研究[J].中华肿瘤杂志，2014，36(7)：549-554.

[4] Shi GL,Wu ED,Sun Y,et al.Reduction of serum cytokeratin-3A9 is Associated with chemotherapeutic response in patients with non-Small cell lung cancer[J].Clin Lab,2015,61(5-6):497-504.

[5] 祁松楠，钱忠萍,顾国浩,等．肺癌血清自身抗体及其应用的研究进展[J]．国际检验医学杂志，2014，35(18)：2506-2509．

[6] 王巍，林耀东，陈泽程，等．定量检测血清p53抗体预测晚期非小细胞肺癌预后[J]．实用肿瘤杂志，2011，26(1)：46-49.

[7] 焉春花，王秋实，王宏伟,等．非小细胞肺癌中PGP9．5的表达与其神经内分泌分化关系的研究[J]．哈尔滨医科大学学报，2011,45(4)：342-345.

[8] 李景贺，王丽萍，金立方,等．转录因子Sox2在人肺癌中的表达及其临床意义[J]．中国实验诊断学，2013，17(8)：1437-1439.

[9] Chapman CJ,Healey GF,Murray A,et al.EarlyCDT®-Lung test: improved clinical utility through additional autoantibody assays [J].Tumor Biol,2012,33(5):1319-1326.

[10] 幸雯，张涛，夏良裕,等．多种肿瘤相关自身抗体在非小细胞肺癌中的联合诊断价值[J]．基础医学与临床，2016，36(5)：656-660.

Detectionofauto-antibodiesoflungcancerinnon-smallcelllungcancerpatients

SHIGuang-li,ZHANGXin-tong,YINYan-jun,BAIWan-qiu,SUNYong
DepartmentofMedicalLaboratory,BeijingChestHospital,CapitalMedicalUniversity,Beijing101149,China

ObjectiveTo evaluate the clinical significance for diagnosis of detection of 7 types serum autoantibodies in non-small cell lung cancer patients (NSCLC).MethodsEnzyme linked immunosorbent assay (ELISA) method was used to examine the serum 7 types autoantibodies(p53, PGP, SOX2, GAGE7, GBU4-5, MAGEA1, CAGE)levels in NSCLC patients, healthy controls and patients with respiratory infection of the lung. The sensitivity and specificity of diagnosis for NSCLC were calculated.ResultsThe level of 7 types auto-antibodies in patients with NSCLC was significantly higher than that of patients with respiratory infection of the lung and healthy controls (Plt;0.05). The level of auto-antibodies (p53, PGP, GBU4-5 and CAGE) was significantly higher at stage Ⅲ and Ⅳ of NSCLC than that of stage at Ⅰ and Ⅱ (Plt;0.05). The sensitivity and specificity of 7 types auto-antibodies in NSCLC were 54.5% and 94.3%. The sensitivity and specificity of 7 types auto-antibodies in NSCLC of stages I and II was 34.6%.ConclusionThe detection of auto-antibodies in serum has certain clinical significance in aid diagnosis and early diagnosis of NSCLC.

non-small cell lung cancer; auto-antibodies of lung cancer; diagnosis

10.3969/j.issn.1009-6663.2017.12.035

101149 北京，首都医科大学附属北京胸科医院检验科

2017-04-21]