CPAP治疗对OSAHS患者血清8-isoprostane、8-OHdG水平的影响

吴思敏 贺晓洁 杨嫄 李会 孙璐 李永霞

CPAP治疗对OSAHS患者血清8-isoprostane、8-OHdG水平的影响

吴思敏 贺晓洁 杨嫄 李会 孙璐 李永霞

目的观察OSAHS患者一夜CPAP治疗后血清8-isoprostane、8-OHdG的水平变化。方法选择经PSG检查确诊的OSAHS患者10例纳入治疗组(OSAHS组)及非OSASH患者10例纳入正常对照组(非OSAHS组)，(1) 比较OSAHS患者与非OSAHS患者血清8-isoprostane、8-OHdG水平差异；(2)治疗组给予夜间 CPAP干预，对照比较患者予以CPAP治疗的前后血清中8-isoprostane、8-OHdG水平的变化。结果(1) OSAHS组血清8-isoprostane、8-OHdG均高于非OSAHS组(Plt;0.05)；(2)10例OSAHS患者经1晚CPAP治疗后血清8-isoprostane、8-OHdG水平较治疗前无显著变化(Pgt;0.05)。结论在OSAHS患者体内存在氧化应激反应，短期的CPAP治疗对此反应无改善作用，需进行长期CPAP治疗。

OSAHS；持续气道正压通气；氧化应激

阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(obstructive sleep apnea/hyperpnea syndrome，OSAHS)以在患者睡眠过程当中反复发生上气道完全或不完全的阻塞而导致频繁地呼吸暂停、通气量降低、氧饱和度降低以及睡眠的结构紊乱为此疾病的特征性表现。它是一种临床中常见的睡眠呼吸紊乱疾病，其反复的缺氧-复氧过程，被认为是OSAHS的特征性病理生理变化。这个过程在夜间反复发生，产生过多的氧自由基，导致机体产生大量活性氧，引起细胞与组织的损伤，由此导致了呼吸道局部和全身的炎症和氧化应激反应。目前CPAP治疗被公认为一线的治疗方案，长期治疗对OSAHS患者炎症与氧化应激反应的疗效明确，但短期治疗效果目前研究结果较少，本研究探讨OSAHS患者经1晚CPAP治疗后氧化应激标记物8-isoprostane、8-OHdG水平的变化，以明确短程治疗的效果。

资料与方法

一、对象

随机选取2015年03月至2016年12月昆明医科大学第二附属医院门诊及呼吸内科二病区住院病人，并经整夜7h多导睡眠监测 (polysomnography，PSG) 检查确诊OSAHS患者10例，非OSAHS患者10例。分别给予治疗组患者1晚CPAP治疗，次日清晨复查血清中8-isoprostane、8-OHdG标记物浓度水平。治疗组与对照组间纳入的研究对象平均年龄、性别无明显差异(Pgt;0.05)。所有的研究对象均排除了两周之内的感染、慢性呼吸系统疾病(包括慢性阻塞性肺疾病、哮喘)、严重心脏疾病(如心肌梗塞、不稳定型心绞痛、瓣膜性心脏病、各类心肌病、严重心律失常)、脑血管疾病、糖尿病、恶性肿瘤、周围血管疾病、凝血障碍、严重肝、肾功不全、风湿免疫病，近三月内无创伤以及手术史，近一月内没有使用抗生素、阿司匹林和COX-I等影响血清中8-isoPG、8-OHdG水平的药物。

二、OSAHS诊断

临床有典型的睡眠过程中打鼾、呼吸暂停、憋醒以及白天嗜睡症状，经多导睡眠仪监测提示每夜7小时睡眠过程中呼吸暂停低通气指数(apnea hypopnea index,AHI)大于等于5次每小时。研究中患者诊断的标准依据中华医学会呼吸病学分会拟定的《阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征诊治指南(基层版)》[1]。

三、呼吸机治疗

10名OSAHS组患者经PSG确诊后均使用美国飞利浦REMstar Auto A-Flex呼吸机治疗。

四、血清中8-isoprostane、8-OHdG水平测定

每位实验参与者抽取肘静脉血5mL，其中10名治疗组OSAHS患者在CPAP治疗1晚后清晨再次在空腹状态下进行抽血，于肘静脉处抽取静脉血5mL。将抽取的标本于离心机以转速3000转/分钟离心5分钟 ，取部分上层血清存放在EP管，存放于-80℃冰箱保存，待进行统一测定。试剂选用南京金益柏生物科技有限公司提供的8-iso-PG及8-OhdG Elisa试剂盒对血清进行酶联免疫吸附法，测定血清8-OHdG、8-iso-PG标记物水平。

五、统计学方法

所有数据均采用SPSS 17.0版本统计软件进行分析。治疗组与正常对照组间血清浓度比较采用独立样本T检验，治疗组治疗前、后血清浓度的比较采用配对T检验。所有的计量资料以均数±标准差表示，P值小于0.05时视为差异有统计学意义。

结 果

一、OSAHS组和非OSAHS组各指标比较

OSAHS组患者血清8-isoPG、8-OHdG水平高于非OSAHS组(其中Plt;0.05),(见表1)。

二、OSAHS治疗前后各指标比较

经呼吸机治疗后次日OSAHS组患者血8-isoPG、8-OHdG较治疗前血清中浓度水平值没有显著差异(其中Pgt;0.05)。(见表2)。

表1 OSAHS组与非OSAHS组血清8-iso-PG及8-OHdG浓度比较

表2 OSAHS组持续正压通气治疗1晚前后血清8-iso-PG及8-OHdG浓度比较

讨 论

OSAHS患者因其体内存在夜间反复的缺氧-复氧特征性过程，这种间歇性低氧类似于缺血再灌注损伤，这个过程能够使患者机体内产生大量活性氧，导致氧化/抗氧化系统的失衡，致使机体中发生氧化应激反应。活性氧可以导致脱氧核糖核酸的损伤，比如DNA链断裂，碱基修饰以及DNA与蛋白质交联，ROS在碱基修饰后产生了8-OHdG，这种修饰后的DNA碱基被认为是一种非常稳定可靠的组织及尿液中氧化应激标记物[2]。8-异前列腺素为脂质过氧化作用的产物，被认为是反映机体氧化应激反应的最佳标记物之一。本研究中选取8-异前列腺素(8-isoprostane)及8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)这两种标记物作为氧化应激反应标记物，比较10例OSAHS患者与非OSAHS患者上述标记物的血清浓度水平，并对10例OSAHS患者进行1晚的CPAP治疗，对比治疗前后上述氧化应激标志物(8-iso-PG以及8-OHdG)血清浓度的变化。本研究显示，OSAHS组较非OSAHS组血清8-异前列腺素及8-羟基脱氧鸟苷浓度水平明显升高(Plt;0.05)。高爱武等人研究发现，OSAHS病人血清中8-OHdG的水平明显高于对照组，且OSAHS患者血清8-OHdG浓度与夜间最低血氧饱和度(SaO2)及平均最低SaO2呈负相关，与其AHI、血氧饱和度小于90%的时长占总睡眠时长的百分比、睡眠中呼吸障碍事件发生的总时长占总时长的百分值呈正相关[3]。Yamauchi在一项128名OSAHS患者研究中发现，严重的OSAHS患者(58例)尿液中8-OHdG较非严重OSAHS患者(70例)也有明显的升高[4]。钱进等人发现，OSAHS病人睡眠前及睡眠后血清8-iso-PG浓度水平较正常组均显著增高[5]。本研究结果与以往研究相似，OSAHS组患者较非OSAHS患者血清8-异前列腺素及8-OHdG明显增高，表明OSAHS患者因夜间间断缺氧-复氧过程，使体内氧自由基增多，而机体对其清除能力下降，存在氧化应激反应。

同时经过1晚的CPAP治疗之后，OSAHS患者血清8-异前列腺素及8-OHdG两者浓度无显著性降低(Plt;0.05)，治疗后患者血清8-异前列腺素(679.67±382.59ng/mL)较治疗前(710.77±551.08ng/mL)均值有所下降,治疗后患者血清8-羟基脱氧鸟苷浓度(216.95±116.19ng/mL)较治疗前(237.70±171.45 ng/mL)均值也有所下降。Ben MD发现6个月CPAP治疗后患者尿液中8-isoPG以及血清NOX2有着明显下降，认为OSAHS能够使患者体内氧化应激水平提高，CPAP治疗后能够反转此种情况[6]。Karamanl H同样发现3个月CPAP治疗之后患者血清中8-iso-PG水平较治疗前有所下降[7]。李永霞等人研究报道，在OSAHS患者血清以及呼出气冷凝液，8异前列腺素浓度与其疾病病情严重程度密切相关，，有效治疗后能明显降低这些标记物水平，进一步地证明了在OSAHS患者中存在呼吸道局部和全身的炎症以及氧化应激反应[8]。在本研究中，CPAP治疗后患者血清中8-异前列腺素及8-OHdG浓度变化虽无统计学意义，但其以上标记物血清浓度较治疗前有所下降。同时，考虑到其理论依据可能与患者在短暂的CPAP治疗后，一方面短暂的CPAP治疗后，对患者的缺氧-复氧过程有一定的改善，而另一方面，患者的气道高反应性增加，反复缺氧-复氧以及对CPAP治疗适应过程又会加重其氧化应激水平。

本研究因CPAP治疗时长较短，入组人数较少，且未进行OSAHS患者严重程度分级以分析OSAHS严重程度与OSAHS患者上述指标血清浓度的相关性分析，以及没有将OSAHS病人血清中8-异前列腺素、8-羟基脱氧鸟苷浓度水平与其疾病严重程度指标(AHI、ESS评分、最长窒息时长、最低SaO2以及平均最低SaO2等)进行相关性分析。出现这样的结果，可能与我们的研究CPAP治疗时间短、样本量较少、患者治疗依从性差别、研究异质性等有关。今后研究可以扩大样本量，进行不同时相CPAP治疗后相关标记物的检测，以便明确CPAP治疗的有效时间长度。

[1] 阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征诊治指南(基层版)写作组.阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征诊治指南(基层版)[S].中华全科医师杂志,2015,14(7):509-515.

[2] Cooke MS,Evans MD,Dizdaroglu M,et al.Oxidative DNA damage: mechanisms, mutation, and disease[J].FASEB J,2003,17(10):1195-1214.

[3] 高爱武，平芬，韩书芝，等.阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征患者血清8-OHdG水平的变化[J].河北医药，2009,31(7):826-827.

[4] Yamauchi M,Nakano H,Maekawa J,et al.Oxidative Stress in Obstructive Sleep Apnea[J].Chest,2005,127(5):1674-1679.

[5] 钱进,马晓蓉,潘磊,等.持续气道正压通气治疗对阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征患者8-异前列腺素和超敏C反应蛋白的影响[J].中华内科杂志,2015,54(7):633-637.

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[7] Karamanl H,Özol D,Ugur KS,et al.Influence of CPAP treatment on airway and systemic inflammation in OSAS patients[J].Sleep Breath,2014,18(2):251-256.

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EffectofCPAPtherapyonserumlevelof8-isoprostaneand8-OHdGinpatientswithOSAHS

WUSi-min,HEXiao-jie,YANGYuan,LIHui,SUNLu,LIYong-xia
RespiratoryDepartment,theSecondAffiliatedHospitalofKunmingMedicalUniversity,Kunming,Yunnan650101,China

ObjectiveTo observe the changes of serum 8-isoprostane and serum 8-OHdG levels in patients with OSAHS, and to compare the effect of CPAP intervention on the above indexes after the treatment of OSAHS.Methods10 non-OSASH patients were taken as the control group and 10 patients with OSAHS diagnosed by PSG as the experimental group. ① The difference of serum 8-isoprostane and 8-OHdG levels was compared between the control group and the experimental group. ② The experimental group was treated with 1 night CPAP, and the difference of serum 8-isoprostane and 8-OHdG levels prior treatment and post-treatment was compared.Results① The serum 8-isoprostane and 8-OHdG in the experimental group were higher than those in the control group (Plt;0.05). ② After 1 night treatment, serum 8-isoPG and 8-OHdG of 10 cases of OSAHS patients had no statistical significant difference than before (Pgt;0.05).ConclusionOxidative stress occurs in OSAHS patients, and short-term CPAP of 1 night has no effect on it and it needs long term therapy.

OSAHS; continuous positive airway pressure; oxidative stress

10.3969/j.issn.1009-6663.2017.12.003

昆明医科大学研究生创新基金(No 2016S32)

650101 云南 昆明，昆明医科大学第二附属医院呼吸内科二病区

李永霞 ，E-mail：lyx6349@qq.com

2017-04-20]