海拔、坡向和年限与猪苓产量、质量相关性研究

杨海燕，殷莉丽，曾晖，李敏，夏琴，周进

·品种品质·

海拔、坡向和年限与猪苓产量、质量相关性研究

杨海燕1，殷莉丽1，曾晖1，李敏1，夏琴2，3，周进2，3

目的：探索猪苓适宜生长海拔范围、坡向及最佳采收年限，为四川猪苓基地选址和规模化人工栽培提供科学参考。方法：采用区组方法进行猪苓栽培试验，单因素考察海拔高度、坡向和生长年限对猪苓产、质量的影响。棋盘式取样法取样，烘干称重计算产量，2015版中国药典一部中猪苓项下含量测定方法测定麦角甾醇含量，硫酸-蒽酮法测定猪苓多糖含量。F检验对结果进行分析。结果：不同海拔条件下猪苓增产率在26.00%～59.52%之间，猪苓多糖含量在1.62%～2.30%之间，麦角甾醇含量在0.07%～0.13%之间；不同坡向条件下猪苓增产率在25.22%～64.50%之间，猪苓多糖含量在1.79%～1.88%之间，麦角甾醇含量在0.12%～0.15%之间；2～5.5年生猪苓增产率在18.33%～58.50%之间，猪苓多糖含量在1.30%～2.12%之间，麦角甾醇含量在0.07%～0.15%之间。结论：不同海拔段和不同坡向猪苓产量、质量差异显著。1200 m～1250 m海拔范围内，阴坡坡向更适合栽培猪苓，其中五年生猪苓质量稳定、产量高宜作商品。

猪苓；海拔；坡向；生长年限；麦角甾醇；猪苓多糖

猪苓为多孔菌科真菌Polyporus umbellatus(Pers.)Fries的干燥菌核[1]。现代研究表明，猪苓所含麦角甾醇、猪苓多糖等成分具有抗肿瘤、防治肝炎等作用[2-4]，且临床疗效明显。近年来，因猪苓新作用的研究开发，其市场需求增大，导致野生猪苓被大量采挖，使其资源量骤降，现有野生猪苓已经不能满足市场基本需求。市场价格从2003年40元/Kg左右，持续上涨至今的280元/Kg左右。目前，全国多地实现了猪苓大面积人工栽培，暂时缓解了市场供不应求的现状，但现在人工栽培的猪苓产量、质量均不稳定，且栽培成本高、栽培技术尚待完善，导致猪苓栽培效益较低，王建中等[5]从仿野生猪苓进行了人工栽培技术研究，胡平等[6]对四川地区猪苓栽培技术进行了研究。他们对猪苓的生长环境均有相关描述，但未进行详细分析。

笔者对四川南江猪苓栽培环境及生长年限进行相关研究，以期为生产高产优质、高产量的猪苓提供科学参考。

1 材料

1.1 仪器

UV-1100型TECHCOMP紫外可见分光光度计（上海天美科学仪器有限公司）；Agilent 1200 HPLC 高效液相色谱仪（美国安捷伦公司）；TPY-6A型土壤养分速测仪（浙江托普仪器有限公司）。

1.2 试药与试剂

D(+)-无水葡萄糖对照品(批号：MUST-15041507，纯度：98%，中国科学院成都生物研究所)；麦角甾醇对照品(批号：MUST-15051315，纯度：99.99%，中国科学院成都生物研究所)。色谱甲醇（赛默飞世尔科技有限公司），其余试剂均为分析纯。

种源由四川省中药材有限责任公司提供，经成都中医药大学李敏教授鉴定为多孔菌科真菌猪苓Polyporus umbellatus(Pers.) Fries的菌核。

2 方法与结果

2.1 实验设计

试验地位于四川省巴中市南江县砂坝乡草坝村（东经107°01'30″ ～107°01'59″，北纬32°33'45″～32°34'05″），山地，海拔在800 m ～2000 m之间，主要土质有砂土、砂土含少量腐殖质、砂土富含腐殖质以及砂土混黄壤土。

从2011年起，每年4月进行春播，10月进行秋播[7]。根据种植基地地形地势，均采用环山梯式[8]的方法栽培，每次栽培前对土地进行区域划分、整理。每七根木材为一窖，每窖用种苓0.35Kg[9]。海拔依据地形选取1200～1480 m的范围；土质选取砂土、砂土含少量腐殖质、砂土富含腐殖质和砂土黄壤土的混合土壤等四种土质；坡向选取阳坡、半阴半阳坡（五阴五阳坡）、阴坡（七阴三阳坡）等三个坡向进行栽培。

取样方法，从栽种第三年开始采用棋盘式样方法，每半年进行一次样品采挖（每年4月上旬和10月中旬进行采挖）。采集样品后去除泥沙，称重，在50℃条件下烘干，再称重，计算增产率。

增产率（%）=（G-M）*100%/M

式中：G为每窖样品去除泥沙的重量（Kg），M为每窖的用种量（Kg）。

本次实验考察猪苓产量以增产率计，质量以药典规定的麦角甾醇含量以及猪苓多糖含量进行评定。

2.2 麦角甾醇含量测定

参照《中国药典》（2015年版）猪苓项下含量测定方法进行测定。

2.3 多糖含量测定

参照夏琴等[10]采用的硫酸-蒽醌法测定猪苓多糖含量。

2.4 结果与分析

2.4.1 不同海拔高度的影响 实验表明，不同海拔条件下猪苓的产量差异显著（P=0.05），海拔从1200～1480 m，猪苓的增产率在26.00%～59.52%之间，其中以海拔1250 m产量最高，增产率为59.52%，以此海拔高度为中心两侧海拔猪苓的增产率呈现出下降趋势，到1480m海拔处增产率最低仅有26.00%。如图1所示。

麦角甾醇含量均能达到国家药典规定的不低于0.07%标准，且含量存在显著差异（P=0.01)。在1250 m、1480 m海拔处最低为0.07%，1365 m处最高达0.13%，1250 m～1365 m海拔处含量定在0.11%～0.13%之间波动。多糖含量则在1250 m海拔处最低为1.62%，在1486 m海拔处含量最高为2.30%。在1250 m～1480 m海拔范围，猪苓多糖的含量在1.62%～2.30%之间随着海拔的升高而增加，但经分析其含量不存在显著差异。

图1 不同海拔高度猪苓增产率、麦角甾醇含量及猪苓多糖含量柱形图

2.4.2 坡向研究 如表1所示，在不同坡向猪苓的增产率在25.22%～64.50%之间，其中以阴坡坡向产量最高，增产率为64.50%，以阳坡坡向产量最低，增产率仅有25.22%。

麦角甾醇含量阴坡最高为0.15%，阳坡和半阴半阳坡差距不大分别是0.08%、0.06%。但猪苓多糖阳坡含量最高达1.94%，半阴半阳坡含量最低含1.68%。

表1 不同坡向猪苓增产率、麦角甾醇含量及多糖含量测定

2.4.3不同栽培年限研究 试验表明，2～5.5年生猪苓的增产率在18.33%～58.50%之间，其中以五年半产量最高，增产率为58.50%，四年生产量最低，增产率仅有18.33%。如图2所示。

麦角甾醇含量存在显著差异（P=0.01)，四年生含量最高为0.15%，两年生最低仅有0.07%，2～4年生含量在0.07%～0.15%之间逐年增加，4～5.5年生其含量在0.15%～0.09%之间逐年递减。多糖含量也存在显著差异（P=0.05)，则在四年生最低为1.30%，三年生含量最高为2.12%，此外，2、4.5、5、5.5年生猪苓多糖在1.82%～1.98%范围内，含量较稳定。

3 结论与讨论

试验从海拔、坡向等环境条件以及栽培年限方面进行综合分析。猪苓最佳栽培海拔段是1250m（±30m）左右，且阴坡更适合猪苓生长，五年生猪苓更适合作商品。

整体而言，猪苓在1200m～1250m之间增产率较高，推测跟该海拔段的植被关系较密切，该海拔段大多是落叶阔叶林，落叶使得土壤有机质增多，增加了土壤的肥力，也提高了土壤的保水、保温的能力。同时，该海拔段的其他生物或微生物因素对猪苓的生长可能也有一定的影响。人工栽培时，在可在其他海拔段进行相应的施肥、灌溉、覆盖遮阴或进行保温等处理，仿该段野生环境，争取更好的效益。

本次试验显示猪苓适合阴坡坡向，阴坡相对阳坡而言具有潮湿、阴冷、光照弱等特点，与传统观念上猪苓具喜冷凉、阴郁、湿润，怕干旱的特性相吻合，曾李时珍在《本草纲目》[11]集解中写道“[别录曰]猪苓生衡山山谷”。

现市场猪苓种质来源混杂，质量不稳定，有的地区长时间不更换种苓，直接导致猪苓产量、质量不稳定。因此，摸索好猪苓适宜生长环境，开展猪苓人工育种，实现猪苓农业化发展，进行规范化种植、管理，是解决不同地区产率差异大、质量相差远、药效不稳定等问题的首要任务，也是当前解决当前猪苓质量和产量问题的关键之一。

[1] 国家药典委员会.中华人民共和国药典一部[S]. 北京:中国医药科技出版社，2015：318-319．

[2] 崔大鹏,和瑞欣. 猪苓化学成分及药理作用浅述[J].河南中医,2011,02:185 -186.

[3] 李庆.猪苓合剂抗肿瘤作用的实验研究[J].细胞与分子免疫学杂志,2007,23(6): 548-551 .

[4] 康洁,杨立新,陈若芸. 猪苓研究进展文献综述[J]. 食药用菌,2013, 04:221-224.

[5] 王建中,王志能,陶志刚. 西北地区猪苓仿野生人工栽培技术[J]. 农业科技通讯,2012,06:186-188.

[6] 胡平,方清茂,夏燕莉,杨玉霞,郭俊霞. 猪苓栽培技术研究[J].安徽农业科学,2013,21:8855-8856.

[7] 许广波,傅伟杰,石铁源,等. 黄泥河林区野生猪苓产地生态及资源状况[J]. 北华大学学报(自然科学版),2002,01:73-75.

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[10] 夏琴,李敏,周进,等.不同产地、商品规格及生长年限猪苓麦角甾醇及多糖的含量分析[J]. 中药材,2015,01:45-48.

[11] 李时珍.本草纲目[M].哈尔滨:黑龙江美术出版社,2009,01:1053 -1054.

（责任编辑： 胡慧玲）

Research on the relationship of elevation, slope and years with production and quality of Zhuling/

YANG Hai-yan1, YINLi-li1, ZENG Hui1, LI Min1, XIA Qin2,3, ZHOU Jin2,3//(1.College of Pharmacy, Chengdu University of Traditional Chinese Medicine;The Ministry of Education Key Laboratory of Standardization of Chinese Herbal Medicine; State Key Laboratory Breeding Base of Systematic Research, Development and Utilization of Chinese Medicine Resources, Chengdu 611137, Sichuan; 2.Sichuan Co. Ltd of Traditional Chinese Medicine, Chengdu 611137, Sichuan; 3.Nanjiang Shuhua Co. Ltd of Traditional Chinese Medicine, Bazhong 636600, Sichuan)

Objective: To explore the effect of elevation range, slope, and the harvest period on Zhuling growth, to provide scienti fi c reference for the selection of the location for Sichuan Zhuling base and large-scale arti fi cial cultivation. Method: Block design was used to design Zhuling cultivation test, and the in fl uence of elevation, slope and growth time on the quantity and quality of Zhuling was investigated by single factor test. Samples were collected using chessboard sampling method and the production was calculated after samples were dried and weighted. According to Chinese Pharmacopoeia 2015 edition, ergosterol was detected as record under the Zhuling content determination method. Zhuling polysaccharide content was detected by sulfuric acid-anthrone method. The results were analyzed by F test. Result: The rate of growth of Zhuling was between 26.00% ～ 59.52% in different elevation conditions with Zhuling polysaccharide content between 1.62% ～ 2.30%, and ergosterol content between 0.07% ～ 0.13%.The rate of growth of Zhuling was between 25.22% ～ 64.50% in different slope conditions, with Zhuling polysaccharide content between 1.79% ～ 1.88%, and ergosterol content between 0.12% ～ 0.15%. The rate of growth of Zhuling was between 18.33% ～58.50% in different harvest periods (2～5.5 year), with Zhuling polysaccharide content between 1.30% ～ 2.12%, and ergosterol content between 0.07% ～ 0.15%. Conclusion: The yield and quality of Zhuling is signi fi cantly different when it is cultivated in different elevations and slope. Between the range of altitude 1200 m ～ 1250 m , shady slope is more suitable for the cultivation of Zhuling, and Zhuling of fi ve years old is more suitable for commodity with stable quality and high yield .

Zhuling; elevation; slope ; harvest period; ergosterol; Zhuling polysaccharide

R 282.2

A

] 1674-926X(2017)02-003-03

《四川省科技计划项目——川射干、石斛等川产特色中药材的资源保护与规范化种植关键技术研究（2014SZ0073）》：《猪苓GAP种植基地建设与示范》

1．成都中医药大学药学院 中药材标准化教育部重点实验室 中药资源系统研究与开发利用省部共建国家重点实验室培育基地，四川 成都 611137；2．四川省中药材有限责任公司， 四川 成都 611137；3．南江蜀华中药材种植有限公司， 四川 巴中 636600

杨海燕（1990-），女，硕士在读，研究方向：中药品种、质量与资源研究Tel:15184455421 Email:1935077941@qq.com

李敏，教授，博士生导师，研究方向：中药品种、质量及资源研究 Email:028limin@163.com

2016-09-23