植物甾醇作为一种新资源食品,有较高的应用价值。植物甾醇主要存在于植物油不皂化物中,随着现代提取技术的发展,植物甾醇提取方法也更加多样化,本文概述了植物甾醇提取分离方法。
植物甾醇(phytosterol)是植物中的一种有益的活性营养成分。甾醇按照其来源可分为:植物甾醇、动物甾醇和菌类甾醇。其中β-谷甾醇(β-sitosterol)、豆甾醇(stigmasterol)和菜油甾醇(campesterol)等属于植物甾醇[1]。其中植物甾醇结构因侧链上的结构不同使其具有的生理功能不同。
溶剂结晶法溶剂结晶法分为单溶剂和多溶剂的重结晶法。结晶是指蒸汽或溶液中的某些或某种成分以晶体状析出的现象。在工厂和实验室等机构分离提纯该物质常用该法。冯文欢[2]等对98%混合植物甾醇进行纯化,经2 次重结晶,最终豆甾醇的纯度可达99.36%。
层析法层析法包括柱层析、半制备液相色谱法等。极性较小的物质一般用柱层析的方法分离,甾醇的极性较低,可根据相似相溶原理通过石油醚或甲醇等低极性溶剂将甾醇从混合物中分离,制备型液相色谱可大量地对混合物进行分离。许帅[3]通过对莲心的丙酮提取物使用柱层析进行分离,甾醇酯的纯度为95.56±1.32%,回收率为95.70±3.05%。
皂化法皂化法是用熟石灰或生石灰在60℃~90℃将溶剂提取物皂化,将游离脂肪酸酯化成溶于水的盐,经萃取除去游离脂肪酸,得到不皂化物。项发晖[4]等通过对鲍鱼性腺无水乙醇提取物皂化得到鲍鱼性腺甾醇纯度达14.08%,相较于鲍鱼性腺粗甾醇纯度8.62%显著提高。
蒸馏法蒸馏法包括分子蒸馏和常规蒸馏。分子蒸馏是一种液-液分离技术,原理为在0.1 ~10Pa(帕斯卡)的高真空条件下,不同物质分子运动的平均自由程差异来进行分离;常规蒸馏则是一种气-液分离技术,在常压条件下进行分离[5]。黄妙玲[6]等利用二次蒸馏法纯化米糠油中的植物甾醇,米糠油中甾醇的含量由3.15%提高到了61.37%。
超临界流体萃取法超临界流体萃取法具有提取无污染、效率高、热敏性成分和天然活性成分不易被破坏,可选择性分离等优点,适合提取植物甾醇,此法缺点为设备价格昂贵、维修保养费用高。马永芹[7]釆用超临界萃取法提取稳定化处理的米糠,米糠油中甾醇含量为2.274%,此法提取的甾醇含量高于溶剂法。
由于植物甾醇的多重功效逐渐受到人们关注,对植物甾醇的研究也越来越深入和多样化。为提高植物甾醇的高效性和针对性,高效率、高纯度、低成本的分离技术逐步被开发和应用起来,与国外的植物甾醇在食品、医疗和化妆品等行业的应用相比,我国植物甾醇的应用还有很大的市场发展空间,因此探索植物甾醇混合物提取及其甾醇单体的分离具有重要意义。