王 华,周孝琼,陈慧芳,李炳贵,张 燕,潘灿阳
(1.龙岩学院生命科学学院,福建龙岩 364012;2.龙岩学院福建省家畜传染病防治与生物技术重点实验室,福建龙岩 364012;3.龙岩学院福建省生猪疫病防控工程技术研究中心,福建龙岩 364012)
艾叶水煎醇提液对肉兔血液及生化指标的影响
王 华1,2,3,周孝琼1,2,3,陈慧芳1,李炳贵1,张 燕1,潘灿阳1
(1.龙岩学院生命科学学院,福建龙岩 364012;2.龙岩学院福建省家畜传染病防治与生物技术重点实验室,福建龙岩 364012;3.龙岩学院福建省生猪疫病防控工程技术研究中心,福建龙岩 364012)
为研究艾叶水煎醇提液不同剂量对肉兔血液及生化指标的影响,将24只断奶体重相当的伊拉兔,随机分为A组、B组、C组和D组,每组6只,其中A组、B组、C组肉兔每天每只灌服艾叶水煎醇提液的量分别为2.0、3.0、4.0 mL,D为生理盐水对照组,总灌胃量为4.0 mL。结果显示,与D组比较,A组、B组、C组白细胞(WBC)、中性粒细胞百分比(NEUT,%)、中性粒细胞(NEUT)、淋巴细胞/单核细胞百分比(LYMPH/MONO,%)和谷草转氨酶(AST)差异极显著(P<0.01)。表明艾叶水煎醇提液可以显著提升肉兔血液中白细胞数量,对肉兔血清谷草转氨酶(AST)的活性有一定降低作用,具有提高动物机体免疫力的功效。
艾叶;水煎醇提液;血液指标;生化指标;肉兔
艾草(FoliumArtemisiaargyi)是菊科多年生草本植物,主要生长在路边及山坡,容易采集。艾叶中富含精油及多糖、黄酮、鞣质等多种功效成分,现代药理研究表明,艾叶有抗菌抗病毒、镇咳平喘、护肝利胆、增强免疫力等作用[1-3]。有研究报道,在蛋雏鸡日粮中添加适量的大蒜和艾叶可以提高鸡的日增重,降低料重比[4]。在蛋种鸡的基础日粮中添加适量的艾叶粉,有提高产蛋率、种蛋受精率、受精蛋孵化率和受精蛋健雏率[5]。艾叶在畜牧业中的应用报道较少,仅限于艾叶粉在饲料中直接添加,本试验将传统艾叶改为水煎醇提液,研究其对肉兔血液及生化指标的影响,为艾叶作为中药添加剂的应用提供理论依据。
1.1 材料
1.1.1 试用验动物 健康断奶的伊拉兔,24只,体重0.52 kg±0.05 kg,雌雄各半。
1.1.2 药品和主要试剂 艾叶,安徽亿源中药饮片科技有限公司产品,批号20140901。
1.1.3 主要仪器 血细胞分析仪(型号:VetAutoread),美国IDEXX产品;血液生化分析仪(型号:IDEXX-VeTest),美国IDEXX产品;旋转蒸发仪(型号:RE-52AA),上海亚荣生化仪器厂生产。
1.2 方法
1.2.1 艾叶水煎醇提液的制备 100 g艾叶经蒸馏水浸泡30 min,分别加10、8、6倍的蒸馏水煮3次,将3次的水煎液混合,用4层纱布过滤,旋转蒸发仪浓缩至100 mL,经过2次醇提,使每毫升含药量为1 g,调整pH为中性,4℃冰箱保存备用。
1.2.2 试验动物分组 将24 只伊拉兔随机分为A组、B组、C组、D组,每组6只,雌雄各半。其中A组、B组和C组每只试验兔灌服艾叶水煎醇提液的剂量分别为2、3、4 mL/d,为了保证各试验组灌服相同液体量,A组和B组同时补充2 mL/ d和1 mL/ d的生理盐水,D为对照组,每天每只灌服生理盐水4 mL。在试验期间笼养并使用全价配合饲料,每笼6只,每日早晚各加料1次,自由采食和饮水,每天傍晚18:00点定时灌服。分别在给药2周后,心脏采血,用一次性EDTA抗凝采血管采集2 mL;用普通采血管采集3 mL,放入4℃冰箱备用。
1.2.3 血液指标检测
1.2.3.1 血细胞检测 试验兔抗凝血样采集完毕后,立即用血细胞分析仪检测各种血细胞的数量,并记录数据。
1.2.3.2 血液生化检测 置于普通采血管中的血样,静置后,3 000 r/min离心5 min,取血清,用血液生化分析仪检测各项生化指标,并记录结果。
1.2.4 数据处理分析 采用SPSS19.0软件对数据进行单因素方差分析,对各组试验数据进行显著性分析。
2.1 对血细胞的影响
各组肉兔血液指标结果见表1,由表1可以得出,与D组比较,A组、B组、C组3个中药组的白细胞、中性粒细胞百分比、中性粒细胞及淋巴细胞/单核细胞百分比差异极显著(P<0.01),A组和B组淋巴细胞/单核细胞差异极显著(P<0.01),其他指标差异不显著(P>0.05);A组与B组比较白细胞和淋巴细胞/单核细胞百分比差异显著(P<0.05),与C组比较淋巴细胞/单核细胞差异极显著(P<0.01),其他指标差异不显著(P>0.05);B组与C组比较淋巴细胞/单核细胞差异极显著(P<0.01),其他各项指标差异不显著(P>0.05)。
2.2 对血液生化指标的影响
各组肉兔血液生化指标见表2,由表2可以得出,与D组比较,A组、B组、C组3组谷草转氨酶(AST)差异极显著(P<0.01),其他指标差异不显著(P>0.05);A组与B组比较各项指标差异不显著(P>0.05),与C组比较谷草转氨酶(AST)差异显著(P<0.05);B组与C组比较谷草转氨酶(AST)和谷丙转氨酶(ALT) 差异显著(P<0.05)。
3.1 艾叶的用量
《中华人民共和国兽药典》提示,艾叶在肉兔中用法与用量是1 g~1.5 g[6],但周孝琼等[7]报道艾叶水煮醇提液每只肉兔的用量为3.0 mL/d时生长性能最佳,本次试验采用2.0、3.0、4.0 mL 3个剂量进行,比兽药典用量增加了1倍~2倍,但并没有表现出毒性反应,这可能是水煮醇提液降低了艾叶原药的毒性有关。
3.2 对血细胞的影响
白细胞是动物机体的第二道防线,在机体的免疫系统中起着不可代替的作用。当外界病原微生物入侵时,它通过吞噬和诱导B淋巴细胞产生抗体等方式来将其消灭。嗜中性粒细胞增多常伴随白细胞总数的增多,具有提高动物机体免疫力的功效[8]。本试验结果显示,艾叶对试验兔体内的白细胞(A组提高34.5%,B组提高58.35%,C组提高43.43%),中性粒细胞和淋巴细胞等免疫细胞具有明显的增多效果,通过增加机体内免疫细胞的数量,从而增强了动物机体的免疫能力。据相关报道多糖对机体的非特异性免疫、细胞免疫和体液免疫都有广泛的影响[9-11],艾叶水煮醇提液增强肉兔的的免疫功能可能与艾叶多糖成分有直接关系。
表1 各组肉兔血液指标
注:表中数据同行肩标不同大写字母表示差异极显著(P<0.01),小写字母不同表示差异显著(P<0.05),大小写字母相同或不标字母表示差异不显著(P>0.05)。
Note:In the same line,values with different capital letters mean very significant difference(P<0.01),with different small letters mean significant difference(P<0.05),with same letters or no any note mean no significant difference (P>0.05).
表2 血液生化指标
注:表中数据同列肩标不同大写字母表示差异极显著(P<0.01),小写字母不同表示差异显著(P<0.05),大小写字母相同或不标字母表示差异不显著(P>0.05)。
Note:In the same column,values with different capital letters mean very significant difference(P<0.01),with different small letters mean significant difference(P<0.05),with same letters or no any note mean no significant difference (P>0.05).
3.3 对血液生化指标的影响
血清中谷草转氨酶(AST)的含量是评判肝功能的一项重要指标。在正常情况下,血清中正常转氨酶活性值较小,当肝细胞中毒、脂肪变性或者受损伤的组织范围较大时,可引起血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)升高[12]。但对于血清中谷草转氨酶(AST)含量的降低则鲜有报道,从本试验结果可见,3个试验组艾叶水煎醇提液对肉兔血清的谷草转氨酶(AST)都有明显的降低作用,且与艾叶水煎醇提液的用量有一定关系,A组、B组、C组与对照组比较分别下降了32.3%、27.3%、13.7%,而血清总蛋白(TP)、血清白蛋白(ALB)和尿素氮(UREA)等生化指标无显著性差异,则表明在灌服一定剂量的艾叶水煎醇提液对肉兔血清谷草转氨酶(AST)和谷丙转氨酶(ALT)的活性有一定降低作用,这与陈玉春等[13]报道的较为一致。
[1] Adams M,Efferth T,Bauer R.Activity-guided isolation of scopoletin and isoscopoletin,the inhibitory active principles towards CCRF-CEM leukaemia cells and multi-drug resistant CEM/ADR 5000 cells,fromArtemisiaargyi[J].Planta Medica,2006,72:862-864.
[2] Zeng K W,Wang S,Dong X,et al.Sesquiterpene dimer(DSF-52) fromArtemisiaargyiinhibits microglia-mediated neuroinflammation via suppression of NF-kappa B,JNK/p38 MAPKs and Jak2/Stat3 signaling pathways[J].Phytomedicine,2014,21(3):298-306.
[3] 甘昌胜,尹彬彬,张靖华,等.艾叶精油蒸馏制取对相应水提液活性成分的影响及其抑菌性能比较[J].食品与生物技术学报.2015,12(34):1327-1331.
[4] 赵兴华,何 欣,刘廷玉 .大蒜和艾叶对蛋雏鸡生长性能和免疫功能的影响[J].黑龙江畜牧兽医,2011(8):75-77.
[5] 杜森有.种鸡饲料中添加艾叶粉对蛋质量的影响[J].饲料研究,2008(2):50-51.
[6] 中国兽药典委员会.中华人民共和国兽药典(二部)[M].北京:中国农业出版社,2015:131-132.
[7] 周孝琼,李炳贵,陈慧芳,等.艾叶水煮醇提液对肉兔生长性能的影响[J].江苏农业科学,2016,44(7):295-297.
[8] 张之南,杨天楹,郝玉书.血液病学[M].北京:人民卫生出版社,2003:1109.
[9] Cheng B H,Chan J Y,Chan B C,et a1.Structural characterization and immunomodulatory effect of a polysaccharide HCP-2 fromHouttuyniacordata[J].Carbohydrate Polymers,2014,103:244-248.
[10] 罗 旋,胡昌猛,沈远娟,等.艾叶多糖对小鼠免疫功能影响的研究[J].大理大学学报,2016,1(2):15-18.
[11] Ahmed H M,Yen J Y,Tang Y C,et al.Molecular screening of Chinese medicinal plants for progestogenic and anti-progestogenic activity [J].J Biosci,2014,39(3):453-461.
[12] 李 方.血清多项生化指标对脂肪肝检测的临床意义[J].中国临床医药研究杂志,2008,196:50.
[13] 陈玉春,顾雪飞,刘 敏.5种中草药对鲤血清谷丙转氨酶、谷草转氨酶及红细胞过氧化氢酶活性的影响[J].淡水渔业,2007,37(5):11-13.
Abstract:In order to study the effects of different dosages of boiled alcohol extract fromFoliumArtemisiaeargyion blood and biochemical indexes in rabbits,24 weaning IRA rabbits were randomly divided into A,B,C,D four groups ,each set of 6.The rabbits in A,B,C three groups were given orally with 2.0 mL ,3.0 mL and 4.0 mL the boiled alcohol extract fromFoliumArtemisiaeargyievery day each.The rabbits in group D were set as control with normal saline.The results showed that compared with group D,the white blood cells (WBC,109/L),neutrophil percentage (NEUT,%),neutrophils (NEUT,109/L),lymphocyte/monocyte percentage (LYMPH/MONO,%) and aspertate aminotransferase(AST)in groups A,B,C were extremely significant difference (P<0.01).It was concluded from this experiment that the boiled alcohol extract fromFoliumArtemisiaeargyican significantly improve the content of white blood cells in the blood of rabbits.The activity of serum AST in rabbits has a certain reduction.The extract can increase the efficiency of animal immunity.
Keywords:FoliumArtemisiaeargyi; boiled alcohol extract;blood indicator;biochemical index;rabbit
EffectsofBoiledAlcoholExtractfromFoliumArtemisiaeargyionBloodandBiochemicalIndexesinRabbits
WANG Hua1,2,3,ZHOU Xiao-qiong1,2,3,CHEN Hui-fang1,LI Bing-gui1, ZHANG Yan1,PAN Can-yang1
(1 .CollegeofLifeScience,LongyanUniversity,Longyan,Fujian,364012,China;2.FujianProvincialKeyLaboratoryforthePreventionandControlofAnimalInfectiousDiseasesandBiotechnology,LongyanUniversity,Longyan,Fujian,364012,China; 3.FujianProvincialEngineering&TechnologyResearchCenterforthePreventionandControlofSwineDiseases,LongyanUniversity,Longyan,Fujian,364012,China)
S852.2;853.75
A
1007-5038(2017)08-0067-04
2016-12-22
福建省教育厅A类项目(JA15505);校级产学研合作项目(LC2016009,LC2016007)
王 华(1975-)男,山东泰安人,副教授,硕士,主要从事中草药对畜禽生长性能的影响及对疾病的防治研究。*