耐甲氧西林表皮葡萄球菌感染情况调查及药敏分析研究

吴婷婷 孔晓明

·药物研究·

耐甲氧西林表皮葡萄球菌感染情况调查及药敏分析研究

吴婷婷 孔晓明

目的探讨耐甲氧西林表皮葡萄球菌的感染情况及其耐药性。方法收集收集2013年7月至2016年4月住院患者的各类送检标本中分离鉴定的表皮葡萄球菌158株，由有经验的检验员采用BIOFOSUN微生物鉴定药敏分析系统对菌株进行鉴定，采用MIC法作抗生素敏感性试验，分析不同科室、不同年龄、不同标本及不同性别中MRSE菌株的分布情况；对院外与院内MRSE的临床特征进行分析；对MRSE在12种抗生素的药敏结果进行分析。结果在表皮葡萄球菌感染的病例中耐甲氧西林表皮葡萄球菌(MRSE)占79.1%，且男性耐甲氧西林表皮葡萄球菌的检出率高于女性，>60岁的MRSE检出率高于30～60岁和<30岁的检出率，院内感染者检出率高于院外感染者，重症监护室MRSE的检出率为高于其他科室，来源于脓性分泌物标本的MRSE检出率高于血液标本和其他标本，差异均具有统计学意义(P<0.000)。院内MRSE感染的患者中存在原发疾病的比例较院外感染的多，检出细菌前2周内服用两种以上抗生素的患者所占比例较院外感染的多，差异均具有统计学意义(P<0.05)；MRSE对青霉素、氨苄西林、苯唑西林、头孢唑啉、红霉素及克林霉素的耐药性极强，均超过90.0%，而对环丙沙星、庆大霉素、四环素、利福平、甲氧苄啶/磺胺甲噁唑(SMZ)的耐药性较强，而对万古霉素敏感。结论耐甲氧西林表皮葡萄球菌在临床上感染情况严重，且普遍存在对普通抗生素的耐药性。

耐甲氧西林表皮葡萄球菌；院内感染；耐药性

表皮葡萄球菌是一群凝固酶阴性的葡萄球菌，在自然界中分布广泛，绝大多数不致病，仅少数可引起人和动物的化脓性感染[1]。寄生于人体皮肤、阴道等部位的表皮葡萄球菌可以引起疖、痈、尿路感染、败血症及伤口感染等[2]。且近年来由于对抗菌药物的大量使用，以及不断增加的抗菌药物种类和广谱抗菌药物的广泛使用，使得表皮葡萄球菌的耐药性在逐年增加[3]。相关研究发现，表皮葡萄球菌对青霉素类的耐药性超过80.0%，其对很多抗生素耐药的原因主要与它产生β-内酰胺酶有关，耐药机制是mecA基因编码低亲和力的青霉素结合蛋白2a所致[1，4]。当前国内对耐甲氧西林表皮葡萄球菌感染率以及耐药性的研究报道较少，而对该方面的研究又显得较为重要[5]。因此本研究收集2013年7月至2016年4月在我院住院患者的各类送检标本(剔除同一患者同一部位的重复标本)中分离鉴定的表皮葡萄球菌158株，对其耐药性和药敏情况进行分析，得出结论，报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 收集2013年7月至2016年4月来我院就诊的门诊和住院患者标本分离的表皮葡萄球菌158株，其中20株血标本，42株尿标本，13株前列腺液标本，53株脓拭子分离标本，7株脑脊液标本，6株精液标本，17株痰标本，排除同一病例的重复株。

1.2 方法 所有患者的血液、尿液、痰液、脓液、脑脊液、前列腺液等标本的分离与鉴定均由本院微生物实验室有经验的技术人员用BIOFOSUN微生物鉴定药敏分析系统进行鉴定，BIOFOSUN微生物鉴定药敏分析系统由中国的复星医药公司生产制造。采用MIC法进行测定，如果苯唑西林抑菌浓度≥0.5时即为耐甲氧西林表皮葡萄球菌(MRSE)。

1.3 药敏实验 采用稀释法(即MIC法)作抗生素敏感性试验，该法由美国国家临床和实验室标准委员会(National Committee for Clinical Laboratory,NCCLS)推荐。使用NCCLS推荐的方法制备浓度为0.5麦氏单位的菌悬液，按照相应的葡萄球菌药敏板操作规程将菌悬液逐步加入板条，在35℃条件下培养24 h后上机读板，共有氨苄西林、红霉素、克林霉素、万古霉素、头孢唑林、甲氧苄啶/磺胺甲噁唑(SMZ)、环丙沙星、庆大霉素、四环素、青霉素、利福平、苯唑西林12种抗生素。其中葡萄球菌药敏板为上海星佰生物技术有限公司提供，另外本研究采用苯唑西林代替甲氧西林，用金黄色葡萄球菌ATCC25923作为质控菌株。

1.4 观察指标 (1)分析不同科室、不同年龄、不同标本及不同性别中MRSE菌株的分布情况；(2)对院外与院内MRSE的临床特征进行分析；(3)对MRSE在12种抗生素的药敏结果进行分析。

2 结果

2.1 不同科室、不同年龄、不同标本及不同性别中MRSE菌株的分布情况 本次调查共收集从我院住院患者的各类送检标本中分离鉴定的表皮葡萄球菌158株，其中耐甲氧西林表皮葡萄球菌(MRSE)的标本125例，占79.1%。其中125例MRSE的标本中男性72例，女性53例，男性耐甲氧西林表皮葡萄球菌的检出率(85.9%)高于女性(72.6%)；≥60岁的MRSE检出率94.6%，30-60岁的MRSE检出率64.1%，<30岁的MRSE检出率46.2%；院内感染者检出率(85.0%)高于院外感染者(71.1%)；重症监护室MRSE的检出率为76.2%为最高，其次是普外科(67.5%)，新生儿科为50.0%。其他科室为39.1%；来源于脓性分泌物的标本的MRSE检出率90.0%，其次为血液标本(78.9%)，其他标本MRSE发生率最低，差异均有统计学意义(P<0.01)。见表1。

2.2 院外与院内MRSE的临床特征分析 院内感染患者中>60岁者占比、死亡率、年龄≤1岁者占比、长期使用免疫抑制剂者占比及发病前有侵袭性操作者占比与院外感染间差异均无统计学意义(P>0.05)；院内MRSE感染的患者中存在原发疾病的比例较院外感染多，检出细菌前2周内服用两种以上抗生素的患者所占比例较院外感染多(P<0.05)。见表2。

表1 不同标本MRSE检出率比较

注：其他标本包括痰标本、前列腺液标本、脑脊液标本和精液标本

表2 院外与院内MRSE的特征分析 例(%)

注：*表示采用Fisher确切概率法计算得到的P值

2.3 MRSE对12种抗生素的药敏结果分析 MRSE对12种抗生素的药敏结果的分析发现，MRSE对青霉素、氨苄西林、苯唑西林、头孢唑啉、红霉素及克林霉素的耐药性极强，均超过90.0%，而对环丙沙星、庆大霉素、四环素、利福平、甲氧苄啶/磺胺甲噁唑(SMZ)的耐药性较强，而对万古霉素敏感。见表3。

3 讨论

表皮葡萄球菌是一种重要的机会性致病菌,也是引起院内感染的主要致病菌之一[5]。而随着半合成青霉素甲氧西林和苯唑西林应用于临床，MRSE便出现了，且当前MRSE感染及耐药性已经成为一个不容忽视的问题[6]。另外据相关研究报道，美国约80.0%医院感染分离的表皮葡萄球菌对甲氧西林耐药[7]。虽然临床指南规定，在使用抗生素之前要做病原学及药敏试验，不得滥用抗菌药物,但由于我国对抗生素的监管机制不够完善，使其合理利用受到很大制约，甚至由于滥用抗生素而产生了超级菌[8]。本耐药菌的出现与机体的免疫状态、长期联合使用抗生素、长期使用免疫抑制剂、住院时间过长以及侵袭性操作等有关。

表3 MRSE对12种抗生素的药敏结果分析

本研究发现，在调查的158株表皮葡萄球菌中耐甲氧西林表皮葡萄球菌(MRSE)占79.1%。说明当前表皮葡萄球菌的耐药现象较为严重，这较黄键云等[9]报道的MRSE89.4%的检出率低。较魏凌秀等[10]报道的MRSE的检出率66.7%要高。造成MRSE的地区分离率不同的原因可能与不同地区临床医生用药习惯之间的差异有关。男性发生MRSE的情况较女性多。年龄分布中以≥60岁的老年人为该菌感染的高危人群，主要可能是这些人群的自身免疫力较低，容易受到外源性致病菌的感染等有关。MRSE的标本主要分布在重症监护室、普外科和新生儿科，这与表皮葡萄球菌通常的寄生部位、机体的免疫状况等有关，重症监护室的患者病情重，营养状况差，抗菌能力也很差，容易合并机会性感染[11]。MRSE的标本来源于脓性分泌物的数最多，其次为血液标本。之后本研究又发现院内MRSE感染的患者中存在原发疾病的比例较院外感染的多；院内感染患者检出MRSE细菌前2周内服用两种以上抗生素的患者所占比例较院外感染的多，差异均具有统计学意义(P<0.05)；说明影响MRSE发生的主要危险因素是对患者免疫状态造成严重影响的基础性疾病，以及长期联合使用抗生素。MRSE对12种抗生素的耐药性差异较大，对青霉素、氨苄西林、苯唑西林、头孢唑啉、红霉素及克林霉素的耐药性极强，均超过90.0%，而对环丙沙星、庆大霉素、四环素、利福平、甲氧苄啶/磺胺甲噁唑(SMZ)的耐药性较强，而对万古霉素敏感。这与朱德妹[12]等的研究结果接近。MRSE耐药的机制可能是由于细菌的细胞中青霉素结合蛋白发生突变，从而产生新的青霉素结合蛋白位点，导致其与β-内酰胺类抗生素的亲和力降低而产生耐药。

综上所述，耐甲氧西林表皮葡萄球菌在临床上感染情况严重，且普遍存在对普通抗生素的耐药性。

1 Pourmand MR,Hassanzadeh S,Mashhadi R,et al.Comparison of four diagnostic methods for detection of methicillin resistant Staphylococcus aureus.Iran J Microbiol,2014,6:341-344.

2 Khoshkharam-Roodmajani H,Sarvari J,Bazargani A,et al.Molecular typing of methicillin-resistant and methicillin-susceptible Staphylococcus aureus isolates from Shiraz teaching hospitals by PCR-RFLP of coagulase gene.Iran J Microbiol,2014,6:246-252.

3 朱德妹,胡付品,汪复,等.2009年中国CHINET葡萄球菌属细菌耐药性监测.中国感染与化疗杂志,2010,17:414-420.

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6 黄健云,孙红.耐甲氧西林表皮葡萄球菌感染情况调查及药敏分析.中国社区医师(医学专业),2012,14:48-49.

7 Arias CA,Murray BE.Antibiotic resistant bugs in the 21st century-a clinical super challenge.N Engl J Med,2009,360:439.

8 赵学群,王屏,姜伟,等.耐甲氧西林表皮葡萄球菌感染患者万古霉素的给药方案探讨.中华医院感染学杂志,2013,23:3496-3497,3500.

9 黄健云,孙红.耐甲氧西林表皮葡萄球菌感染情况调查及药敏分析.中国社区医师(医学专业),2012,64:48-49.

10 魏凌秀,陈益明.耐甲氧西林表皮葡萄球菌的分离鉴定与耐药性调查.中国现代医生,2011,19:99-101.

11 Concepcion PM,Harrison EM,Fernandez-Garayzabal JF,et al.Detection of mecC-Methicillin-resistant Staphylococcus aureus isolates in river water:a potential role for water in the environmental dissemination.Environ Microbiol Rep,2014,6:705-708.

12 朱德妹,胡付品,汪复,等.2009年中国CHINET葡萄球菌属细菌耐药性监测.中国感染与化疗杂志,2010,17:414-420.

10.3969/j.issn.1002-7386.2017.20.037

R 378.11

A

1002-7386(2017)20-3168-03

2017-04-05)

项目来源：溧阳市重点研发计划(社会发展)项目(编号：LC2015010)

213300 江苏省溧阳市人民医院检验科