毕节圆珠半夏中阿魏酸含量测定

夏 志，张 宇，李黔柱，罗树常，王 群，陈义明

(1.贵州工程应用技术学院化学工程学院，贵州 毕节 551700；2.贵州省化学化工实验教学示范中心，贵州 毕节 551700)

毕节圆珠半夏中阿魏酸含量测定

夏 志1,2，张 宇1,2，李黔柱1,2，罗树常1,2，王 群1，陈义明1

(1.贵州工程应用技术学院化学工程学院，贵州毕节551700；2.贵州省化学化工实验教学示范中心，贵州毕节551700)

采用高效液相色谱法对半夏中有效成分阿魏酸进行分析检测，以乙腈-甲醇(95:5)为流动相，流速为1 mL/min，检测波长为320 nm，柱温为40℃。结果表明，阿魏酸在0～42 μg/mL范围内线性关系良好，R2= 0.9995，平均回收率为87.69%(n=6)，RSD为3.47%。本方法灵敏，准确，重复性好，适用于半夏中阿魏酸含量的检测。样品测量结果显示，赫章半夏中阿魏酸的含量为0.2448 μg/mL。

圆珠半夏；阿魏酸；HPLC；毕节

半夏作为贵州地道中药材，在主要出口国日本享有“免检”待遇。其有效成分阿魏酸具有抗血小板聚集、降血脂、抗血栓、治疗冠心病、动脉粥样硬化、镇痛、缓解血管痉挛等作用[1]，是生产用于治疗心脑血管疾病等症药品的基本原料。在阿魏、川芎、半夏等中药材中含量较高，对其含量的确定利于半夏的综合利用。为此，选用HPLC法对半夏中有效成分阿魏酸进行分析检测[2-4]，以期为半夏中阿魏酸含量的测定提供一定参考。

1 材料与方法

1.1 试验材料

1.1.1 供试药材

赫章县舍虎村半夏采收后去皮，晒干后粉碎，过3号筛，置于玻璃干燥器中备用。

1.1.2 试剂及仪器

阿魏酸标准品(色谱纯，购自阿拉丁)， 甲醇、乙腈分别为色谱纯， 水为二次蒸馏水。Agilent 1200 型高效液相色谱仪(美国安捷伦公司)，DAD 检测器， 安捷伦液相色谱系统化学工作站， 微孔滤膜Ф = 0.45 μm， AG135 型电子天平， BX5200BQC超声波清洗仪，移液管等玻璃仪器。

1.2 方法

1.2.1 样品制备

准确称取半夏研磨样品2.0000 g，量取30 mL甲醇，置于具塞锥形瓶中，称量，在超声波清洗仪中超声提取30 min，置冷。再次称量，用甲醇补偿其损失的质量，摇匀，取上清液，过0.45 μm微孔滤膜待用。

1.2.2 检测条件

色谱柱(SB-C18柱，4.6×250mm，2.5 μm)，流动相(乙腈:甲醇=95:5)，流速(1 mL/min)，检测波长(320nm)，柱温(40℃)，进样量(10 μL)，检测波长为320 nm。

1.2.3 阿魏酸标准工作溶液

准确称取阿魏酸标准品0.0042 g，置于100 mL棕色容量瓶中，用甲醇定容至刻度线，摇匀，得到浓度为42 μg/mL的储备液。分别移取标准溶液2.50 ，5.00 ，10.00 ，15.00 ，20.00 ，25.00 mL于25 mL棕色容量瓶中，用甲醇(色谱纯)稀释至刻度线，摇匀，即得浓度为4.2 ，8.4 ，16.8 ，25.2，33.6 ，42 μg/mL的标准系列工作溶液。

1.2.4 方法学考察

移取同一对照品溶液10 μL重复进样6次，测定阿魏酸的峰面积，考察其精密度。同一样品称取6份，每份约2 .0000g，按供试品溶液的制备及色谱条件测定阿魏酸的含量，考察其准确度。

2 结果与分析

2.1 工作曲线绘制

在1.2.2色谱条件下进样，记录色谱图，测定标准系列工作溶液的峰面积。分别以峰面积积分为纵坐标，溶液浓度为横坐标，作标准曲线，如图1所示。由图1可知，线性回归方程y = 147.55x - 1.7124，R2= 0.9995，说明在1.2.1色谱条件，浓度为0～42 μg/mL下，线性关系良好，可用于阿魏酸含量的测定。

图1 阿魏酸标准工作曲线

2.2 精密度及重现性试验

准确移取同一对照品溶液10 μL重复进样6次，测定结果如表1所示，测得阿魏酸峰面积RSD = 5.36%(n=6)，表明仪器精密度良好。

表1 同一对照品测定精密度峰面积图

同一样品称取6份，每份约2 g，按1.2.1制备溶液，在1.2.2色谱条件下进样，测其阿魏酸含量，测得平均含量为24.97%，RSD为3.79%(n=6)，结果如表4所示，表明本方法重现性良好。

表2 同一半夏样品重复性实验峰面积

2.3 回收率试验

准确移取已知含量(24.97%)的同批半夏2.0000 g，共12份，分别置于具塞锥形瓶中，将其中6份按1.2.5的方法处理样品。将另6份准确量取30 mL甲醇，分别准确移取阿魏酸对照品10.00 mL，使用超声波清洗器超声提取30 min，置冷，再次称量，用甲醇(色谱纯)补偿其损失的质量，摇匀，过0.45 μm微孔滤膜。移取各样品溶液10 μL，测定阿魏酸峰面积，如表3所示(阿魏酸标样、半夏空白、半夏样品加标后色谱图如图2、3、4所示)。测得平均回收率为87.69%，RSD=3.47%。

表3 阿魏酸加标回收率试验

图2 阿魏酸标样色谱图

Fig.2 Chromatograms of ferulic acid Standard sample

图3 半夏空白样品色谱图

图4 半夏空白样品加标色谱图

2.4 样品测定

准确称取2.0000 g半夏样品3批，按1.2.1的方法处理样品。准确移取5.00 mL该溶液于25.00 mL棕色容量瓶中，用甲醇(色谱纯)定容，测量其峰面积。由表4可知，赫章半夏中阿魏酸的平均含量为0.2448 μg/mL。

表4 半夏样品中阿魏酸含量测定

3 结论

在乙腈-甲醇(95:5)为流动相，流速为1 mL/min，检测波长为320 nm，柱温为40℃的条件下，采用HPLC测定其半夏中阿魏酸的含量。结果表明，阿魏酸在0～42 μg/mL范围内线性关系良好，R2= 0.9995，平均回收率为87.69%，RSD(n = 6)为3.47%。说明本方法灵敏，准确，重复性好，可用于半夏中阿魏酸含量的检测。测得其阿魏酸的含量为0.2448 μg/mL。

[1] 黄 瑾, 胡晋红, 朱全刚. 阿魏酸及其衍生物的药理作用[J].中药材, 2001, 24(7): 522-526.

[2] 夏 志,张 宇,黄荣茂, 等. 毕节特产珍稀药材圆珠半夏的 HPLC 指纹图谱分析[J]. 贵州农业科学, 2015, 43(4): 39-41.

[3] 许风清, 吴皓, 周倩, 等. 半夏药材中总有机酸的定量方法和含量测定研究[J].南京中医药大学学报(自然科学版), 2005, 21(1): 34-35.

[4] 张科卫,吴 皓,沈绣红.半夏中总游离有机酸的作用研究[J]. 南京中医药大学学报(自然科学版), 2001, 17(3): 159-161.

(本文文献格式：夏志，张宇，李黔柱，等.毕节圆珠半夏中阿魏酸含量测定[J].山东化工，2017，46(16)：80-81，84.)

The Determination of Ferulic Acid in the Beads Pinellia Ternate of Bijie City

Xia Zhi1,2*, Zhang Yu1,2,Li Qianzhu1,2,Luo Shuchang1,2,Wang Qun1,Chen Yiming1

(1. School of Chemical Engineering, Guizhou University of Engineering Science, Bijie 551700,China;2.The Experiment Education Model Center of the Chemistry and Chemical Engineering of Guizhou Provience,Bijie 551700, China)

Determination of ferulic acid in Pinellia ternata by high performance liquid chromatography, and the mobile phase consisted of acetonitrile - methanol (95: 5) as the mobile phase at a flow rate of 1 mL/min. The detection wavelength was 320 nm and the column temperature was 40 ℃. The results showed that ferulic acid had a good linearity from 0 μg/mL to 42 μg/mL with R2=0.9995. The average recovery was 87.69% (n = 6) and the RSD was 3.47%. The method is sensitive, accurate and reproducible, and is suitable for the detection of ferulic acid in Pinellia ternata. The results of the sample showed that the content of ferulic acid in the Pinellia ternata was 0.2448 μg/g.

beads Pinellia ternata; Ferulic acid; HPLC; Bijie

S567.23+9 ； O657.7+2

：A

：1008-021X(2017)16-0080-02

2017-07-16

贵州省应用化学特色重点学科；贵州省化学工程与技术重点支持学科(黔学位合字ZDXK[2015]32号)；贵州省教育厅项目(KY[2015]450)；贵州省科技厅联合基金项目(LH[2015]7587, LH[2016]7058)；毕节市科技局项目(毕科合[2016]21号)。

夏志(1985—)，贵州工程应用技术学院实验师，主要从事基础化学实验教学、分析化学及相关工作。