疑似新生儿溶血病961例筛查结果与分析

迟媛媛 周雨笋 孙 鹏 苏乃伦＊

1.青岛市妇女儿童医院（266034）；2青岛大学附属医院检验科

疑似新生儿溶血病961例筛查结果与分析

迟媛媛1周雨笋2孙 鹏1苏乃伦1＊

1.青岛市妇女儿童医院（266034）；2青岛大学附属医院检验科

目的：探讨新生儿溶血病（HDN）的检出情况及血清学检测分布。方法：对961例疑似HDN新生儿血液样本，进行ABO、Rh血型鉴定及溶血三项血清学检测。结果：疑似标本中共检出ABO－HDN 249例、Rh－HDN 12例。其中A型血中ABO－HDN检出率显著高于B型血（P＜0.05），各血型Rh－HDN检出率差异无统计学意义（P＞0.05）。女性疑似HDN新生儿中ABO－HDN检出率显著高于男性（P＜0.05），而不同性别疑似HDN新生儿Rh－HDN检出率差异无统计学意义（P＞0.05）。随出生时间延长，ABO－HDN新生儿检出率逐渐减少，释放＋游离试验阳性率逐渐减少，但释放单项试验阳性率逐渐增加。结论：HDN以ABO－HDN为主，出生3d内检出率最高，随出生时间的延长HDN检出率逐渐降低，但仍具有送检意义。

新生儿；溶血病；血清学检测

新生儿溶血病（HDN）是指母婴血型不合时，母体产生IgG抗体与胎儿红细胞上相应的血型抗原结合，使胎儿红细胞发生不同程度的溶血，新生儿出生后黄疸进行性加重，贫血、水肿、肝脾肿大等，常合并感染，严重者可导致流产或新生儿生理缺陷，已引起广泛重视［1］。为了解HDN的检出率和血清学分布情况，本文对本院2015年疑似HDN新生儿标本的检测结果进行汇总分析，报告如下。

1 资料与方法

1.1 资料来源

选择2015年1－12月在本院住院、疑似HDN的新生儿，入院后采集肝素抗凝全血送检，所有标本均于8h内检测完毕。

1.2 试剂与仪器

抗A、抗B血型定型试剂（上海血液生物医药有限责任公司），Anti－D（上海血液生物医药有限责任公司），ABO标准红细胞（上海血液生物医药有限责任公司），放散液（长春博德生物技术有限责任公司），ABO－Rh血型检测卡、Coombs卡、孵育箱、离心机（WADiana血型配血系统）。

1.3 检测方法与诊断标准

应用微柱凝胶技术，对每份标本进行ABO、Rh血型鉴定和3种血清学检测（直抗试验、游离试验、释放试验），其中释放试验采用酸放散方法。以抗体放散试验阳性为HDN最终诊断标准，即新生儿红细胞放散液中检出了可致敏新生儿红细胞的血型抗体。

1.4 统计学方法

采用SPSS 19.0统计软件，率的比较采用χ2检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 总体情况

疑似HDN新生儿血液标本961例，确诊HDN 261例，检出率27.2%；其中ABO－HDN 249例（占95.4%），Rh－HDN 12例（占4.6%）。

2.2 血型分布

在所有疑似HDN新生儿血液标本中A、B、O、AB型分别为339、388、360和46例。确诊ABOHDN 249例，检出率为25.9%，且仅见于A型和B型血新生儿，其中A型血ABO－HDN检出率为38.9%（132／339），B型血ABO－HDN检出率为30.2%（117／388），差异有统计学意义（χ2＝6.198，P＜0.05）。确诊Rh－HDN 12例，检出率为1.3%，其中A、B、O、AB型血分别检出3（0.9%）、3（0.9%）、5（1.5%）和1例（0.3%），各血型Rh－HDN检出率差异无统计学意义（χ2＝0.092，P＞0.05）。

2.3 性别分布

961名疑似HDN新生儿中，男性526例，女性435例。其中男性疑似HDN新生儿中ABO－HDN检出率为21.9%（115／526），女性疑似HDN新生儿中ABO－HDN检出率为30.8%（134／435），差异有统计学意义（χ2＝9.916，P＜0.05）。男性疑似HDN新生儿Rh－HDN检出率1.52%（8／526），女性疑似HDN新生儿Rh－HDN检出率0.92%（4／435），差异无统计学意义（χ2＝0.698，P＞0.05）。

2.4 ABO－HDN患儿血清学检测

将249例ABO－HDN患儿按出生后时间分为5组，分析发现出生后0～2d和出生后3d送检的血液标本ABO－HDN检出率较高，但两组间差异无统计学意义（P＞0.05）。随着出生后时间的延长，出生4d、5d、≥6d送检的标本ABO－HDN检出率逐渐降低，分别与出生后0～2d和出生后3d比较，差异均有统计学意义（P＜0.05）。见表1。

ABO－HDN患儿溶血3项检测阳性结果见表2。随出生时间延长，释放单项试验阳性率比较总体有上升趋势，差异有统计学意义（χ2＝11.468，P＜0.05）；释放＋游离试验阳性率比较总体有下降趋势，差异有统计学意义（χ2＝10.277，P＜0.05）。

表1 出生后不同时间ABO－HDN检出情况

表2 出生后不同时间ABO－HDN溶血3项检测阳性结果［例（%）］

2.5 Rh－HDN患儿血清学检测

12例Rh－HDN患儿均在出生4d内确诊，释放试验、游离试验和直抗试验均为阳性。其中，抗D抗体5例，抗E抗体4例，抗E合并抗C抗体2例，抗E合并抗JKb1例。

3 讨论

HDN主要的病因是母婴血型不合，母体产生的IgG型血型抗体进入胎儿血液循环中，与胎儿红细胞上相应的抗原结合，破坏红细胞从而发生溶血［2］。临床上HDN虽然也可发生在MN、Kell、Kidd、Duffy等血型系统，但相对较少，主要见于ABO和Rh血型系统［3］。本研究发现在961例疑似HDN的新生儿中，确诊ABO－HDN 249例，Rh－HDN仅有12例，提示本次调查的青岛地区HDN以ABO系统为主。ABO－HDN检出率（25.9%）低于蔡于旭等［4］的报道，可能是因为本研究未考虑患儿母亲的血型，在研究对象中可能存在一些母婴血型相符的情况。以往报道显示，HDN不存在性别分布差异［5］。然而在本研究中，ABO－HDN在女性疑似HDN新生儿中的检出率明显高于男性，是否由于本资料来源的局限性所致，还有待于进一步研究。

在本研究中，通过分析发现ABO各血型均可发生Rh－HDN，然而仅A、B血型新生儿发生ABOHDN，并且A型血ABO－HDN检出率高于B型。可能与新生儿红细胞表面血型抗原结合位点的数量有关［3，6］。有报道称新生儿红细胞上的A抗原结合位点多于B抗原结合位点，所以A型血新生儿比B型血新生儿发生HDN的几率相对更大一些［5］。此外，HDN的发生与孕妇体内血型抗体的效价有关，随着抗体效价的升高，溶血病的发生率也相应增加。在高志峰等［7］的研究中，O型血孕妇产生的抗A抗体效价＞64的比例为63.0%，而抗B抗体的比例为55.7%。汤伟娴［8］对5289例血型不合夫妇的研究发现，IgG效价≥64的占49.5%，其中夫妇血型为O－A、O－B、O－AB分别占22.0%、19.7%、7.8%。说明O型血孕妇更易产生高效价的抗A抗体，最终提高了A型血新生儿HDN的发病率。

本研究发现出生后0～2d及3d新生儿检出ABO－HDN最高，随着出生后时间延长检出率逐渐下降，证明ABO－HDN在出生后3d内检出率最高。林秀妹等［9］报道，在分娩后1～7d内采集血液标本检测阳性率明显高于7d以后采集的标本，这是因为随着发病时间的延长，新生儿血液中游离的IgG血型抗体及致敏红细胞逐渐减少，而大部分IgG血型抗体以抗原抗体复合物形式存在，失去反应原性，因此认为对疑似HDN新生儿应尽早送检血液标本，以提高HDN检出率［10］。本研究还发现随着出生时间增加，释放单项试验阳性率总体有上升趋势，释放试验＋游离试验阳性率总体有现下降趋势。可能随着发病时间的延长，部分游离的IgG血型抗体会不断的结合到红细胞上，进而造成红细胞破坏。因此对疑似HDN新生儿应尽早采集血液进行检验从而早期治疗，以免造成更大的伤害。然而本研究中在出生6d后仍有33例HDN检出，说明超过6d送检仍有意义。

综述所述，HDN以ABO－HDN最为常见，且A型血新生儿发病率高于B型血。出生后3d内HDN检出率最高，因此在发病早期及时采血送检，可为临床诊断治疗提供实验依据，但个别新生儿在出生6d后仍具检测意义。

［1］ 吴玉萍，郭裕萍，李文典，等.新生儿溶血病产前诊断与基因定型分析［J］.中国优生与遗传杂志，2000，8（1）：55－55.

［2］ 冯体玉，张惠琴.481例高胆红素血症新生儿溶血病血清学检测［J］.检验医学与临床，2014（1）：77－79.

［3］ 古丽，黄薇，董文斌.血型及首次出现黄疸时间与新生儿ABO溶血病的相关性［J］.西部医学，2016，28（3）：385－389.

［4］ 蔡于旭.290例新生儿溶血病血清学检测结果分析［J］.海南医学，2013，24（2）：230－231.

［5］ 夏世勤，周晓璐，王竹英，等.156例新生儿溶血病患儿血清学检测结果及相关因素分析［J］.国际检验医学杂志，2014，35（1）：22－24.

［6］ 王彬.ABO新生儿溶血病血型检测结果分析［J］.中国妇幼保健，2012，27（3）：381－382.

［7］ 高志峰，胡丽华.O型孕妇血型抗体效价与新生儿溶血病的相关分析［J］.临床血液学杂志，2013，26（4）：217－219.

［8］ 汤伟娴，吴瑛婷，陆文汇，等.O型血孕妇IgG效价与ABO新生儿溶血病的相关性分析［J］.中国输血杂志，2013，26（9）：893－894.

［9］ 林秀妹，王丹.1092例新生儿溶血三项试验检测结果的回顾分析［J］.检验医学与临床，2012，9（23）：2979－2980.

［10］ 周有为，朱碎永，林甲进.黄疸患儿血清学检测时间对诊断新生儿溶血病的影响［J］.中国优生与遗传杂志，2015，23（12）：64－65.

［责任编辑：张 璐］

Screening results and analysis of 961 cases of suspected neonatal hemolytic disease

CHI Yuanyuan1，ZHOU Yusun2，SUN Peng1，SU Nailun1＊
1.Qingdao Women and Children Hospital，Shandong，266034；2.Department of Clinical Laboratory，The Affiliated Hospital of Qingdao University
＊

snl1965＠sohu.com

Objective：To explore the situation of hemolytic disease of newborn（HDN）checked out，and to analysis serological test results ofHDN.Methods：Blood samples were collected from 961newborns that had been suspected to HDN.The ABO and Rh blood type were authenticated，and three hemolysis tests were carried out.Results：249cases of ABO－HDN and 12cases of Rh－HDN were founded in the 961samples.Detection positive rate of type A blood was significantly higher than that of type B blood in the 249ABO－HDN cases（P＜0.05）.On the contrary，there was no statistical blood－type difference in the 12Rh－HDN（P＜0.05）.Moreover，the positive rate of female newborns with ABO－HDN was significantly higher than that of male newborns，but no sexual difference in Rh－HDN cases.Furthermore，along with the time of birth increasing，the rate of detecting of newborns with ABO－HDN gradually decreased，and the positive rate of release plus free test also had downward tendency，but the positive rate of individual release had ascending trend.Conclusion：ABO－HDN was the highest in HDN，the positive rate of newborns less than 3days old is the highest.Although the HDN positive rate decreases along with the birth time of newborn increasing，the hemolysis screening test still is important for clinical diagnosis and for further therapy of possible HDN.

Newborn；Hemolytic disease；Serological test

10.3969／j.issn.1004－8189.2017.04.010

2016－12－05

2017－02－09

＊通讯作者：snl1965＠sohu.com