妊娠相关蛋白A的多态性与冠心病的相关性研究

2017-09-06 02:49张谦李雪芹王旭
中国心血管病研究 2017年5期
关键词:条带多态性基因型

张谦 李雪芹 王旭

作者单位:408300 重庆市,重庆市垫江县人民医院心内科

妊娠相关蛋白A的多态性与冠心病的相关性研究

张谦 李雪芹 王旭

作者单位:408300 重庆市,重庆市垫江县人民医院心内科

目的 探讨冠心病患者的妊娠相关蛋白A(PAPP-A)基因多态性与冠心病之间的关系。方法以2014年1月至2015年2月到我院就诊的冠心病患者共100例作为研究对象,为试验组;选取同期到我院进行体检的健康人共100位作为对照组。首先对收集的受试者血液样本进行DNA提取,然后使用PCR方式进行基因扩增,PCR的产物则使用ECOR V内切酶进行酶切,使用PAPP-A扩增酶切产物,使用琼脂糖(2%)进行凝胶电泳以鉴定PAPP-A的基因型,观察PAPP-A的基因多态性。结果 PAPP-A基因型共有3种,分别是AA型、CC型两种纯合子和AC型一种杂合子。AA型酶切后表现为77 bp一个条带;CC型酶切后表现为107 bp和77 bp两个条带;AC型酶切后则表现为107 bp、77 bp和30 bp三个条带。试验组CC型基因型明显多于对照组,C型等位基因的频率高于对照组(P<0.05),差异具有统计学意义。结论 在冠心病患者体内PAPP-A的基因型发生了明显的变化,主要表现为CC型的基因型增多,C等位基因的频率提高,因此PAPP-A可能与冠心病的发病具有一定的关系,为临床诊断和治疗提供了一定的依据。

冠状动脉疾病; 妊娠相关蛋白A; 基因多态性

冠心病(coronary artery heart disease,CHD)是临床上比较常见的一种心血管疾病[1]。近几年研究表明遗传因素在冠心病的发病中发挥着十分重要的作用[2]。妊娠相关蛋白 A(pregnancy associated plasma protein A,PAPP-A)是一种对锌离子有依赖作用的金属蛋白酶[3]。PAPP-A与动脉粥样硬化和血管成形术后再狭窄具有一定的关系[4],也可能在冠心病的发病中发挥着一定的作用[5]。但是PAPPA的基因表现为一定的多态性[6],本研究则主要对PAPP-A的多态性与冠心病的相关性进行分析,现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 以2014年1月至2015年2月到我院就诊的冠心病患者100例作为研究对象,为试验组。纳入标准:①年龄均在18岁及18岁以上;②符合冠心病的诊断标准,并经主治医生确诊;③经冠状动脉造影后发现有至少1支血管的直径减少达到了50%;④所纳入的患者对本次研究知情并自愿参与;⑤患者无阅读和理解障碍,无精神意识障碍,能够配合治疗。排除标准:①患有肝脏、肾脏以及身体其他方面严重疾病的患者;②临床资料收集不全或不能完全配合研究的患者。选取同期到我院进行健康体检的健康人100位作为对照组。

1.2 研究方法

1.2.1 血液标本采集 所有研究对象均在空腹的情况下采集静脉血,将血液样本在室温30 min内、室温或4℃条件下放置3、6、12 h;3000 r/min离心10 min,分离后备用,用于基因多态性的检验。

1.2.2 基因多态性检测 首先对收集的血液样本进行DNA的提取,然后使用PCR方式进行基因扩增,PCR的产物则使用ECOR V内切酶进行酶切使用PAPP-A扩增酶切产物使用琼脂糖(2%)进行凝胶电泳以鉴定PAPP-A的基因型,观察PAPP-A的基因多态性[7]。

1.3 统计学方法 采用SPSS 19.0软件对本次研究的结果数据进行统计分析。计数资料采用频数和频率的方式表示,组间比较采用卡方检验;计量资料采用±s表示,组间比较采用独立样本t检验P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组研究对象一般资料比较 两组在性别比、年龄等一般资料方面比较未见统计学差异(P>0.05),可以进行相互比较,见表1。

表1 两组研究对象一般资料比较(±s)

表1 两组研究对象一般资料比较(±s)

组别 例数 男/女 年龄(岁) BMI(kg/m2)对照组 100 55/45 46.19±4.91 24.81±3.09试验组 100 56/44 45.34±4.39 24.89±4.21统计值 0.782 0.911 0.124 P值 >0.05 >0.05 >0.05

2.2 两组研究对象PAPP-A基因多态性结果 试验组CC型基因型明显多于对照组,C型等位基因的频率高于对照组(P<0.05),差异具有统计学意义,见表2。

表2 两组研究对象PAPP-A基因的多态性结果比较(例)

2.3 PAPP-A基因型条带分析 PAPP-A基因型共有3种,分别是AA型、CC型两种纯合子和AC型一种杂合子。AA型酶切后表现为77 bp一个条带,CC型酶切后则表现为107 bp和77 bp两个条带,AC型酶切后则表现为107 bp、77 bp和30 bp三个条带。见图1。

图1 PAPP-A基因型条带

3 讨论

PAPP-A基因的位置在人类的染色体9q33,在Sushi结构域中,这个区域主要是长度比较短的同源重复序列,属于补体调控蛋白的模块,有比较多的补体和黏附蛋白的决定簇存在于这个区域中[8],各种蛋白之间以及蛋白与相应配体之间的相互作用都可以在这个区域中进行[9]。有学者研究发现,在不稳定斑块的细胞外基质中能够检测出大量的PAPP-A[10],但是稳定斑块中PAPP-A的含量则比较少。也有学者对小鼠进行了相关的研究,发现PAPP-A在动脉粥样硬化小鼠模型中会发生比较明显的变化[11],提出了将PAPP-A作为动脉粥样硬化新的治疗方向。随着对基因研究的不断深入,学者们逐渐发现PAPP-A具有一定的基因多态性[12],而不同的基因型所表达出来的PAPP-A可能在人体中发挥着不同的作用,也可能对动脉粥样硬化和冠心病的发生和发展产生一定程度的影响[13]。本研究对其中的相关性进行了初步的探讨。

从本研究结果中可以看出,PAPP-A基因型共有3种,分别是AA型、CC型两种纯合子和AC型一种杂合子。AA型酶切后表现为77 bp一个条带,CC型酶切后则表现为107 bp和77 bp两个条带,AC型酶切后则表现为107 bp、77 bp和30 bp三个条带。而在冠心病患者的体内,CC型基因型所占的比例较高,C等位基因出现的频率较高,由此我们可以推断,CC型基因的增高可能对冠心病的发生发展起到了一定的促进作用,CC型基因型比例较高的患者可能比较容易发生冠心病,也充分说明遗传因素对冠心病的发生和发展可能产生一定的影响。但是也有学者[14]表示,单基因就可以影响到遗传因素对疾病的影响的可能性不大,可能存在基因多重作用的结果,而本研究只对PAPP-A基因型的多态性进行了研究,具有一定的片面性,期待以后进行多基因的更加深入的研究。本研究具有十分重要的临床意义[15-17]。首先对PAPP-A基因型的多态性进行检测可以提前对冠心病等疾病进行预防[18],提醒易感人群在日常生活中注意饮食和生活习惯,降低冠心病的发生概率[19];其次,PAPP-A基因的多态性可能会成为冠心病治疗的新的研究方向,而为临床的靶向治疗方式提供一定的理论和试验依据,具有深远的临床意义[20]。

综上所述,冠心病患者体内PAPP-A的基因型发生了明显的变化,主要表现为CC型的基因型增多,C等位基因的频率提高,因此PAPP-A可能与冠心病的发病具有一定的关系,为临床诊断和治疗提供了一定的依据。

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Study on the correlation between PAPP-A polymorphism and coronary heart disease

ZHANG Qian,LI Xue-qin,WANG Xu.Department of Cardiology,Dianjiang People′s Hospital,Chongqing 408300,China

LI Xue-qin,E-mail:366931697@qq.com

Objective To investigate the polymorphism of PAPP-A gene in patients with coronary heart disease,and to explore the relationship between coronary heart disease and coronary heart disease.Methods A total of 100 patients with coronary heart disease in our hospital from February to January 2014 in our hospital were selected as the research subjects of this study,the experimental group was-2015.Select the same to our hospital for health examination of healthy people a total of 100 cases as the control group,first to collect blood samples for DNA extraction,and then use PCR gene amplification,the PCR products using ECOR V enzyme digestion and use PAPP-A amplification enzyme digestion products using agarose(2%)gel electrophoresis to identify PAPP-A gene type was observed PAPP-A gene polymorphism.Results PAPP-A gene type of a total of three,respectively was AA and CC homozygotes and AC type a heterozygous and AA type enzyme digestion performance 77 bp 1 a belt,CC type enzyme digestion is performance for a 107 bp,77 bp two bands,AC enzyme digestion is a 107 bp and 77 bp and 30 bp with three.The experimental group CC genotype was significantly higher than the control group,the experimental group,the frequency of C allele was higher than the control group(P<0.05),the difference was statistically significant.Conclusion PAPP-A in patients with coronary heart disease(CHD)genotypes in occurred obvious change,mainly as an increase in the CC genotype,increase the frequency of C allele,so PAPP-A may has some relation with the incidence of CHD,provides a certain basis for clinical diagnosis and treatment.

Coronary heart disease; Pregnancy associated white A; Gene polymorphism

李雪芹,E-mail:366931697@qq.com

10.3969/j.issn.1672-5301.2017.05.018

R541.4

A

1672-5301(2017)05-0450-04

2016-08-06)

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