丽水地区健康体检女性人乳头状瘤病毒感染情况分析

饶海英，戴 数，周 颖，钟益芳,刘五高

(浙江省丽水市人民医院检验科 温州医学院第六附属医院，浙江 丽水 323000)

丽水地区健康体检女性人乳头状瘤病毒感染情况分析

饶海英，戴 数，周 颖，钟益芳,刘五高

(浙江省丽水市人民医院检验科 温州医学院第六附属医院，浙江 丽水 323000)

目的 了解浙江省丽水地区健康体检女性生殖道人乳头状瘤病毒(HPV)感染情况和基因分型的分布特征。方法 采用HPV分型基因芯片检测系统对2013年1月至2015年12月间在浙江省丽水市人民医院体检的7 895例女性生殖道标本进行基因分型检测，分析其总体感染率、重叠感染率、年龄的分布特点。结果 7 895例女性检出 HPV感染者1 787例，感染阳性率为22.63%，其中HPV高危亚型1 513例，检出率为19.16% ，占阳性感染者的84.67%，居前4位的高危亚型分别为HPV52(14.21%) 、HPV58(13.60%) 、HPV53(10.91%)、HPV16(10.30%)；HPV低危亚型274例，检出率为 3.47%，占阳性感染者的 15.33%，居前2位的低危亚型分别为CP8304(9.79%)和HPV6(2.01%)。所有HPV阳性病例中单一亚型病毒株感染者占84.56%，双重亚型病毒株感染者占13.15%，三重及三重以上亚型病毒株感染者占2.29%。多重感染时随着合并感染的亚型数增加，所占比例逐渐降低。≥61岁年龄组和51～60岁年龄组的感染率较高，分别达到30.96%和28.38%。结论 浙江省丽水地区健康体检女性人群HPV感染常见亚型为HPV52型、HPV58型、HPV53型，HPV16型，≥61岁年龄组和51～60岁年龄组人群HPV感染率较高，相关部门应加强此类人群HPV的预防控制。

健康女性； 感染； 人乳头状瘤病毒；基因分型

人乳头状瘤病毒(human papillomavirus，HPV) 是一种属于乳多空病毒科的乳头瘤空泡病毒 A 属，具有高度的宿主性特异性，可使皮肤和黏膜异常增生，引发宿主疣状病变及乳头瘤[1]。目前已知的HPV基因分型100余种，大量研究表明HPV感染与宫颈病变及宫颈癌的发生密切相关[2-3],而高危型HPV检测对于有效预防宫颈癌疾病具有重要意义。本研究旨在通过对丽水地区 7 895名健康体检女性生殖道HPV感染状况及其亚型分布情况进行调查分析，从而为本地区女性宫颈癌筛查和防治工作提供参考。

1资料与方法

1.1 研究对象

收集2013年1月至2015年12月间在浙江省丽水市人民医院就诊的健康体检女性患者7 895例，年龄为17～72岁，中位年龄为38岁。根据年龄分为≤20岁组、21～30岁组、31～40岁组、41～50岁组、51～60岁组和≥61岁组。研究对象中排除已知确诊的宫颈癌及宫颈癌治疗后患者，所有送检标本均进行HPV DNA分型检测。所有研究对象均知情同意。

1.2 主要试剂与仪器

HPV核酸扩增分型检测系统，包括 DNA 提取试剂盒、聚合酶链式反应(polymerase chain reaction，PCR)扩增试剂盒及杂交试剂盒和医用核酸分子快速杂交仪由凯普生物科技有限公司生产；ABI2720 普通扩增仪由美国 ABI公司生产。

1.3方法

1.3.1标本取样步骤和要求

取宫颈脱落细胞标本，先用棉拭子将阴道或宫颈口过多的分泌物轻轻擦拭干净，再用宫颈刷紧贴宫颈口稍用力顺时针旋转4～5圈，然后放入有专用细胞保存液的试管中；于-20℃冰箱保存，隔天测定。

1.3.2 HPV DNA 分型检测 HPV 的分型检测

严格按照凯普 HPV 分型检测试剂盒要求进行操作，共检测以下 21 型，包括 13 种高危亚型：HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、68；5 种低危亚型: HPV6、11、42、43、44；3 种中国人群常见亚型： HPV53、66、CP8304。

2结果

2.1HPV总体感染状况

在7 895例健康体检女性中共检出HPV感染者1 787例，感染阳性率为22.63%。在所有阳性感染标本中，其中单一基因亚型病毒感染者有1 511例，占84.56%；双重基因亚型病毒感染者有235例，占13.15%；三重及三重以上基因亚型病毒感染者有41例，占2.29%，其中有1例样本感染最多达5种HPV基因亚型，见表1。

表1 HPV感染结果分布状况

Table 1 Overall distribution of HPV infection

HPV情况阳性数(n)检出率(%)阳性构成比(%)单个HPV感染151119.1484.56双重HPV感染2352.9813.15三重HPV感染330.421.85四重HPV感染70.090.39五重及以上HPV感染10.010.06合计178722.63100.00

2.2高危HPV不同基因亚型感染结果检出率和构成比

在7 895例受检标本中共检出HPV高危型感染1 513例，检出率为19.16%，占全部阳性感染者的84.67%，其中感染率最高的HPV亚型是HPV52(3.22%)，占全部HPV感染的14.21%和高危HPV感染的16.79%，其他常见的高危亚型分别为HPV58(3.08%)、HPV53(2.47%)、HPV16(2.33%) 、HPV 39(1.53%) 、HPV 51(1.14%)和 HPV 33(1.14%)，其他一些较少的高危亚型依次为HPV31(0.91%)、HPV18(0.87%)、HPV68(0.81%) 、HPV 66(0.62%) 、HPV 56(0.46%)、 HPV 59(0.24%)、 HPV 45(0.23%)和 HPV 35(0.11%)，阳性检出率均在1.00%以下，见表2。

2.3低危HPV不同基因亚型感染结果检出率和构成比

本次受检标本中共检出低危型HPV感染者274例，检出率为3.47%，占阳性感染者的15.33%。其中以CP8304(2.22%)最为常见，占全部HPV感染的9.79%和低危型HPV感染的63.84%；其余的低危亚型HPV6(0.46%)、HPV11(0.34%)、HPV44(0.32%)、HPV43(0.08%)和HPV42(0.06%)，阳性检出率均低于1.00%，见表3。

表2 高危型HPV不同亚型检测结果及分布状况

Table 2 Results and distribution of high-risk HPV subtypes

HPV高危亚型阳性数(n)检出率(%)阳性构成比(%)高危构成比(%)HPV522543.2214.2116.79HPV582433.0813.6016.06HPV531952.4710.9112.89HPV161842.3310.3012.16HPV391211.536.777.98HPV51901.145.045.95HPV33901.145.045.95HPV31720.914.034.76HPV18690.873.864.56HPV68640.813.584.23HPV66490.622.743.24HPV56360.462.012.38HPV59190.241.061.26HPV45180.231.011.19HPV3590.110.500.59合计151319.1684.67100.00

表3 低危型HPV不同亚型检测结果及分布状况

Table 3 Results and distribution of low-risk HPV subtypes

2.4不同年龄组女性HPV感染结果

所有7 895例受检标本按不同年龄分为6个组(≤20岁、21～30岁、31～40岁、41～50岁、51～60岁、≥61岁)。受检人群感染高峰年龄分别为41～50岁组，HPV感染率为28.38%(检测占比37.90%、阳性占比35.14%)，其次为31～40岁组，HPV感染率为20.25%(检测占比28.89%、阳性占比25.85%)；受检人群HPV感染率最高的为≥61岁组(30.96%)和51～60岁组(28.38%)，除了≤20 岁组因检查例数较少无人感染外，其余各年龄组感染情况都较为接近，分别为41～50岁组(20.99%)、21～30岁组(20.32%)和31～40岁组(20.25%)，见表4。

表4 不同年龄组HPV感染分布状况[n(%)]

Table 4 Distribution of HPV infection among different age groups[n(%)]

3讨论

3.1HPV DNA基因分型检测的临床意义

HPV是一种双链闭合环状的小DNA病毒，主要感染人体皮肤或黏膜上皮细胞，引发感染部位的良性、恶性病变。研究证实HPV感染是宫颈上皮瘤变和浸润性宫颈癌发生的重要原因。临床HPV检测对于宫颈癌高危患者早期防治有着重要意义，然而不同地区HPV的感染率和型别存在一定的地域和人群种族差异。

3.2HPV DNA基因分型检测情况及分析

本研究旨在对浙江省丽水地区7 895例健康体检女性宫颈脱落细胞进行HPV基因分型检测特点进行分析。其中HPV感染者1 787例，阳性率为 22.63%。高于周平等[4]报道的温州地区健康女性人乳头状瘤病毒17.12%的感染率，与王媛等[5]于2015年研究结果22.89%的HPV感染率较为接近。在所检测的 21种亚型中，共检出HPV高危亚型1 513例，检出率为19.16%，在阳性病例中占比为84.67%，其中最常见的3种高危亚型分别是HPV52(3.22%)、HPV58(3.08%)、HPV53(2.47%)，分别占全部HPV感染的14.21%、13.60%、10.91%和高危HPV感染的16.79%、16.06%、12.89%；低危亚型检出274例，检出率为3.47%，所占比例相对较低(占比为15.33%)，其中以CP8304最为常见。与周平等[4]报道的HPV基因型分布以高危型HPV52为主，低危型中以HPV61最为普遍的结果有所不同。世界范围最常见HPV基因亚型是HPV16，其他基因亚型因不同地区而存在分布差异。本次研究发现HPV16在本次研究中仅位列第四位，其检出率为2.33%，占全部HPV感染的10.30%和高危HPV感染的12.16%，同时与多数亚洲国家以HPV52、HPV58感染为首的基因亚型相符[5]。研究结果的差异，可能跟不同地域及选择的不同种族人群和年龄结构分布情况有关[6]。一方面说明不同地区HPV基因型分布不同，各自所占比例也有所区别，有可能是环境、生活习惯尤其是性行为习惯及女性自我卫生意识的不同状况造成的；另一方面由于本次所有入选的受检者都是健康体检女性，其HPV感染情况可能跟门诊就诊患者会有所不同，不同基因亚型的分布情况也跟宫颈及宫颈病变本身密切相关。本研究还发现，多重亚型感染占阳性人群的15.44%感染中，伴随着合并感染的亚型数增加，所占比例逐渐降低。在多重感染中，发现有高危亚型与高危亚型的混合，低危亚型与低危亚型的混合，也有高危亚型与低危亚型的混合，各种亚型混合其分布无一定的规律性。

3.3HPV DNA基因型分布与年龄相关性

对于年龄和HPV感染的相关性，不同的学者有不同的观点。Steinau等[7]认为21～24岁为 HPV感染的高峰年龄，而李爱敏等[8]研究认为HPV感染的高峰年龄集中在≤19 岁及≥50岁年龄组。本次研究显示，受检人群感染高峰年龄分布在31～50岁，受检人数占比达66.79%，HPV感染率为20.67%；HPV感染率较高的主要集中在≥61岁年龄组和51～60岁年龄组。原因一方面是由于该年龄段女性绝经期、围绝经期出现的生理和免疫功能紊乱，机体抵抗能力下降，另一方面是由于高危型有持续感染的趋势，潜在感染的持续和再活跃导致了第二高峰。研究结果中还发现≤20岁年龄组中6例女性无HPV阳性病例，这可能跟该年龄组体检女性基数较小有关。

综上所述，本次研究显示HPV52、HPV58、HPV53、HPV16为本地区健康女性易感的HPV高危亚型，CP8304为本地区女性易感的 HPV低危亚型。此次研究明确了该地区健康女性 HPV基因亚型的分布情况，为该地区宫颈病变及宫颈癌的有效防治提供个性化的参考依据。

[1]陈成,张文杰.人类乳头状瘤病毒与乳腺癌研究最新进展[J].临床与实验病理学杂志2012,28(9):1023-1025.

[2]Ault K A,Joura E A,kjaer S K,etal.Adenocarcinoma in situ and associated human papillomavirus type distribution observed in two clinical trials of a quadrivalent human papillomavirus vaccine[J].Int J cancer,2011,128(6):1344-1353.

[3]Munson E,Kroeger L,Balzer S,etal.Comparison of commercial hybridization and automated transcription-mediated amplification modalities for detection of high-risk human papillomavirus nucleic acid[J].J Clin Microbiol,2014,52(1):331-334.

[4]周平,周武,沈默. 温州地区女性体检人群人乳头状瘤病毒感染及分布情况研究[J].中国卫生检验杂志,2015,25(19):3353-3355.

[5]王媛,张成辉. 正常人群女性宫颈人类乳头状瘤病毒感染情况研究[J].中国妇幼保健杂志,2015,30(32):5550-5553.

[6]Peng R R, Li H M, Chang H,etal.Prevalence and genotype distribution of cervical human papillomavirus infection among female sex workers in Asia: a systematic literature review and meta-analysis[J].Sex Health,2012,9(2):113-119.

[7]Steinau M, Hariri S, Gillison M L,etal.Prevalence of cervical and oral human papillomavirus infections among US women[J].J Infect Dis,2014,209(11):1739-1743．

[8]李爱敏,李芳芳,唐曙明,等. 不同年龄段女性宫颈人乳头状瘤病毒感染状况分析[J].中国卫生检验杂志,2015,25(10):1652-1654,1657.

[专业责任编辑：张忠明]

Human papilloma virus infection in females receiving physical examination in Lishui area in Zhejiang Province

RAO Hai-ying, DAI Shu, ZHOU Ying, ZHONG Yi-fang,LIU Wu-gao

(Department of Laboratory, Lishui People’s Hospital of Zhejiang Province, Sixth Affiliated Hospital of Wenzhou Medical College, Zhejiang Lishui 323000, China)

Objective To understand genital human papilloma virus (HPV) infection in females taking physical examination in Lishui of Zhejiang Province and its genotype distribution characteristics. Methods Genitourinary specimens of 7 895 women receiving physical examination in Lishui People’s Hospital of Zhejiang Province from January 2013 to December 2015 were detected using HPV genotyping gene chip analysis system. Overall infection rate, superinfection rate and age distribution were analyzed. Results Altogether 1 787 women were detected with HPV infection in 7 895 women, with positive infection rate of 22.63%. Among them 1 513 cases were high-risk subtypes, and its detection rate was 19.16%, accounting for 84.67% of HPV positive patients. Top 4 high-risk subtypes were HPV52 (14.21%), HPV58 (13.60%), HPV53 (10.91%) and HPV16 (10.30%). Meanwhile 274 cases were low-risk HPV subtypes, and its detection rate was 3.47%, accounting for 15.33% of HPV positive patients. Top 2 low-risk subtypes were CP8304 (9.79%) and HPV6 (2.01%). Among all HPV positive cases, 84.56% cases were infected with single subtype virus strain, 13.15% infected with double subtype virus strain and 2.29% with triple and multiple subtypes virus strain. In multiple infection cases, with increase of number of subtypes, proportion reduced gradually. Infection rates of women over 61 and aged 51-60 were high, accounting for 30.96% and 28.38% respectively. Conclusion Common subtypes of HPV infection in women taking physical examination in Lishui of Zhejiang Province are HPV 52, HPV58, HPV53 and HPV16. HPV infection rates in women over 61 and aged 51-60 are high, and relevant departments should strengthen HPV prevention among these people.

healthy women; infection; human papilloma virus (HPV); genotyping

2017-01-06

饶海英(1980-)，女，主管检验师，主要从事临床基因检测工作。

刘五高，副主任检验师。

10.3969/j.issn.1673-5293.2017.07.045

R711.7

A

1673-5293(2017)07-0890-03