娄山野生华重楼种子发芽试验

宋 杨 宋德勋

遵义医药高等专科学校，贵州 遵义 563007



娄山野生华重楼种子发芽试验

宋 杨 宋德勋*

遵义医药高等专科学校，贵州 遵义 563007

目的：提高野生华重楼种子的发芽率。方法：使用不同浓度多菌灵浸种，再用不同浓度的生根粉浸种不同时间，最后使用不同浓度的赤霉素拌种，采用L16(45)正交试验表头进行催芽处理试验，并用采用SPSS19软件对试验结果进行方差分析。结果：用60ppm赤霉素拌种时发芽数最多；使用95%的多菌灵浸种1.5h时种子霉变最少；使用浓度为500mg/L的生根粉浸种1.5h发芽最多。结论：使用95%的多菌灵浸种1.5h，再使用浓度为500mg/L的生根粉浸种1.5h；使用60ppm的赤霉素拌种，是华重楼种子发芽的最佳方案，可以促进华重楼种子胚的成熟，打破种子的休眠，提高华重楼种子的发芽率。

华重楼；种子；发芽试验

娄山野生重楼系华重楼ParispolyphyllaSmith var.chinensis(Franch.) Hara，别名七叶一枝花，具有清热解毒、消肿止痛、凉肝定惊的功效[1]，用于疔肿痈肿、咽喉肿痛、毒蛇咬伤、跌仆伤痛、惊风抽搐[2]，是云南白药、宫血宁胶囊、云南白药创可贴、云南红药散、三七血伤宁散等43种中成药的原料。该药可用于功能性子宫出血产后出血[3]；止血[4]，镇痛，消炎，愈创[5]；对胃癌肿瘤细胞有抑制作用[6]；有肝脏保护作用[7]；治疗跌打损伤和风湿、毒虫毒蛇咬伤抗病毒和治疗呼吸道疾病[1]。该药材为地方保护品种的主要原料药材，因其疗效确切，临床需求逐年增加。而长期大量采集野生华重楼资源用于生产中成药，使娄山野生华重楼资源严重枯竭，再加上重楼种子发芽能力弱，生长速度缓慢，难以满足人们日益增长的需求。笔者对娄山野生华重楼的种子发芽进行试验研究，为华重楼人工种植提供数据支撑。

1 仪器与材料

1.1 仪器 马头牌JYT-5架盘药物天平(分度0.5g，最大称量500g，上海激光仪器厂)；赛多利斯电子分析天平(季尔国际贸易(上海)有限公司，FA100g，精度0.1mg)。

1.2 材料 酒精95%(苏州吴合经贸有限公司)，生根粉(98%，山东梁山鼎圣生物工程有限公司)，赤霉素(郑州银海化工有限公司)，多菌灵(PD20083931，天津市汉邦植物保护)。

华重楼种子是从娄山采摘下来的成熟种子，将其与华重楼的块茎同时采回，并种植于校园内，块茎生长出的植物植株经鉴定为华重楼ParispolyphyllaSmith var.chinensis(Franch.) Hara。

2 方法

2.1 华重楼种子处理 待华重楼果实裂开露出红色种子时，将种子摘下，去掉红色种皮，洗净，晾干。

2.2 试验方法 使用L16(45)正交试验表头进行试验，A多菌灵消毒液浓度：75%、80%、90%、95%；B消毒时间：0.5h、1h、1.5h、2h；C生根粉浓度：500、600、700、800mg/L；D浸种时间：0.5h、1h、1.5h、2h；E赤霉素拌种浓度：50、60、70、80ppm。

2.3 试验过程 首先将晾干的种子选取16份，每份100粒，按正交试验设计方案，用不同浓度的多菌灵消毒不同时间；其后用不同浓度的生根粉进行浸泡；再是使用不同浓度的赤霉素进行拌种。

2.4 试验地处理 寻找适当的种植地，种植处有略25cm厚的腐殖土，将野生泥土破碎，草根、石块捡去，使用处理好的种子按照设计进行播种100粒，3个平行。播种1年后，种子发芽，按下列公式计算发芽率：发芽率 = 发芽数 (棵) /试验播种量(粒) × 100%。

2.5 统计学分析 数据处理与分析采用 SPSS 19.0 进行进行方差分析，P<0.05 表示差异具有统计学意义。

3 结果与分析

3.1 结果 具体统计见表1，华重楼种子发芽生长情况如图1、2、3。

表1 正交试验统计结果

3.2 分析

3.2.1 生根粉浓度的影响 生根粉浓度对华重楼种子发芽率的影响：C4(800mg/L)﹤C3(700mg/L)﹤C2(600mg/L)﹤C1(500mg/L)，当生根粉浓度为C1(500mg/L)时为华重楼种子发芽的最佳条件。见表2、表3。

表2 生根粉浓度方差分析表

注：不同小写字母者表示两组间差异具有统计学意义 (P<0.05)。

表3 生根粉浓度多重比较分析表

续表2 表3 生根粉浓度多重比较分析表

注：华重楼种子发芽率与为同处理比较，标有不同小写字母者表示两组间差异具有统计学意义 (P<0.05)。

3.2.2 赤霉素拌种浓度的影响 赤霉素拌种浓度方差齐性检验结果E1、E3具有极显著差异，结果E2具有统计学差异。方差分析无统计学差异，但是E2(60ppm)>E3(70ppm)>E1(50ppm)>E4(80ppm)；试验结果显示赤霉素拌种浓度为60ppm最为最佳。见表4。

注: 赤霉素浓度与5个因素之间比较，差异无统计学意义 (P>0.05)。

3.2.3 消毒浓度、消毒时间和浸种时间的影响 消毒浓度、消毒时间和浸种时间的方差分析均无统计学差异。消毒浓度对华重楼种子发芽的影响A4(95%)>A3(90%)>A2(80%)>A1(75%)，最高与最低差为18，消毒浓度对华重楼种子发芽的影响为A4(95%)最好；消毒时间对华重楼种子发芽的影响为B3(1.5h)>B2(1h)>B4(2.0h)>B1(0.5h)，最高与最低差为142，华重楼种子消毒B3(1.5h)其发芽率最高；浸种时间的影响D3(1.5h)>D2(1h)>D1(0.5h)>D4(2h),但是最高与最低差为124，浸种时间D3(1.5h)的影响最大，华重楼的霉变率最低。

4 讨论

研究显示，使用75%～95%多菌灵浸种均可以杀死各种微生物，但95%的多菌灵消毒最佳，可防止种子霉变腐烂，保证了种子的继续发育生长；使用生根粉浸种可以促进华重楼种子的继续分化成熟，形成种子的胚；使用赤霉素拌可以打破种子的休眠，从而使种子生长出胚根(图1)，进而长出一片真叶(图2)，促成华重楼种子发芽，形成真根和华重楼的茎(图3)。

在使用华重楼种子进行繁殖时，其种子虽多，但是不易发芽，试验使用不同浓度的多菌灵消毒液对种子进行消毒，防止华重楼种子被污染霉烂；消毒时间为1.5h对华重楼种子发芽的影响最大；使用浓度为500mg/L的生根粉溶液浸泡华重楼种子1.5h，华重楼种子的发芽率最高。因此，使用95%的多菌灵浸种1.5h，再使用浓度为500mg/L的生根粉浸种1.5h；使用60ppm的赤霉素拌种，是华重楼种子发芽的最佳方案，可促进华重楼种子生长胚根，进而长出一枚真叶和茎，促使华重楼种子的发芽率。

[1]国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部)[M].北京：中国医药科技出版社，2015：243-244.

[2]陈清，阎姝．重楼的药理作用及其毒性反应的研究进展[J]．医药导报，2012，31(7) : 886-888.

[3]江延姣，叶慧君，刘佳俐，等．重楼生化汤对剖宫产术后子宫内膜MMP-9及其抑制物TIMP-1表达及细胞C 反应蛋白的影响[J]．中国临床药理学与治疗学，2014，19(5) : 542-547.

[4]丛悦，柳晓兰，余祖胤，等．重楼皂苷H 诱导血小板聚集效应及其机制的研究[J]．解放军医学杂志，2010，35(12) : 1429-1432.

[5]王奇飒，孙东杰，何黎，等．重楼总皂苷及不同皂苷成分对痤疮相关病原菌抑菌效果的评价[J]．中国皮肤性病学杂志，2016，30(9) :240-242.

[6]张珂，邓清华，马胜林，等．重楼醇提取物对胃癌SGC-7901细胞增殖和凋亡的影响[J]．中华中医药学刊，2016，34(1) :145-148.

[7]杨黎江，路斌，沈放，等．重楼皂苷对微囊藻毒素致小鼠肝损伤保护作用的组织学研究[J]．昆明学院学报，2014，36(6):36-38.

Study on Germination of seeds of wild LoushanParispolyphylla

SONG Yang SONG Dexun*

Zunyi Medical and pharmaceutical College，Zunyi 563007，China

Objective To improve the seed germination of wildparispolyphyllavar.chinensis(Franch.) Hara.Methods Using different concentrations of carbendazim seed soaking, with different concentrations of abt soaked with different time, at last use the concentration of gibberellin and adopting L16(45) orthogonal experiment header for the emergence, and the test results by using SPSS19 software analysis of variance. Result The maximum number of germination was when mixed with 60ppm gibberellin. The seed mildew was the lowest in the 1.5 hours. The maximum number of germination was found in the 1.5 hours of the growth of the root powder with a concentration of 500 mg/L. Conclusion Use 95% of the polymyl to soak for 1.5 hours, then use the concentration of 500mg/L to soak in 1.5 hours; Using 60ppm of gibberellin, it is the best solution for seed germination, which can promote the maturity of the seed embryo, break the seed dormancy, and raise the germination rate of the seed.

Parispolyphyllavar.chinensis(Franch.) Hara；Seeds；Germination test

遵义市联合基金项目(遵市科合社字[2014]02号)；遵义市人才团队项目(遵科合人字[2014]3号)；遵义市汇川区科技计划项目(遵汇科合[2014]27号)。

宋杨(1989-)，女，汉族，本科，助理讲师，研究方向为中药材临床试验。E-mail：838086611@qq.com

宋德勋(1963-)，男，汉族，本科，教授，研究方向为药材规范化种植。E-mail：277604215@qq.com

R282.2

A

1007-8517(2017)14-0035-04

2017-05-13 编辑：程鹏飞)