越鞠丸对大鼠实验性急性心肌缺血的保护作用

胡 蓉 王金艳 周 爽

1.成都中医药大学附属医院，四川 成都 610036；2. 四川省中医医院，四川 成都 610036；3.成都中医药大学，四川 成都 610036



实验研究

越鞠丸对大鼠实验性急性心肌缺血的保护作用

胡 蓉1,2王金艳3周 爽3

1.成都中医药大学附属医院，四川 成都 610036；2. 四川省中医医院，四川 成都 610036；3.成都中医药大学，四川 成都 610036

目的：观察越鞠丸对大鼠急性心肌缺血的影响，证实其对心肌缺血的保护作用。方法：将60只大鼠随机分为6组，每组10只，分别为阴性对照组、模型组、地奥心血康组、越鞠丸组(10、5、2.5g/kg)。尾静脉注射垂体后叶素(Pit)诱导大鼠急性心肌缺血模型，检测模型大鼠心电图(ECG)、血清乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)、超氧化物歧化酶(SOD)及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性。结果：越鞠丸10、5、2.5 g/kg可明显降低Pit诱导心肌缺血模型大鼠ECG的ST段T波的抬高幅度(P<0.05)、降低血清中LDH、CK的活性(P<0.05)，同时升高血清中SOD及GSH-Px的活性(P<0.05)。结论：越鞠丸对大鼠急性心肌缺血损伤具有明显保护作用，其机理可能与提高心肌组织抗氧化能力有关。

越鞠丸；心肌缺血；垂体后叶素；抗氧化能力

冠心病又称缺血性心脏病或冠状动脉粥样硬化性心脏病，多由冠状动脉的管壁狭窄，甚至闭塞，从而导致心肌的血流量减少，供氧不足，产生胸闷，胸部刺痛，心悸不宁等症状。属于中医学“厥心痛”、“胸痹”、“真心痛”等范畴，多因情志不遂、肝气郁结，而致血、痰、火、湿、食诸郁，脉络瘀阻、不通则痛，气滞、血瘀是本病的主要病理因素[1]。越鞠丸又名穹术丸，由香附、川芎、苍术、栀子、神曲同等份组成，具有行气解郁之功效，主治六郁证。赵含森等[2]用越鞠丸加减治疗心绞痛，获得良好的疗效；高辉远[3]运用越鞠丸治疗冠心病，疗效明显；周迎春等[4]用越鞠丸治疗心肌梗死大鼠，发现其具有与卡托普利相近的抗心室重构的作用，但其具体作用机制还有待进一步研究。笔者观察越鞠丸对大鼠急性心肌缺血的保护作用，现报告如下。

1 材料与仪器

1.1 实验动物 SD大鼠，雌雄各半，体重180～220g，由成都中医药大学动物实验中心提供，实验动物生产许可证号：SYXK(川)2011-049。

1.2 材料 越鞠丸(批号：20150424，北京同仁堂制药有限公司)；地奥心血康胶囊(批号：1007113，成都地奥集团)；乌拉坦(批号：20100426，国药集团化学试剂有限公司)，垂体后叶素(规格：6U/mL)。

1.3 仪器 BL-420生物机能实验系统(泰盟)，Thermo低温高速离心机(美国赛默飞世尔科技有限公司)，水恒温仪(北京中兴伟业仪器有限公司)，全自动酶标仪(美国赛默飞世尔科技有限公司)等。

2 方法

2.1 实验分组及给药 取心电图检测合格的大鼠60只，雌雄各半，随机分为6组，即：阴性对照组、模型对照组、阳性对照组(地奥心血康胶囊5 g/kg)、越鞠丸高(10g/kg)、中(5g/kg)、低(2.5g/kg)3个剂量组，每组10只。各组动物每天灌胃给药相应药物1次，连续5d，阴性对照组和模型组给予等体积生理盐水。

2.2 越鞠丸对Pit诱发大鼠心肌缺血的保护作用 末次给药30min后，腹腔注射20%乌拉坦0.5mL/100g麻醉，并将大鼠固定，取仰卧位，针状电极小心刺入四肢皮下，测定心电图，稳定30min后除阴性对照但外，各组动物分别经尾静脉注射垂体后叶素(Pit)2U/kg，10s内完成推注，记录注射Pit后15、30、60、120、300s的心电图与心率，注射30min后股动脉取血，离心，测定血清中LDH、CK、SOD、GSH-Px的活性[5-8]。

3 结果

3.1 越鞠丸对Pit诱发急性心肌缺血模型大鼠ECG的影响 尾静脉注射Pit后，模型组大鼠各时间点ST段T波抬高明显，与阴性对照组比较差异具有统计学意义(P<0.01)，表明模型制作成功[9]。越鞠丸10、5、2.5 g/kg剂量组对ST段T波的抬高具有不同程度的抑制作用，与模型组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。结果见表1。

组别剂量/g·kg-10s15s30s60s120s300s阴性对照组-0.014±0.0050.013±0.0070.014±0.0120.012±0.0130.014±0.0090.009±0.012模型组-0.019±0.0120.115±0.047**0.122±0.053**0.085±0.053**0.064±0.042**0.066±0.047**阳性对照组50.021±0.0140.052±0.038#0.048±0.038#0.032±0.028#0.031±0.021#0.017±0.013##越鞠丸低剂量组2.50.014±0.0080.072±0.0530.068±0.045#0.052±0.0370.048±0.0270.041±0.032#越鞠丸中剂量组50.017±0.0100.070±0.0470.068±0.056#0.047±0.033#0.038±0.029#0.032±0.015#越鞠丸高剂量组100.014±0.0090.074±0.0650.072±0.0480.060±0.051#0.047±0.034#0.046±0.025#

注：与阴性对照组比较，**P<0.01；与模型组比较，#P<0.05、##P<0.01。

3.2 越鞠丸对Pit诱发急性心肌缺血模型大鼠心率的影响 与阴性对照组比较，模型组大鼠各时间点心率显著下降(P<0.05，P<0.01)，越鞠丸10、5、2.5g/kg剂量组与阳性药物组能不同程度提高Pit所诱导的大鼠心率下降程度，但与模型组比较，差异无统计学意义(P>0.05)。结果见表2。

表2 越鞠丸对Pit诱导心肌缺血大鼠心率的影响 次/min)

注：与阴性对照组比较，#P<0.05、##P<0.01；与模型组比较，*P<0.05。

3.3 越鞠丸对Pit诱发急性心肌缺血模型大鼠血清中LDH、CK、SOD及GSH-Px活性的影响 与阴性对照组比较，模型组大鼠血清中LDH及CK的活性均显著升高，提示细胞膜通透性增加，从而导致LDH及CK从细胞内外漏增加，且模型组大鼠血清中SOD及GSH-Px活性显著降低(P<0.01)。越鞠丸10、5g·kg-1组及地奥心血康组可显著降低心肌缺血大鼠血清中LDH及CK的活性(P<0.05、0.01)，抑制LDH及CK从细胞内漏出，同时升高血清中SOD及GSH-Px的活性(P<0.05、P<0.01)，提示越鞠丸可通过增强心肌细胞抗氧化能力对急性缺血心肌产生保护作用，结果见表3。

组别剂量/g·kg-1LDHU/LCKU/mLSODU/mLGSH-PxU/mL阴性对照组-583.34±68.4372.28±24.76251.43±46.38402.38±38.21模型组-794.37±88.42##112.36±41.27##198.62±42.17##324.27±44.98##阳性对照组5622.17±46.35**80.25±12.47**238.42±36.49*378.44±65.12**越鞠丸低剂量组2.5702.65±66.84*100.26±47.53212.77±79.48347.29±112.43越鞠丸中剂量组5640.62±39.07**82.47±19.57**237.82±56.39**384.92±87.46*越鞠丸高剂量组10652.74±47.53*86.27±21.46*227.43±77.69*370.24±92.45*

注：与阴性对照组比较，##P<0.01；与模型组比较，*P<0.05、**P<0.01。

4 讨论

Pit致急性心肌缺血主要是通过其强烈的收缩血管作用，从而使冠状动脉痉挛，致使心肌供血不足，诱发ECG异常，主要表现为ST段抬高或低平，T波高耸或低平等。本实验表明，越鞠丸能明显对抗Pit造模后大鼠ECG中ST段的抬高，从而减轻心肌缺血所造成的损伤。

LDH、CK广泛存在于细胞浆内，故心肌细胞损伤时，细胞膜通透性增加，漏出细胞外的LDH和CK增加，从而导致血液中二者含量增加，活性升高。因此，血清中CK和LDH的量与心肌损伤及坏死程度呈正相关。SOD和GSH-Px能及时清除Pit诱发心肌缺血所产生的氧自由基，心肌缺血时，该酶的活性降低，导致氧自由基堆积，可转变为羟基自由基，后者活性更强，可引起细胞膜结构和功能更大的损伤，从而加剧缺血组织的损伤，因此SOD和GSH-Px活性的高低能间接反映机体清除氧自由基的能力。实验结果表明，越鞠丸能显著降低Pit诱导急性心肌缺血模型大鼠血清中LDH、CK的活性，提示越鞠丸对心肌细胞细胞膜具有保护作用，从而减少LDH及CK的漏出；血清中SOD和GSH-Px的活性明显升高，提示越鞠丸可通过提高心肌组织抗氧化能力，保护心肌细胞膜，进而保护缺血受损的心肌组织[10]。

越鞠丸由香附(醋制)、川芎、栀子(炒)、苍术(炒)、六神曲(炒)组成，具有理气解郁，宽中除满之功效。方中香附味辛，归肝、脾经，能散能行，具有行气解郁，调经止痛之功效，为活血调经之要药；川芎辛温，归肝、胆经，具有活血行气，祛风止痛之功效；栀子为苦寒之物，归心、肺、三焦经，具有清热解毒、凉血散瘀之功效；苍术辛温而苦，具有祛风散寒，燥湿健脾之功效。全方行气活血药与清热药相配伍，共同达到行气活血、通脉止痛的作用。实验表明越鞠丸能对抗急性心肌缺血大鼠心电图ST段的抬高，降低模型大鼠血清中LDH、CK活性，升高SOD、GSH-Px的活性，减轻心肌缺血对心脏的伤害。因此，越鞠丸对急性心肌缺血具有良好的保护作用。

[1]陈科，万峰，刘金铜，等.心泰胶囊对大鼠急性心肌梗死及垂体后叶素诱发大鼠心肌缺血的影响[J].中华中医药杂志，2012，27(11)：2943-2945.

[2]赵含森，郭玲，刘红旭，等.瓜蒌薤白半夏汤合越鞠丸加减治疗恶化劳力型心绞痛40例[J].中国中医药信息杂志，2008，15(9)：54-55.

[3]吾登山.高辉远活用越鞠丸的临床经验[J].中国中医药信息杂志，2001，8(3)：71.[4]周迎春，吴依芬，张学森.生脉散、越鞠丸、失笑散加减后中药复方干预心肌梗死大鼠心室肌血管紧张素Ⅱ和醛固酮含量及血管紧张素Ⅱ1型受体mRNA表达的变化[J].中国临床康复，2006，10(23)：81-83.

[5]牛子冉，徐晓娜，陈俞才，等.丹酚酸A对异丙肾上腺素致小鼠心肌缺血的保护作用及其机制[J].中国药理学通报，2015，31(12)：1667-1674.

[6]董六一，邵旭，江勤，等.牡荆素对大鼠实验性心肌缺血损伤的保护作用及其机制[J].中草药，2011，42(7)：1378-1380.

[7]王宇华，马世平.心泰胶囊对垂体后叶素诱发大鼠急性心肌缺血的保护作用[J].中药药理与临床，2007，23(2)：53-55.

[8]李敬文，尚坤.冠心病心肌缺血病症动物模型构建方法与评价的研究进展[J].中国民族民间医药，2016，25(14)：34-36.

[9]俞越红.24小时动态心电图在心律失常及心肌缺血患者中的应用价值[J].中国民族民间医药，2014(12)：86.

[10]王伟，刘齐宁，赵新京.黄芪预处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用及其机制[J].西安交通大学学报(医学版)，2009，30(6)：712-715.

Effect of Yueju Pill on Protective Mechanism of Experimental Rats with Myocardial Ischemia

HU Rong1,2WANG Jinyan3ZHOU Shuang3

1.Affiliated Hospital of Chengdu Traditional Chinese Medical University, Chengdu 610036,China; 2.Sichuan Traditional Chinese Medicine Hospital, Chengdu 610036, China;3. Chengdu University of Traditional Chinese Medicine, Chengdu 610036, China

Objective To study the protective effect of Yueju pill on experimental rats with myocardial ischemia (MI). Methods 60 rats were randomly divided into 6 groups, 10 in each group, the control group, the model group, the Diao Xinxuekang capsule group and the Yueju pill group (10、5、2.5g/kg). The MI model was made by iv injection of high dose pituitrin (Pit) in rats. The activities of lactate dehydrogenase (LDH) and creatine kinase (CK) in the serum were measured in rats. The changes of ST wave were determined by electrocardiogram (ECG), and the activities of LDH, CK, superoxide dismutase (SOD) and glutathione peroxidase (GSH-Px) in the serum on the MI model induced by Pit. Results On the MI model induced by Pit in rats, Yueju pill (10 and 5g/kg) markedly decreased the elevation of segment ST of ECG (P<0.05), reduced the activities of LDH and CK, and increased the activities of SOD and GSH-Px in the serum of rats (P<0.05). ConclusionYuejupill exerts significant cardioprotective effects against acute ischemic myocardial injury in rats, likely that it could enhance anti-oxygen capability and improve energy metabolism in myocardial cells.

Yuju Pill; Myocardial Ischemia (MI); Pituitrin (Pit); Antioxidant Ability

胡蓉(1978-)，女，汉族，硕士研究生，主治医师，研究方向为中西医结合防治心血管疾病的研究。E-mail：hurongde11@163.com

R285.5

A

1007-8517(2017)14-0047-03

2017-05-11 编辑：程鹏飞)