血清学筛查联合胎儿非整倍体产前无创基因检测的临床价值探讨

谭振华，王玥莹，廖子慧，李海珠

（广东省肇庆市第一人民医院检验科，广东肇庆526020）

血清学筛查联合胎儿非整倍体产前无创基因检测的临床价值探讨

谭振华，王玥莹，廖子慧，李海珠

（广东省肇庆市第一人民医院检验科，广东肇庆526020）

目的：探讨血清学筛查联合胎儿非整倍体产前无创基因检测（NIPT）在胎儿染色体非整倍体异常中的应用价值。方法：选取2015年6月至2016年6月在广东省肇庆市第一人民医院门诊产科就诊，并运用NIPT技术进行胎儿染色体疾病检测的2 000例孕妇为研究对象，回顾性分析血清学筛查及NIPT的临床资料。结果：血清学筛查染色体异常检出率为14.35%（287/2 000），NIPT检出率为8.90%（178/2 000），联合筛查检出率为5.60%（112/2 000）。血清学筛查联合NIPT检测诊断染色体异常的灵敏度、特异度以及约登指数均显著高于单纯血清学筛查或者NIPT检测（P＜0.05）。适龄组染色体异常检出率为2.14%（28/1 307），高龄组检出率为9.24%（64/693），2组比较差异有统计学意义（P＜0.05）。结论：高龄是导致胎儿染色体疾病的重要因素，与高龄孕妇孕周早期采用血清学筛查联合NIPT法可提高产前诊断效率，具有推广价值。

血清学筛查；产前无创基因检测；胎儿染色体疾病；非整倍体

研究表明，超声应用于胎儿染色体疾病筛查，准确性和灵敏度较差，而血清学筛查假高风险率较高［1-2］。基于此，笔者拟通过运用产前无创基因检测（non-invasive prenatal testing，NIPT）技术检测孕妇血浆中游离胎儿DNA（cffDNA），联合早期血清学筛查，明确其在胎儿染色体疾病筛查临床的应用价值。

1 资料与方法

1.1 一般资料选取2015年6月至2016年6月在我院门诊产科就诊，并运用NIPT技术进行胎儿染色体疾病检测的2 000例孕妇为研究对象。孕妇均签署知情同意书。孕妇入院后，详细记录孕妇的临床资料，包含ID号码、姓名、出生日期、末次月经、孕产次、采样日期、采样孕周、采样当日体重、妊娠方式、既往不良孕产史、联系电话。所有孕妇均为单胎妊娠，孕周12～24周，平均（19.7±2.4）周。将上述研究对象予以分组，以年龄＜35岁为适龄组（n=1 307），平均年龄（26.8±3.37）岁，平均孕周（19.8±2.3）周，以年龄≥35岁为高龄组（n=693），平均年龄（38.2±1.05）岁，平均孕周（19.7±2.5）周。2组孕妇一般资料比较差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。

1.2 方法

1.2.1 血清学筛查方法［3］抽取孕妇空腹血2～3 ml，采用1235001-129704型时间分辨荧光免疫仪（Wallac公司）及其配套试剂盒，测定甲胎蛋白、游离雌三醇及绒毛膜促性腺激素水平，应用Multiaale软件计算孕妇21三体、18三体和13三体高风险率、临界风险率。21三体以≥1:270为高风险，以＜1:500但大于高风险临界值为临界风险。18三体以≥1:350为高风险，以＜1:1 000但大于高风险临界值为临界风险。13三体以≥1：100为高风险，以＜1:1 000但大于高风险临界值为临界风险［4］。高风险诊断为阳性。

1.2.2 NIPT技术检测方法［5-6］在孕妇经血清学筛查后，带领其前往门诊处以专用的CF采血管采集外周静脉血5m l，置于-4℃予以保存待测。制备血浆，提取并分离样品DNA，PCR技术扩增cffDNA，检验样本DNA。所有样本DNA经由Illumina Hiseq 2000高通量测序平台（北京贝瑞和康生物技术有限公司）测序，应用配套软件BGPD V2.0.1进行生物信息分析，并判读结果。

1.3 诊断标准对高危孕妇建议其进行羊水穿刺检查，有羊水穿刺染色体检查的以羊水中胎儿核型分析作为诊断染色体异常的“金标准”，无羊水穿刺染色体检查的以分娩结局（新生儿科医生的检查结果）作为染色体异常诊断“金标准”。羊水穿刺检查操作：术前孕妇排空膀胱，取仰卧位，常规消毒和铺巾；选用DC-8型彩色超声诊断仪（Mindray公司）及配套胎儿保护装置，测定胎儿双顶径、股骨长径、羊水深度、胎盘位置、厚度等，确定穿刺部位及深度。最初2～5m l羊水用5m l注射器抽取丢弃，后用50ml注射器抽取20m l羊水送检。

1.4 统计学方法采取SPSS 22.0统计学软件对上述2组患者各项记录数据进行分类和汇总处理，检验方法采用χ2检验。以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 血清学筛查、NIPT检测及其联合诊断结果血清学筛查染色体异常检出率为14.35%（287/ 2 000），NIPT检出率为8.90%（178/2 000），联合筛查检出率为5.60%（112/2 000），见表1。

表1 三种疾病的筛查情况

2.2 血清学筛查、NIPT检测及其联合诊断效能分析血清学筛查联合NIPT诊断染色体异常的灵敏度、特异度以及约登指数均显著高于单纯血清学筛查或者NIPT检测（P＜0.05），见表2。

表2 三种方法的诊断效能比较

2.3 染色体异常情况适龄组染色体异常检出率为2.14%（28/1 307），高龄组检出率为9.24%（64/ 693），2组比较差异有统计学意义（P＜0.05），见表3。

表3 2组胎儿染色体异常情况分析

3 讨论

胎儿染色体疾病为产科临床常见的一种新生儿出生缺陷疾病，目前尚无有效治疗方法，主要借助产前筛查和诊断方法降低胎儿染色体疾病患儿出生率［7］。现阶段医学临床产前筛查手段多样，超声、血清学、MRI等技术得到普遍应用。其中超声引导下的羊水穿刺技术是胎儿染色体疾病诊断的“金标准”，但是其作为一种有创技术，操作难度较大、风险较高，而单行超声检测，亦或是血清学筛查，都难以取得满意效果［8-9］。NIPT因具有无创、较高敏感性及特异性等优点，能有效减少对孕妇及胎儿造成创伤的风险，被逐渐应用于胎儿染色体异常筛查，但是其容易受母体本身染色体异常、母体孕前期接受异体输血等多种因素影响，造成假阳性结果。

本研究通过联合血清学筛查方法及NIPT技术，将其应用于产科临床诊断，以明确胎儿染色体疾病检出率。研究结果显示：血清学筛查联合NIPT检测诊断染色体异常的灵敏度、特异度以及约登指数均显著高于单纯血清学筛查或者NIPT检测（P＜0.05），提示血清学筛查联合NIPT检测对于胎儿染色体疾病诊断具有较高灵敏度及特异性。此外，本研究中适龄组染色体异常检出率为2.14%（28/1307），高龄组检出率为9.24%（64/ 693），2组比较差异有统计学意义（P＜0.05），与何怡等［10］研究结论一致。提示说明孕妇高龄是胎儿染色体疾病的危险因素。

综上所述，高龄是胎儿染色体疾病的危险因素，而在胎儿染色体疾病临床诊断中，采用血清学筛查联合NIPT法可提高产前诊断效率，值得进一步推广。

［1］邱洁，杨晓华，方虹，等.血清学筛查联合胎儿非整倍体产前无创基因检测临床应用价值的研究［J］.中国医学工程，2013，21（4）：3-5.

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［4］侯桂玉，郭跃文，蒋丽江，等.超声NT、血清学筛查与无创产前基因检测联合筛查高危孕妇胎儿染色体非整倍体580例分析［J］.深圳中西医结合杂志，2016，26（10）：21-23.

［5］石晓丽，周丽娟.无创基因检测技术在产前筛查胎儿染色体非整倍体中的应用［J］.中国优生与遗传杂志，2015，23（12）：11-12.

［6］眭建忠，陈蔚瑜.无创产前基因检测在胎儿非整倍体筛查中的应用［J］.中国优生与遗传杂志，2016，24（2）：22-24.

［7］周燕，冀小平.探讨无创产前基因检测胎儿染色体非整倍体技术的应用［J］.疾病监测与控制，2015，9（4）：247-250.

［8］王诗雅，王慧芳.联合早孕期超声检查与无创产前基因检测筛查染色体非整倍体［J］.中国产前诊断杂志（电子版），2015，7（2）：21-26.

［9］梅瑾，王小华，王昊，等.无创产前基因检测在胎儿染色体非整倍体筛查中的应用［J］.中国预防医学杂志，2014，15（3）：238-240.

［10］何怡，余勋，赵颖，等.胎儿非整倍体产前无创基因检测的临床应用［J］.广东医学院学报，2014，32（3）：310-312.

（吴迪编辑）

ClinicalValue of SerologicalScreening Combined w ith Non-invasive Prenatal Testing for FetalAneup loidy

TAN Zhenhua，WANGYueying，LIAOZihui，LIHaizhu
（DepartmentofClinical Laboratory，The FirstPeople's Hospitalof Zhaoqing City ofGuangdong Province，Zhaoqing 526020，China）

Objective：To explore the clinical value of serological screening combined with non-invasive prenatal testing（NIPT）for fetal aneuploidy.Methods thods：A total of 2 000 cases of pregnantwomen whowere detected with NIPT technology for fetal chromosomal diseases in our hospital from Jun 2015 to Jun 2016 were selected as subjects，and the clinical data of serological screening and NIPTwere retrospectively analyzed.Results sults：The detection rate of chromosome abnormalitywith serological screening was 14.35%（287/2 000），the detection rate with NIPT was 8.90%（178/2 000），and the combined detection rate was 5.60%（112/2 000）.The results showed that the sensitivity，specificity and Youden index of serological screening combined with NIPT in diagnosis of chromosomal abnormalitywere significantly higher than those of serological screening or NIPT（P＜0.05）.The detection rate of chromosome abnormality in the rightagematernalgroup was 2.14%（28/1 307），and the detection rate in the elderlymaternal group was 9.24%（64/693），and the difference between the two groupswas statistically significant（P＜0.05）.Conclusions sions：Age is an important factor leading to fetal chromosomal diseases.The serological screening combined with NIPT can improve the efficiency of prenataldiagnosis forelderly pregnantwomen in early stage，and ithas certain promotion value.

serologicalscreening；NIPT；fetalchromosomaldiseases；aneuploidy

R714.53

A

1008-2344（2017）03-0215-03

10.16753/j.cnki.1008-2344.2017.03.009

2016-11-08