CYP17A1基因多态性与原发性高血压的相关性研究

刁晓艳, 何 燕

(贵州医科大学, 1. 心血管科; 2. 分子生物学教研室, 贵州 贵阳, 550025)



CYP17A1基因多态性与原发性高血压的相关性研究

刁晓艳1, 何 燕2

(贵州医科大学, 1. 心血管科; 2. 分子生物学教研室, 贵州 贵阳, 550025)

目的 探讨CYP17A1基因rs11191548位点多态性与原发性高血压关系。方法 选取原发性高血压患者143例和健康体检者199例。应用TaqMan探针分析CYP17A1基因rs11191548位点多态性的基因型，并探讨其相关性，采用逐步Logistic回归分析，分析获得性因素对高血压的影响。结果 经χ2检验, 2组间基因型分布差异有统计学意义(P<0.05), 2组间等位基因频率分布差异有统计学意义(P<0.05)。TT和CT基因型较CC基因型对于患病具有较高风险, CC基因型的个体患高血压的风险分别是携带TT基因型的0.370倍，携带T等位基因的个体患高血压的风险是携带C等位基因的1.776倍。获得性因素中，空腹血糖、甘油三酯及年龄较高的人群具有更高的患病风险。结论 CYP17A1基因rs11191548多态性与原发性高血压发病可能相关，其中TT基因型及T等位基因的个体患高血压的风险升高，获得性因素对高血压的发病有显著影响。

原发性高血压; CYP17A1; 基因多态性; 获得性因素

高血压是指以体循环动脉血压增高为主要特征，并可伴有心、脑、肾等器官的功能或器质性损害的临床综合征。原发性高血压(EH)是由遗传因素与环境因素相互作用所致的复杂性疾病[1]。近年来，临床上对细胞色素p450c17alpha蛋白(CYPP17A1基因)多态性与EH发病的相关性研究较为重视[2-6]。本研究探讨贵阳市部分汉族人群CYPP17A1基因多态性与EH发病的相关性，现将结果报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择2014年3月—2015年3月在本院心内科门诊及心内科住院部就诊的原发性高血压(EH)患者143例，设为高血压组，其中男69例，女74例，平均年龄(59.41±11.88)岁。EH患者血压诊断标准参照中国高血压基层管理指南(2014年修订版)中的相关标准。排除标准：继发性高血压患者; 合并瓣膜疾病、心肌病患者; 合并肝、肾衰竭患者; 孕妇、哺乳期妇女; 有精神疾病史或滥用药物者等。另选择本院门诊的健康体检者199例为对照组，其中男87例，女112 例，平均年龄(54.95±11.06)岁。患者均无高血压家族史，无各类心血管、脑血管、肾、内分泌等方面疾病。2组患者性别、年龄差异无统计学意义(P>0.05)。2组均为贵州籍汉族人，且互相均无血缘关系。

1.2 方法

① 抽取患者清晨空腹静脉血，检测血脂指标(包括甘油三酯、总胆固醇)、血糖和尿酸。② 采用国际标准化方法测量身高、体质量。计算体质量指数(BMI), BMI=体质量/身高2(kg/m2)。③ 基因分型：按经典常规法(酚-氯仿法)抽提白细胞DNA, 溶于TE; 紫外吸收法定量后标化为30 ng/μL, -40 ℃备用。应用TaqMan实时荧光定量PCR技术对CYP17A1基因rs11191548位点进行基因分型。PCR反应为10 μL体系: DNA(浓度为30 ng/μL)1.5 μL, 通用TaqMan PCR Master Mix 5 μL, 双蒸水3.25 μL, 20×基因分型探针及引物0.25 μL。其中TaqMan PCR Master Mix、基因分型探针及引物均购自美国ABI公司，探针分别用FAM、VIC染料标记。反应条件为: 95 ℃10 min活化AmpliTaq金牌酶后, 95 ℃15 s, 60 ℃ 1 min 20 s, 共55个循环。仪器采用美国ABI公司生产的Step one Plus PCR仪，读取FAM/VIC荧光判断基因分析结果。FAM荧光探针识别T等位基因, VIC荧光探针识别C等位基因。每块96孔板设3孔阴性对照，并随机抽取5%样本复测，一致性为100%。

1.3 统计学处理

本研究数据采用SPSS 22.0统计软件进行分析，计量资料以均数±标准差表示，采用t检验和单因素方差分析。各组的基因型和等位基因频率采用直接计数法, Hardy-Weinberg平衡吻合度检验基因型分布，采用χ2检验的方法，组间基因型和等位基因频率的比较采用χ2检验或确切概率法检验。高血压的危险因素采用多因素Logistic回归分析。以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 2组一般资料及临床生化指标比较

2组性别、尿酸、胆固醇、体质量指数比较，差异无统计学意义(P>0.05), EH组年龄、血糖、甘油三酯与对照组比较，差异有统计学意义(P<0.05)。见表1。

表1 高血压组和对照组临床生化指标比较

与对照组相比较, *P<0.05。

2.2 高血压组与对照组CYP17A1基因rs11191548位点基因型分布的H-W平衡检验

实验结果显示，经χ2检验，2组的基因型频率均符合Hardy-Weinberg遗传平衡(P>0.05)。

2.3 高血压组及对照组的基因型和等位基因频率分布

经χ2检验, 2组基因型分布差异有统计学意义(P<0.05), 2组等位基因频率分布差异有统计学意义(P<0.05), 而各组中不同性别者差异无统计学意义(P>0.05)。见表2。

表2 高血压组与对照组CYP17A1基因型和等位基因频率比较

与对照组比较, *P<0.05。

2.4 CYP17A1基因rs11191548多态性与原发性高血压的风险分析

对rs11191548进行单因素Logistic回归分析结果显示，携带rs11191548基因CT基因型和CC基因型的个体患高血压的风险分别是携带TT基因型的0.574及0.370倍，携带T等位基因的个体患高血压的风险是携带C等位基因的1.776倍。见表3。

2.5 多因素分析

以是否患高血压为因变量，性别、年龄、空腹血糖、尿酸、甘油三酯、胆固醇、体质量指数、rs11191548基因型为自变量，进行非条件Logistic回归分析，结果显示年龄、空腹血糖、甘油三酯是高血压发病的危险因素，见表4。

表3 CYP17A1基因多态性与高血压的风险分析

表4 贵州省汉族原发性高血压危险因素的多因素Logistic回归分析

3 讨 论

CYP17A1基因编码细胞色素P450c17alpha蛋白，影响类固醇17alpha-羟化酶和17, 20 裂解酶活性，在类固醇的生存途径的调控中起着重要的作用。CYP17A1在肾上腺及性腺表达量较多，其rs11191548位点的突变可导致17alpha-羟化酶/17, 20 裂解酶缺陷症，从而损害肾上腺和性腺中类固醇激素的合成。当这两种酶的活性同时缺乏时，此时孕烯醇酮向盐皮质激素方向转化，血中的11-去氧皮质酮、皮质酮、醛固酮的水平升高，而血中皮质醇、性激素水平降低, 17α羟类固醇激素水平极低，促性腺激素及促肾上腺皮质激素代偿性的呈高分泌状态，因而刺激肾上腺皮质增生和17-脱氧类固醇前体如孕酮、孕烯醇酮、脱氧皮质酮、皮质酮等发挥盐皮质激素功能，引起水钠潴留，血压增高[7]。

近年来，很多研究致力于rs11191548与高血压相关性，但是结论有所争议, Newton-Cheh[2]在欧洲家系及印度-亚洲家系的样本进行研究中认为位于10q24.3的CYPl7A1基因的rs11191548与收缩压(SBP)相关。Hong等[3]选择了7551例韩国人，研究发现CYPl7A1基因rs11191548位点携带C最小等位基因能显著降低SBP、舒张压(DBP)及高血压的患病风险。 而LI等[5]选取了2111例上海地区汉族人群进行研究表明, CYPl7A1基因rs11191548位点携带C最小等位基因的能增加高血压的患病风险。Lin[6]与先前的欧洲人群和中国汉族人群不同，在畲族人群中未发现rslll91548突变与高血压有显著的相关性。

本研究结果显示, rs11191548基因型与等位基因频率在贵州省汉族的EH组和对照组中差异有统计学意义, CT基因型和CC基因型的个体患高血压的风险分别是携带TT基因型的0.574及0.370倍，携带T等位基因的个体患高血压的风险是携带C等位基因的1.776倍。这可能提示CYP17A1基因rs11191548位点上T等位基因与高血压的发病相关。本研究对EH组和对照组的一般情况及相关生化结果等进行多元回归分析，结果显示年龄、空腹血糖、甘油三酯是高血压发病的危险因素，此时基因多态性的影响就被排除在外了，这也提示原发性高血压的发病是多因素的，环境及获得性因素对高血压发病的影响有可能比基因还大，在高血压的一级预防中要重视体质量，血糖、血脂的控制。

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Association between CYP17A1 gene polymorphism and essential hypertension

DIAO Xiaoyan1, HE Yan2

(1.CardiovascularDepartment; 2.DepartmentofMolecularBiology,GuizhouMedicalUniversity,Guiyang,Guizhou, 550025)

Objective To investigate the relationship between rs11191548 gene locus polymorphism in CYP17A1 gene and essential hypertension. Methods A total of 143 patients with essential hypertension and 199 healthy subjects were selected. TaqMan probe was used to analyze the genotype of rs11191548 gene locus in CYP17A1 gene and their correlation was analyzed. Stepwise Logistic regression analysis was used to analyze the influence of acquired factors on hypertension. Results There was significant difference in genotype distribution and allele frequency distribution between the two groups (P<0.05). TT and CT genotype had higher risk for diseases compared with CC genotype, the CC genotype of the risk of hypertension was 0.370 times with the TT genotype, and individuals carrying the T allele were 1.776 times the risk of hypertension with C allele. Fasting blood glucose, triglycerides, and older people were more likely to have a higher risk of hypertension. Conclusion The rs11191548 polymorphism of CYP17A1 gene may be associated with the pathogenesis of essential hypertension, and the individuals with TT genotype and T allele may be at increased risk of developing hypertension. Acquired factors have a significant impact on the incidence of hypertension.

essential hypertension; CYP17A1; gene polymorphism; acquired factors

2017-01-20

R 544.1

A

1672-2353(2017)13-008-04

10.7619/jcmp.201713003