结核病患者血清细胞因子检测的临床意义*

席向宇，王炳花

（1.徐州市传染病医院，江苏徐州221004；2.徐州医科大学，江苏徐州221004）

结核病在一定程度上属于免疫紊乱性疾病，存在多种细胞因子的异常变化。其中，肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor，TNF-α）、人白细胞介素 12 （interleukin，IL-12）、人白细胞介素18（interleukin，IL-18）和干扰素-γ （interferon，IFN-γ）等细胞因子在结核病中起一定的作用，调节结核病的免疫反应过程。但是，迄今为止，关于以上细胞因子在肺结核患者及正常对照血清中的表达及其作用国内外甚少报道。因此，本研究利用酶联免疫法（ELISA）测定肺结核患者及正常对照组血清中TNF-α、IL-12、IL-18和IFN-γ等细胞因子水平的变化情况，并探讨这些细胞因子在肺结核发病过程中所起的作用。

1 材料与方法

1.1 材料

TNF-α、IL-12、IL-18和IFN-γ酶联免疫分析试剂盒购于微科曼得生物工程有限公司。

1.2 血清标本

选择60例肺结核患者，所有患者的诊断均符合中华医学会结核病学分会2000年制定的《肺结核诊断和治疗指南》，随机选取60例正常来本院体检者，性别、年龄等主要因素与病例组相匹配。

1.3 方法

抽取研究对象的静脉血2 mL，3000 r/m离心15 min，收集上层血清。按照ELISA试剂盒操作步骤检测血清中细胞因子的水平。

1.4 统计学方法

应用SPSS16.0软件进行统计分析，计量资料以均数±标准差（±s）表示，组间比较选择t检验，以P＜0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组血清TNF-α的比较

与对照组相比，结核组血清中TNF-α的浓度高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05），见表1。

表1 不同研究对象血清 TNF-α、IL-12、IL-18、IFN-γ 的水平 （±s） ng/L

表1 不同研究对象血清 TNF-α、IL-12、IL-18、IFN-γ 的水平 （±s） ng/L

组别结核组（n=60）对照组（n=60）t P TNF-α 71.32±13.91 36.45±8.76 16.45 0.000 IL-12 14.26±10.78 7.28±1.74 3.09 0.005 IL-18（ng/L）17.83±5.48 9.10±2.18 10.22 0.000 IFN-γ（ng/L）59.42±14.92 30.34±7.25 13.58 0.000

2.2 两组血清IL-12的比较

与对照组相比，结核组血清中IL-12的浓度高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05），见表1。

2.3 两组血清IL-18的比较

与对照组相比，结核组血清中IL-18的浓度高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05），见表1。

2.4 两组血清IFN-γ的比较

与对照组相比，结核组血清中IFN-γ的浓度高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05），见表1。

3 讨论

TNF-α为前炎细胞因子，由单核巨噬细胞和淋巴细胞所产生，TNF-α可上调黏附分子表达，增加同型和异型细胞间黏附作用；促进巨噬细胞活化，增强其吞噬作用；参与肉芽肿形成，从而在结核分枝杆菌感染中起保护作用。然而，TNF-α也可导致组织坏死、空洞形成。有报道发现，空洞肺结核患者的支气管冲洗液中TNF-α的水平明显高于无空洞组[1]。也有研究[2]发现肺结核患者血液中TNF-α的表达明显高于对照组。有研究者[3]对肺结核患者抗结核治疗后发现，治疗后血清中TNF-α的含量要低于治疗前。本研究发现，结核病患者血清中TNF-α的水平明显高于对照组，和前面文献报道结果一致。

IL-12是重要的免疫调节因子，其主要功能就是诱导早期辅助性细胞 (helper T cell，Th)向Thl分化，并促进分泌相应细胞因子。其免疫学特性包括增加IFN-γ的产生和NK细胞、T细胞的细胞毒活性等。大量研究证实，IL-12作为Thl应答增强剂，在控制结核感染中具有不可替代的地位。而关于机体感染结核杆菌后，血清中IL-12水平的高低不同的研究者有各自不同的结论[4-5]。而且由于IL-12的基因多态性与结核之间有很强的易感性，所以目前用于疫苗研制比较多。本研究结果发现，结核患者血清中IL-12的含量也是明显高于对照组，提示该细胞因子用于结核的免疫疗法有一定前景。

IL-18最早是在1995年Okamurals等[6]从热灭活的丙酸杆菌致敏后再注射脂多糖 (LPs)的裸鼠肝细胞中分离并克隆出来，由于这种细胞因子能诱导Th1等细胞产生INF-γ，故命名为IFN-γ诱导因子 (IGIF)。后根据其蛋白结构和功能，改称为IL-18。IL-8是一个多效型细胞因子，主要介导Th1型细胞免疫反应，它能诱导T细胞增殖，诱导其产生IFN F-γ，具有抗炎及抗肿瘤的作用，其与IL-12一样也是Th1反应出现的早期信号。外周血单一核细胞所产生的IL-18和IFN-γ的产生密切相关，两者均有助于增强对抗结核的免疫反应，提示IL-18可以强化结核病患者的Th1类反应[7]。有研究发现[8]，不管是初治组、复治组，Ⅲ型还是Ⅳ型患者，IL-18血清中含量与胸水中含量都没有显著性差异。也有研究发现[9]，结核性、恶性胸水患者胸水IL-18浓度显著高于血清IL-18浓度，与恶性胸水相比较，结核性胸水所检测到的IL-18水平显著增高。本研究发现，与对照组相比，结核患者血清中IL-18的水平依然是显著升高的，故动态监测血清IL-18水平，可作为评估肺结核病变活动性及抗结核药物治疗效果的敏感指标。

IFN-γ是由Th1细胞分泌的免疫调节因子，激活单核细胞，使单核细胞在病灶周围积聚，控制感染扩散，有助于结核肉芽肿形成，同时增强巨噬细胞的杀菌作用，在抗结核免疫中起着重要作用。有文献报道[10]，血清IFN-γ水平在抗结核治疗前后无显著变化，也有文献报道[11]，肺结核病患者血清水平高于肺癌组和健康对照组，而且与病情轻重有关。本研究发现，相对对照组，结核病患者血清中IFN-γ的含量明显升高，说明机体一旦感染结核后，可刺激巨噬细胞产生更多的IFN-γ来保护机体抵抗结核杆菌的侵袭。

综上所述，细胞因子的水平一定程度上能反映患者的免疫状态，其变化趋势不仅可判断患者的预后，也可作为判断药物疗效的依据。因此，在进行抗肺结核治疗时动态观察细胞因子水平，有利于监测肺结核病情的转归，利用细胞因子的变化趋势，可以预知该治疗方案有效与否。

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[6]OKAMURA H,TSUTSI H,KOMATSU T,et al.Cloning of a new cytokine that induces IFN-gamma production by T cells.Nature,1995:378:58-91.

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