HIV抗体单试剂反应性献血者的确认及回归策略*

霍宝锋 张天弼 刘智敏 林奕斌 温芳丹

HIV抗体单试剂反应性献血者的确认及回归策略*

霍宝锋①张天弼①刘智敏①林奕斌①温芳丹①

目的：探究人类免疫缺陷病毒（HIV）抗体单试剂反应性献血者的确认及回归策略。方法：选择2014年1月-2016年6月本站献血经两种试剂检测的80 876人次献血者，筛选HIV抗体检测单试剂反应性为146例，屏蔽3～6个月后，对其进行召回，分别留取血液样本后，对其进行复查。结果：召回的146例单试剂反应性献血者经HIV抗体酶联免疫吸附法（ELISA）试剂检测显示，仍表现为单试剂阳性9例，双试剂阳性1例。对双试剂阳性进行检测，显示其为核酸和确证试验均为阳性。结论：对单侧反应性的献血者采用ELISA、NAT检测进行随访，献血者的权益能得到有效保障，减少献血者流失，缓解用血紧张局面。对无偿献血前献血者具体情况征询，并实施血液筛查，对低危固定的无偿献血者建立长期档案，加强检测管理，有效降低血液报废率，保证血液安全。核酸检测有助于提高无偿献血者的血液质量，降低经血传播HIV等病毒的风险，保障临床安全用血；同时，临床应加强两种检测方式的联合应用，最大限度的避免病毒感染漏检现象。

HIV抗体； 单侧反应性； 献血者； 确认； 回归

HIV的传播途径有血液、性接触、母婴传播等，为保障用血安全，我国将HIV检测作为常规血液筛查项目之一[1-2]。目前，临床对HIV检测主要为ELISA及核酸两种。ELISA具有特异性好、灵敏度高、操作简单、成本低、易于自动化等优势，在检测无偿献血标本传染标志物中被普遍应用[3-4]。因为不同厂家的ELISA试剂敏感性和特异性有所差异，所以出现了单试剂反应性。因而，检测结果显示为假阳性的情况时有发生，不仅对献血者的权益和热情造成伤害，给其造成困惑和恐慌，还会导致血源浪费[5]。本研究选择在本站献血且经检测显示为单试剂阳性的146例献血者为研究对象，对其进行≥6个月的屏蔽后实施追踪检测，分析此类献血者归队可行性。现将研究结果报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择2014年1月-2016年6月在本站献血经两种试剂检测的80 876人次，其中单试剂反应性为146例，抗-HIV单试剂呈反应性的有146例。分别进行酶联免疫法试验（ELISA）和病毒核酸检测（NAT）检测进行确认。

1.2 仪器和试剂 仪器：全自动加样酶免一体机、离心机、全自动生化分析仪、荧光定量PCR仪、汇集与核酸提取仪、核酸检测系统、数据分析系统。乙肝表面抗原（HBsAg）试剂由北京万泰生物药业股份有限公司提供（批号：201305231、201504031等）、丙型肝炎病毒抗体（抗-HCV）试剂由北京万泰生物药业股份有限公司提供（批号：201305021、201509021等）、艾滋病抗体（抗-HIV）试剂由北京万泰生物药业股份有限公司提供（批号：201306021、201508021等）、梅毒螺旋体抗体（抗-TP）试剂由北京万泰生物药业股份有限公司提供（批号：201308051、201507026等）（酶联免疫法）；HBsAg试剂由珠海丽珠试剂股份有限公司提供（批号：2013025819、2015063823等）、抗-HCV试剂由珠海丽珠试剂股份有限公司提供（批号：2013025814、2015063813等）、艾滋病抗体（抗-HIV）试剂由珠海丽珠试剂股份有限公司提供（批号：201306025、201508039等）、梅毒诊断试剂盒（酶联免疫法）试剂由珠海丽珠试剂股份有限公司提供（批号：201306011、201508031等）；中山大学达安基因股份有限公司的核酸血筛试剂（批号：20130621、201508016等）；检验所使用试剂均为中国药品生物制品检定所批检合格，所有试剂均在有效期内进行使用，严格按照试剂盒说明书进行操作。

1.3 方法 屏蔽3个月后对146例单试剂反应性献血者进行追踪检测，其中有129例经信息和电话成功召回，召回率为88.36%。对召回的献血者实施静脉取血，分别留取血清学检测样本和核酸检测样本各5 mL，分离血浆和血清，将其保存在2～8 ℃和-18 ℃以下的冰箱中备用。ELISA检测：实施HBsAg、抗-HCV、抗-HIV、抗-TP 4项检测，分别进行双试剂检测，当双试剂存在反应性可将其判断为阳性，单试剂存在反应性需进行双孔复查（采用相同试剂），结果显示单孔或双孔存在反应性可将其判断为阳性，反之则为阴性。HIV核酸检测：核酸检测时以8样本混样模式进行，如8样本混样检测显示为阳性，拆分混样的各样本，对其进行单份标本检测，如检测结果为阴性，则判断核酸检测阴性，反之则为阳性。对目标献血者屏蔽6个月后留取标本，进行ELISA和NAT检测，决定是否归队。

2 结果

召回的129例单试剂反应性献血者经抗HIV抗体ELISA试剂检测显示，抗-HCV、HBsAg、抗-TP均显示为阴性，抗-HCV仍然表现为单试剂阳性的有9例，双试剂阳性有1例。对双试剂阳性进行检测，显示其为核酸阳性，且确证试验阳性。见表1。

表1 追踪所召回的129例献血者的检测结果 例

3 讨论

输血是一种通过静脉经血液输注给患者的治疗方法，目前已广泛应用于临床，且具有无可替代的地位。但受血液安全性影响，输血治疗存在着较大风险，血液质量对治疗效果亦具有显著影响。无偿献血是输血治疗的主要血液来源，降低经血传播风险，尤其是HIV感染，是医疗部门关注的重要话题，同时也是采血站持续改进工作质量的首要目标[4，6]。我国目前献血的相关法律法规和标准中均没有涉及血液筛查呈反应性时如何进一步给予确认的法律规定以及标准。只是临床对献血者屏蔽和献血者淘汰有原则性的规定，对于呈反应性的献血者均未涉及对血液筛查假阳性献血者再次献血资格的保留和重新回归献血队伍的规定。近年来，为了更好地降低献血者与输血者两者之间经输血传播的病毒性疾病的风险，有效保证血液质量，我国采供血机构都在致力于如何提高血液安全的检测方法和检测手段。随着血液检测技术的发展，HIV、HCV感染“窗口期”明显缩短，而窗口期是指病原感染开始至可采用检测方法检测出病原时间。因此，血站工作人员一直将确保血液安全、减小血液传播疾病风险，尤其是HIV感染作为工作质量持续改进的目标。对献血者所献的血液进行筛查主要目的在于确保血液安全。ELISA检测是目前国内常用于输血传染病标志物的检测方式之一，具有高特异性和高灵敏性，且成本较低。随着ELISA检测灵敏性的提高，难免会出现假反应性等情况[7-8]。筛查输血传染病标志物，当确证实验确认标本阳性的为真阳性，如确证实验确认标本阴性则其为假反应性。当血液检测显示为假反应性，会对献血者造成不同程度的心理负担，出现恐慌等不良情绪，还会造成血液资源浪费，甚至会屏蔽献血者，使其永久无法献血[9-10]。孟毓等[11]通过比较分析4种不同的HIV试剂，结果显示，单试剂假反应性比例为89.53%～96.19%，其中97.6%（33/34）为HIV单试剂假反应性。ELISA检测结果受多种因素的影响，包括试剂批间稳定性、试剂灵敏性、人为操作、实验方法学、标本状态等。此外，ELISA检测过程中也会受到其他抗体的影响，如自身免疫、风湿因子、细菌或病毒感染等[12-13]。因此，血站有必要对此类献血者进行召回，实施再次检测。欧盟、澳大利亚、美国等地区均发布并建立了针对献血者经抗-HIV、抗-HCV、HBsAg等检测结果为假反应性的归队指南[14-15]。我国也在2013年对献血呈假反应性者提供了归队检测的指导。

本研究结果显示，召回的129例单试剂反应性献血者经抗HIV抗体ELISA试剂检测显示，仍表现为单试剂阳性的有9例，双试剂阳性有1例。对双试剂阳性进行检测，显示其为核酸和确证实验均为阳性。9例单试剂阳性经进一步检查，其核酸和确证实验均显示为阳性。陕柏峰[15]研究中，在对单试剂反应性献血者实施召回检测，结果显示，HIV确证实验阳性出现1例，这与本研究结果一致，可见对单试剂反应性献血者实施归队检测的重要性。临床调查显示，艾滋病流行态势已逐渐向一般人群扩散，其中广西、云南、四川、河南、广东、新疆等6省区艾滋病感染累计人数在全国总数中约占77.10%[16]。其中艾滋病感染率较高的为广东省[17]。在献血者中艾滋病病毒感染率以每年0.002%的比例逐渐上升。由此可见，对无偿献血者加强相关知识宣传，告知HIV的传播途径，促进其在献血前咨询，对存在高危行为的献血者予以甄别排除具有极其重要的意义。

目前对献血者检测单试剂和双孔复查均呈反应性，就会将此献血者的各血液制品全部报废，包括该献血者血液制品尚未发出的，如普通冰冻血浆或新鲜冰冻血浆等，并永久屏蔽该献血者，以确保用血者的安全[18-19]。该做法不仅会对献血者献血热情造成极大打击，还会给其家庭带来精神困扰，甚至将原本就紧张的血源浪费。因而，实施既能使假反应性献血者权益得以保护，又能确保用血者安全的归队程序尤为重要。本研究建议对呈单试剂反应性的献血者实施更加人性化的措施，包括以下几点：（1）报废单试剂反应性的献血者的血液制品，对其进行暂时屏蔽。（2）专业人员通过电话将检测结果告知单试剂反应性的献血者，对其进行衷心的感谢，并耐心向单试剂反应性献血者进行解释，对其进行心理安抚，避免其出现心理负担，告知其在可在3个月之后进行归队再次抽血检测。（3）屏蔽期满后，安排专人进行电话或短信通知，告知单试剂反应性献血者可到血站进行抽血检测，采集两管静脉血，通过核酸和确证检测者，可将其屏蔽解除，使其归队。并及时通过电话与其进行沟通，解除假反应性对其造成的心理负担，安抚其情绪。并欢迎献血者进行再次献血；如经检测献血者仍显示为单试剂阳性，对其继续进行屏蔽观察，6个月之后并将其安排为二次归队流程中，进行再次检测；如献血者检测结果为核酸阳性或双试剂阳性，则对其进行永久屏蔽。（4）安排同一工作人员全程对献血者进行解释和沟通工作，避免使献血者产生不被尊重心理。虽然会将科室的工作量增加，但仍需尽力对献血者实施关爱。此外，选择合理的检测试剂与检测方法，将因假反应性所导致的血源与血液浪费最大限度的降低。

综上所述，对抗-HIV抗体单侧反应性的献血者进行随访检测，既能有效的保障献血者的权益，又能减少献血者流失，缓解临床用血紧张的局面。对无偿献血前献血者具体情况征询，并实施血液筛查，对低危固定的无偿献血者建立长期档案，加强检测管理，有效降低血液报废率，保证血液安全。核酸检测有助于提高无偿献血者的血液质量，降低经血传播HIV等病毒的风险，保障临床安全用血；同时，临床应加强两种检测方式的联合应用，最大限度的避免病毒感染漏检现象。

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Confirmation and Regression Strategy of HIV Antibody Positive to Single Reagent/

HUO Bao-feng，ZHANG Tian-bi，LIU Zhi-min，et al.//
Medical Innovation of China，2017，14（18）：141-144

Objective：To explore the human immunodeficiency virus （HIV） antibody to confirm single reagent reaction of blood donors and regression methods.Method：80 876 people who had

monitoring for donating blood by two reagents in our hospital from January 2014 to June 2016 were selected，out of which 146 cases positive to single reagent were screened out and isolated for 3 to 6 months，then they were recalled for blood specimen analysis，and reviewed.Result：Out of the 146 donors positive to single reagent，there were still 9 cases positive to single reagent and 1 case positive to double reagents as shown by enzyme linked immunosorbent assay for HIV antibody.Double reagents detection was applied，and the results showed that it was positive to both nucleicacid and confirmatory test.Conclusion：For donors positive to single reagent，ELISA detection for anti-HIV antibody can help to better safeguard the rights and interests of blood donors，reduce the loss of blood donors，thus ensure the safety of clinical blood transfusion.For voluntary blood donor，specific consultation and blood screening given before the donation，establishment of long-term records for low-risk regular blood donors，improvement of the technical level of the staff，and rigorous detection management can help to effectively reduce the blood scrap rate and ensure the safety of blood transfusion.Nucleic acid detection helps to improve the quality of blood donated voluntarily，reduce the risk of transfusion transmitted virus such as HIV，ensure clinical safety of blood utilization；at the same time，the two kinds of detection methods should be combined together to minimize undetected virus infection.

HIV antibody； Unilateral reactivity； Donor； Confirmation； Regression

Shaoguan Center Blood Station，Shaoguan 512026，China

10.3969/j.issn.1674-4985.2017.18.040

2017-03-07） （本文编辑：张爽）

韶关市卫生计生科研项目（Y17130）

①广东省韶关市中心血站 广东 韶关 512026

霍宝锋