消毒剂在不同条件下的杀菌效果探究

张艺虹林，毛宗勇，叶兆美，陈方琴

（1.四川铁骑力士集团冯光德实验室，四川 绵阳 621000；2.三台县景福畜牧兽医站，四川 绵阳 621100；3.国家生猪产业体系绵阳试验站，四川 绵阳 621023）

消毒剂在不同条件下的杀菌效果探究

张艺虹林1，毛宗勇2，叶兆美1，陈方琴3

（1.四川铁骑力士集团冯光德实验室，四川 绵阳 621000；2.三台县景福畜牧兽医站，四川 绵阳 621100；3.国家生猪产业体系绵阳试验站，四川 绵阳 621023）

试验选取含碘（A）、醛类（B）、季铵盐类（C）3 种养殖场常用消毒剂，以大肠杆菌为试验用菌种，对消毒剂在不同存放方式、水质（硬度、pH）条件下的杀菌效果进行了初步研究。结果发现，含碘消毒剂消毒效果受存放方式影响较大，在高温和不密闭条件下稳定性差，消毒效果较差；水的硬度对季铵盐类消毒剂影响不大；水的 pH 对季铵盐类消毒剂有一定影响。

消毒剂；存放方式；水质；消毒效果

在现代化规模养猪中细菌性传染病的危害十分严重，而细菌性疾病的暴发与饲养管理和环境的关系十分密切。消毒剂的使用与饲养环境息息相关，但是在目前的生产实践中，很多消毒剂使用规范并未经过试验证明其有效性，造成一些消毒举措无效或效果不理想。因而本试验对生产常用的含碘类、季铵盐类、醛类等几种消毒剂进行试验，观察其在不同条件下的杀菌效果，以期为消毒剂在养殖场的正确使用提供参考。

1 材料与方法

1.1 试验时间与地点

试验于 2015 年 12 月至 2016 年 12 月在四川省绵阳市永兴铁骑力士集团冯光德实验室进行。

1.2 试验样品

试验所用消毒剂为实验室检测合格的不同厂家的含碘、醛类、季铵盐类消毒剂。

1.3 试验器材

超净工作台、电子天平、牛津杯、培养箱等。

1.4 主要试剂

营养肉汤、营养琼脂培养基等。

1.5 试验方法

1.5.1 样品处理 将消毒剂固体或浓缩液体用无菌水按试验所需比例稀释配制成溶液。

1.5.2 制备培养基 营养肉汤：称取 18 g 营养肉汤粉剂溶于 1 000 mL 蒸馏水中，高压灭菌后 4 ℃保存备用。营养琼脂平板：称取 38 g营养琼脂粉剂溶于1 000 mL 蒸馏水中，高压灭菌后冷却至 50～60 ℃时在超净工作台中倒入灭菌平皿中，每个平皿中倒 6～ 8mL，冷却备用。

1.5.3 制备标准菌液 将大肠杆菌标准菌株划线接种于营养琼脂平板，37 ℃培养 16～18 h，分别取单个菌落于营养肉汤，37 ℃培养 16～18 h，3 000 r/min 离心 10min，观察底部沉淀初步计量，4 ℃保存备用。

1.5.4 设计条件变量

（1）存放方式。

将碘类消毒剂（A1）、醛类消毒剂（B1）、季铵盐类消毒剂（C1）分别 400 倍、500 倍、600 倍稀释，制备3 组，存放于 10 mL 无菌 EP 管中；1 组室温（25 ℃）不密闭，2 组室温（25 ℃）密闭，3 组 37 ℃密闭。放置16～18 h，将每组样品分别用牛津杯接于涂布了 100 μL 大肠杆菌菌液的营养琼脂平板上，37 ℃培养 16～18 h。

（2）水的硬度。

根据 GB/T 7477—1987《水质钙和镁总量的测定EDTA 滴定法》测定灭菌自来水和灭菌去离子水硬度。

将 3 种季铵盐类消毒剂 （C1、C2、C3）500 倍稀释，制备 2 组，1 组使用灭菌自来水稀释，2 组使用灭菌去离子水稀释，存放于 10mL 无菌 EP 管中；将每组样品分别用牛津杯接于涂布了 100 μL 大肠杆菌菌液的营养琼脂平板上，37 ℃培养 16～18 h。

（3）水的 pH。

用精密 pH 试纸和笔式 pH 测定仪测定 3 份不同地区灭菌蒸馏水水样 pH。

将季铵盐类消毒剂（C1、C4）分别作 500、1 000倍稀释，制备 3 组，分别使用 2 份灭菌蒸馏水稀释，存放于 10mL 无菌 EP 管中；将每组样品分别用牛津杯接于涂布了 100 μL 大肠杆菌菌液的营养琼脂平板上，37 ℃培养 16～18 h。

1.5.5 结果判定 观察记录牛津杯底部周围菌落生长情况，测量抑菌圈直径。

2 结果

2.1 存放方式

根据生产及实验室常用浓度，作 400～600 倍浓度梯度稀释，测量出抑菌圈直径，结果见表 1。由表 1 可知，在不同存放条件下，含碘消毒剂抑菌圈多为不可见，醛类消毒剂和季铵盐类消毒剂可见明显抑菌圈。

表1 不同存放条件抑菌圈直径

2.2 水的硬度

根据 GB/T 7477—1987《水质钙和镁总量的测定EDTA 滴定法》，测得水样 1（灭菌自来水）硬度为284mmol/L，水样 2（灭菌去离子水）硬度为 0mmol/L。

由表 2可见，用不同硬度的水样配制的 3种季铵盐类消毒剂（C1、C2、C3），抑菌圈直径差别不大。

表2 用不同硬度水样稀释的季铵盐类消毒剂抑菌圈直径 mm

2.3 水的 pH

用精密 pH 试纸和笔式 pH 测定仪测得 3 份不同地区灭菌蒸馏水水样 pH 分别为 6.7、6.2、5.4。

由表 3可知，两种季铵盐类消毒剂在偏酸性环境下抑菌圈直径变化趋势不明显。

表3 配制 24 h内常温密闭保存用不同 pH 水样稀释的季铵盐类消毒剂抑菌圈直径

3 结论与分析

3.1 存放方式

根据结果，在不同存放条件下，含碘消毒剂效果不稳定，醛类消毒剂和季铵盐类消毒剂受环境影响较小，其中季铵盐类整体效果更佳。

碘制剂易挥发，在高温和不密闭条件下稳定性差，杀菌效果不佳，不适宜用于踏脚盆等长时间暴露在室外环境的消毒方式；醛类和季铵盐类混合型消毒剂受温度和挥发等影响较小。

3.2 水的硬度

两份水样来自同一地区，一份直接灭菌，一份做去离子处理后灭菌，选取的消毒剂为不易受其他环境条件影响的季铵盐类消毒剂。试验结果显示，水的硬度对季铵盐类消毒剂影响不明显。

3.3 水的 pH

3份水样来自不同地区，均作蒸馏及灭菌处理，经测定水的 pH 均偏酸性，故选取 pH 为 6.8～8.0 的季铵盐类消毒剂。

根据资料及文献，季铵盐类的最适 pH 为 10 左右。根据试验结果与以往同条件数据比较，在偏酸性环境下，其杀菌效果有所降低。

4 问题与展望

多数消毒剂（如碘制剂、季铵盐类）对有机物敏感，肉汤及营养琼脂中的牛肉膏等成分可能对试验结果有影响。

模拟环境变量时，非变量条件不易控制，容易造成结果误差，后续试验还需改进模拟方法。

牛津杯法存在偶然性，本试验数据均由多次重复试验总结得出，但仍应考虑更加精确的计量方式。

以上均为实验室数据，后续还需结合生产场实际情况开展生产试验，进一步完善结论。

（编辑：富春妮）

日本人寿命全球最高

【德国《每日镜报》网站 5 月 17 日报道】题：日本人活得最长

世界卫生组织周三在日内瓦公布的一项调查显示，日本人寿命全球最高，平均预期寿命 83.7岁。这已是日本连续多年在这一调查中排名最高。随后是瑞士人（83.4 岁）和新加坡人（83.1 岁）。

根据这项调查，德国人平均预期寿命 81岁，其中女性寿命 83.4 岁，男性 78.7 岁。而法国、冰岛、卢森堡、瑞典、西班牙、澳大利亚和韩国人口的平均预期寿命均超过82岁。

世卫组织的数据指出，美国人的平均预期寿命为 79.3 岁。中国的平均预期寿命为 76.1 岁。而在内战中的叙利亚，平均预期寿命仅为 64.5 岁。不过，平均预期寿命最低的人口来自于撒哈拉以南的非洲。在中非共和国、乍得、科特迪瓦、莱索托和尼日利亚，人们的平均预期寿命不足 55 岁。而塞拉利昂的平均预期寿命仅为 50.1 岁。

世卫组织称，营养不良、疟疾和艾滋病等疾病以及武装冲突是导致非洲很多国家人口寿命缩短的主要原因。

（转自 参考消息[N]，2017-05-19）

S851.3

A

1002-1957(2017)03-0069-02

2017-04-20

张艺虹林（1993-），女，四川绵阳人，兽医师，研究方向为动物医学.E-mail:mzzyhl@126.com