猪乙型脑炎疫苗免疫试验

段正赢，周丹娜，杨克礼，郭 锐，刘 威，刘泽文，袁芳艳，田永祥

（湖北省农业科学院畜牧兽医研究所/农业部畜禽细菌病防治制剂创制重点实验室/动物胚胎工程及分子育种湖北省重点实验室，湖北 武汉 430064）

猪乙型脑炎疫苗免疫试验

段正赢，周丹娜，杨克礼，郭 锐，刘 威，刘泽文，袁芳艳，田永祥

（湖北省农业科学院畜牧兽医研究所/农业部畜禽细菌病防治制剂创制重点实验室/动物胚胎工程及分子育种湖北省重点实验室，湖北 武汉 430064）

乙型脑炎（Japanese encephalitis,JE）又称日本乙型脑炎、流行性乙型脑炎，俗称乙脑，是由流行性乙型脑炎病毒（Japanese encephalitis virus,JEV）引起的一种人畜共患传染病[1]，也是导 致猪繁殖障碍的主要疾病之一。蚊虫是该病的传播媒介，呈明显的季节性流行。猪是该病的扩散宿主，乙型脑炎病毒可通过蚊虫叮咬传染给人。猪感染本病后，母猪主要表现为死胎，公猪主要表现为急性睾丸炎，肥育猪主要表现为持续高热，仔猪主要表现为脑炎。该病毒还可引起人的神经系统疾病，对人类健康和养殖业均可造成较大威胁[2]。

猪场对猪乙型脑炎的预防，主要是采取加强饲养管理、检疫、隔离、消毒等措施，最主要的预防措施是注射乙型脑炎疫苗[3]，目前临床 上普遍采用的是猪乙型脑炎减毒活疫苗和鼠脑灭活疫苗。为了解猪 JE 疫苗的免疫效果，2016 年 9 月，将两个厂家生产的弱毒活疫苗及湖北省农业科学院畜牧兽医研究所实验室自制的灭活疫苗在湖北某猪场进行了免疫试验，采集免疫后血清检测抗体水平，并以此评价猪 JE 疫苗的免疫效果，以期为临床预防该病提供参考。

1 材料与方法

1.1 试剂

1.2 疫苗

A、B 两种猪 JE 疫苗，分别来自国内两个疫苗生产企业，两种疫苗均为弱毒疫苗，且均在有效期内，并按说明书要求进行保存和使用。C 疫苗为实验室自制灭活疫苗。

1.3 试验动物及分组

在湖北某规模化猪场选择乙型脑炎阴性健康猪80 头，体重均为 20 kg 左右（55～60 日龄），分组时尽量考虑性别的平均分配。

将 80 头 JE 抗体阴性猪分成 4 组，每组 20 头，分别为疫苗 A 免疫组、疫苗 B 免疫组、疫苗 C 免疫组和空白对照组。按场里管理要求，免疫接种猪瘟、伪狂犬病等疫苗，常规饲养管理。

1.4 免疫程序

试验猪于 55～60 日龄免疫 1 次，疫苗接种剂量均为 1 头份/头，免疫途径为颈部肌肉注射。

1.5 血样的采集及处理

从疫苗免疫后开始，每隔7 d对试验猪进行采血，5mL/头，共采血 7 次。全血送至实验室后采用离心方法分离血清，并将血清保存于-20 ℃冰箱中，备用。

为安排好学员的学习、工作与生活，河北省图书馆在学员到馆之前电话联系到每一位学员，了解每个人在受援单位的专业背景、工作岗位、培训需求，并根据实际情况，为每个学员预先安排首个培训岗。

1.6 抗体检测

用武汉科前生物股份有限公司生产的猪 JE 抗体 ELISA 检测试剂盒对所有血清样品进行抗体检测，操作方法参照试剂盒说明书进行。样品乙型脑炎抗体判定标准：S/P 值≥0.21 为阳性，S/P 值＜0.21为阴性。

2 结果

对不同免疫组、空白对照组在免疫后不同阶段的血清进行 JE 抗体检测，免疫后 1 周，疫苗免疫组开始有少量猪只转阳；免疫后 3 周，抗体阳性率均达到80%以上；免疫后 4～7 周，抗体阳性率在 85%～100%；抗体阳性率为逐渐上升趋势。空白对照组在第 5～7周，抗体阳性率在 25%～20%。结果见表 1 和图 1。

表1 猪JE疫苗免疫组与空白对照组血清抗体检测

图1 猪JE疫苗免疫组与空白对照组抗体阳性率比较

3 小结与讨论

猪是 JEV 最重要的传染源、储存宿主和扩大器[4]。猪在感染 JEV 后病毒血症维持时间较长，而且猪感染后一般不出现脑炎症状，而种猪感染后的症状主要为流产、死胎等。随着猪的饲养量日渐增多，并且猪群每年的更新速度很快，而新生仔猪由于母源抗体的消失，同时在未进行疫苗免疫接种的情况下，对JEV 十分易感，可由携带 JEV 的蚊虫叮咬后发生感染从而成为新的传染源[5]。

通过对 A、B 弱毒苗免疫组和空白对照组 JE 抗体阳性率的比较分析发现，两个弱毒苗免疫组在免疫后 4 周抗体水平均可达到 90%以上，并可维持到7 周以上。A、B 两种疫苗均为 SA14-14-2 毒株的弱毒苗，表明两个厂家生产的 JE 疫苗，在免疫效果上无明显差异。

C疫苗组为灭活疫苗组，在免疫后4周抗体水平达到 85%，5 周后抗体水平均可达到 90%以上，也可维持到 7 周以上。与 A、B 弱毒苗免疫组相比，免疫效果上也无明显差异。

另外，在本试验过程中还发现，空白对照组在第5周后出现了抗体转为阳性的情况，出现这种情况的原因有可能是本次试验选用的疫苗中有弱毒苗，各试验组之间只是相对分栏，但还是饲养在一栋栏舍内，疫苗毒有可能通过蚊虫叮咬而传染给其他栏舍内的猪；其次，由于检测抗体所用的 ELISA 试剂盒无法区分疫苗毒和野毒，也无法排除有可能是野毒感染后而产生的抗体。

通过本次试验，显示弱毒疫苗与灭活疫苗在免疫效果上无明显差异，表明乙型脑炎疫苗对猪进行免疫接种后，均可达到较理想的免疫效果，说明乙型脑炎疫苗的预防接种仍然是现阶段防控乙型脑炎最有效的预防措施之一。因此，对于乙型脑炎的防控，首先要做好免疫预防，在此前提下，还要切实做到加强饲养管理，做好环境消毒、灭蚊等生物安全工作，才能防止本病的发生。

[1] 殷震，刘景华.动物病毒学[M].2 版.北京：科学出版社，1997：470-473.

[2] 段正赢，周丹娜，郭锐，等.浅谈猪乙型脑炎的防治[J].湖北畜牧兽医，2015，36（8）：25-26.

[3] 刘刚.猪乙型脑炎抗体检测试验[J].黑龙江畜牧兽医，2014（1）：66-67.

[4] 陈孝明，亓文宝，张桂红，等.广东省部分规模化猪场乙脑抗体的监测与分析[J].广东农业科学，2010（9）：154-155.

[5] 张海明，薛红，段晓冬，等.猪流行性乙型脑炎免疫抗体消长规律的研究[J].黑龙江畜牧兽医，2013（9）：109-112.

（编辑：郭玉翠）

睡觉缓解慢性疼痛好于镇痛药

【埃菲社伦敦 5 月 8 日电】题：多睡觉或摄入咖啡因缓解慢性疼痛效果好于镇痛药

英国《自然》周刊刊登的一篇新研究报告显示，多睡觉或摄入含咖啡因等提神成分的食物，可以明显缓解慢性疼痛，其效果要好于布洛芬、吗啡等镇痛药。

波士顿儿童医院和哈佛大学医学院联合进行的一项研究通过在小鼠身上的实验，对重度或慢性睡眠不足与对疼痛刺激敏感度之间的关联进行了分析和评估。

睡眠医学专家克洛艾·亚历山大博士介绍说，研究人员用玩具、游戏等娱乐活动对小鼠进行了睡眠剥夺，以此模拟那些用夜间睡眠时间看电视的人的生理状况。然后，研究人员又对这些小鼠对疼痛刺激的敏感度进行了评估和测定，这些刺激来自一定程度的热、冷、挤压以及辣椒素。研究人员记录了小鼠对每一种疼痛刺激的反应时间。

亚历山大说：“我们发现，连续 5 天的适度睡眠剥夺会显著加剧健康小鼠对疼痛的敏感度。”而令人惊讶的是，布洛芬、吗啡等常用镇痛药并不能抑制由睡眠剥夺导致的疼痛敏感度提升。而实验表明，咖啡因、莫达非尼等觉醒促进剂则可以在小鼠身上有效抑制睡眠剥夺导致的疼痛敏感度提升。

亚历山大表示，这一研究发现提供了一种以前不为人知的新镇痛机制，这种机制取决于承受疼痛的动物的生理状况。许多患者陷于疼痛与睡眠不足的恶性循环之中，而咖啡因等觉醒促进剂可以打破这种恶性循环，发挥镇痛药无法达到的效果。

（转自 参考消息[N]，2017-05-10）

S858.285.3

A

1002-1957(2017)03-0095-02

2017-04-17

湖北省农业科技创新中心项目（2017-620-000-001-026）；动物胚胎工程及分子育种湖北省重点实验室开放课题（2017ZD159）

段正赢（1970-），男，湖北钟祥人，高级兽医师，主要从事家畜传染病研究工作.E-mail：dzy2030@126.com

田永祥（1965-），男，湖北武汉人，研究员，主要从事家畜传染病研究工作.E-mail：tyxanbit@163.com