斜面包埋手法在组织石蜡包埋中的运用及体会

杨 洋，于 洁，潘成然，张宪菊，郭 琳，陈忠政，季昌华

斜面包埋手法在组织石蜡包埋中的运用及体会

杨 洋，于 洁，潘成然，张宪菊，郭 琳，陈忠政，季昌华

病理技术；石蜡包埋；包埋平整；组织制片

石蜡包埋法是目前病理科最常用的组织包埋方法之一[1]，日常工作中，受组织结构及取材等多因素影响，一个脱水盒中需放置多块组织，在石蜡包埋时，多块组织面难以保证在同一包埋面上，不仅导致组织切片切面不全，影响诊断，而且反复深切或重切，会造成局部病变组织缺失、延误诊断等严重后果。实践工作中，我们运用斜面包埋手法，较好地解决了多块数、多层次类组织包埋的平整度，有效避免因包埋导致的切片不全，现将斜面手法应用在石蜡包埋中及注意事项总结如下。

1 材料与方法

1.1 材料 常规选取内镜下黏膜剥离标本、肠类管腔样组织标本、各种囊壁样组织标本、乳腺麦默通微创标本、钬激光前列腺剜除术标本、细针穿刺标本等，所有标本均经规范化取材、脱水、浸蜡处理待包埋。

1.2 方法 (1)注蜡：金属包埋模具先接2/3体积的已溶石蜡，太少不宜控制石蜡凝固时间，太多微倾时溢出。(2)模具斜面制作(图1)：包埋模具微倾置小冷台，另一侧微微翘起，倾角控制在5～10°间，形成斜面提供一个石蜡逐步凝固的环境过程[2]。(3)组织放入(图2)：待包埋组织按包埋面沿先接触冷台的一侧依次放入组织，使组织在石蜡未凝固前已放入，微凝固时固定包埋位置，凝固后包埋镊离开并依次放入后续组织。(4)盖脱水盒底座：包埋完成后，放平包埋模具，将脱水盒底座盖一端入包埋模具上，缓缓放平赶出两者间的气泡后再一次灌注适当石蜡，再次灌注体积最好为脱水盒底座体积的1/3，保证组织脱水盒和石蜡的紧实度。(5)成型分离：移至大冷台，带石蜡凝固后将蜡块于包埋模具分离。斜面手法石蜡包埋过程中，在室温下，冷台温度-10～0 ℃，整个模具凝固过程在10～15 s，依此时间决定包埋速度；成型蜡块脱离模具时请勿机械强行分离，易造成局部包埋面断裂，增加制片难度。

①②

图1 模具斜面制作 图2 组织的放入

2 结果

标本经规范化固定、取材、脱水、浸蜡处理后，在常规石蜡包埋中，同一包埋盒内的各块组织间包埋面平整度难以确保，切片显示组织结构不全(图3)，影响诊断医师做出全面准确的诊断；应用斜面包埋手法进行石蜡包埋问题得以解决，便于病理技术组能够切出组织层次结构完整的优良切片(图4)，利于诊断医师判读的准确度。

3 讨论

组织包埋是病理技术基本工作；杂乱无序包埋的组织，不仅导致切片显示不全、影响病理诊断，而且影响后续免疫组化、原位杂交、荧光原位杂交等后续检查。

病理组织标本取材时，若为长条形标本，每个脱水盒放入组织应不超过4条，以提高工作效率。若单条组织处理虽能保障包埋质量，但取材数量太多，对组织复原不便，增加工作量。包埋应按相同方向打开脱水盒、相同次序放入组织，组织若菲薄，应按相同方向翻转90°后组织竖立包埋[3]、盖入脱水盒底座时按同样的方向，以确保制片一致，组织层次及复原图能够与之对应，便于确定组织结构和测量相应区域面积等。组织间紧密平行集中排列包埋，便于制片，为后续如免疫组化、原位杂交、荧光原位杂交等实验技术制片节约试剂，利于制出质优价廉的成品切片。取材的厚度应在2～3 mm，若为囊壁或黏膜剥离样标本取材宽度应为2～3 mm，太薄时组织容易弯曲变形、影响组织结构、难以顺利包埋；太厚时组织处理不佳、影响制片。

③④

图3 常规包埋法包埋制出的切片

图4 斜面包埋手法包埋制出的切片

内镜下黏膜剥离标本、肠类管腔样组织标本、各种囊壁样组织标本，组织取材时切面尽量平整，若组织特别薄时可借助包埋用薄海绵固定取材组织，以防止组织变形，固定组织学相对位置，黏膜组织面应方向一致，以保证组织学信息及组织平整度和方向性。

乳腺麦默通微创标本，取材时选取适量质韧标本放于一脱水盒内，含脂肪多的穿刺条应放于一脱水盒内，标本沿长轴放入包埋模具中，组织间紧密平行排列包埋，横径菲薄的组织应竖立包埋，若含有脂肪较多的组织应将脂肪部分尽量放于模具的边缘位置。

前列腺钬激光剜除标本，取材的标本每个脱水盒放置不要超过脱水盒体积的2/3，集中紧密排列后，逐步随石蜡凝固用包埋镊轻轻按压剩余组织以确保在同一包埋面上。

细针穿刺标本取材时应用包埋纸包裹，防止组织丢失，便于组织直立不弯曲。包埋时应按长轴平行于模具中间处，待底层石蜡稍凝时用包埋镊轻轻快速沿组织一端轻压至另一端，确保组织在同一包埋面。

利用斜面手法进行包埋多块数、多层次类组织标本可有效避免因组织包埋面不平而导致的切面不全，完整的病理切片大大提高诊断医师判读准确性。

[1] 王德田, 董建强. 实用现代病理学技术[M]. 北京：中国协和医科大学出版社, 2012:39-45.

[2] 杨京彦，管冰心，王海涛，等. 胃ESD标本的病理取材及切片制作方法[J]. 临床与实验病理学杂志, 2015,31(8):939-940.

[3] 丁 伟, 王德田. 简明病理学技术[M]. 杭州：浙江科学技术出版社, 2014:16-18.

时间：2017-3-16 14:23

http://kns.cnki.net/kcms/detail/34.1073.R.20170316.1423.032.html

山东大学第二医院病理科，济南 250033

杨 洋，男，技士。Tel:(0531)85875340，E-mail: sddxdeyyblkyy@163.com 季昌华，女，技师，通讯作者。E-mail: changhuaji100@163.com

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1001-7399(2017)03-0346-02

10.13315/j.cnki.cjcep.2017.03.032

接受日期：2017-01-20