尿液分析仪检测尿蛋白与尿微量白蛋白结果分析探讨

宋瑞英

山东青岛胶州市北关街道办事处卫生院检验科，山东青岛 266300

尿液分析仪检测尿蛋白与尿微量白蛋白结果分析探讨

宋瑞英

山东青岛胶州市北关街道办事处卫生院检验科，山东青岛 266300

目的 通过尿液分析仪检测尿蛋白与尿微量白蛋白(MAU)结果的比较,了解尿液分析仪检测尿蛋白的准确性、局限性及影响因素。方法 对235份新鲜尿液标本分别进行尿蛋白干化学检测和免疫荧光分析仪尿微量白蛋白定量检测。结果 在尿液干化学法检测尿蛋白 （-）的130份标本中,有36份检测到＞20 mg/L的尿微量白蛋白，呈假阴性（27.7%）；45份尿蛋白（±）标本中36份尿微量白蛋白呈阳性（80.0%）,9份呈假阳性（20.0%）。结论 干化学法测定尿蛋白因灵敏性差及干扰因素较多,其准确性受到一定限制,需做好尿检质量控制,避免漏诊误诊；尿微量白蛋白检测具有灵敏度高、特异性强、测定结果较为准确等优点,在糖尿病肾病,高血压肾病等疾病的早期诊断中更具有临床价值。

尿液分析仪；尿蛋白；尿微量白蛋白；影响因素

目前尿液分析仪已广泛应用于各级医疗单位,用其检测尿蛋白,费用低廉，操作简便,结果迅速,已成为临床的常规检测方法[1]。但因其敏感性差,干扰因素多,只能作为一种过筛试验。而免疫荧光分析仪检测尿微量白蛋白(MAU)具有特异性强,灵敏度高,可准确定量等优点,弥补了这方面的不足。该文用尿液分析仪检测尿蛋白的同时,采用免疫荧光检测仪检测尿 MAU,以两者含量之差异作为研究的切入点,结果分析如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择235例住院患者,其中男110例,女125例。年龄35～85岁,平均59岁。同时记录有关患者资料(患者病情,临床用药等)。

1.2 仪器和试剂

尿蛋白检测采用URIT-180型尿液分析仪,配套URIT-11A试纸条。尿微量白蛋白(MAU)检测使用WF-0901/型免疫荧光检测仪及公司配套试剂盒。

1.3 方法

患者留取中段晨尿10 mL,盛置于干净的容器中,及时送检,将URIT-11A试纸条放在尿液中10 s取出,放在卫生纸上沥干多余液体,用尿液分析仪测尿蛋白。同一份标本用TopPette移液器准确吸取75 μL,滴加到尿微量蛋白检测卡的加样孔中,室温放置3 min,插入免疫荧光检测仪中测试。

2 结果

以MAU＞20 mg/L视为阳性，从表格中可以看出,用尿液分析仪干化学法检测的这批标本,在尿中含有大量白蛋白（++～+++）时，与免疫荧光分析仪测定尿微量白蛋白结果相符,而蛋白含量相对较少时出现了假阳性和假阴性的情况：尿蛋白（-）的130份标本中,36份检测到＞20 mg/L的尿微量白蛋白,即36例假阴性（27.7%）；45份尿蛋白 （±）标本中仅36份尿微量白蛋白呈阳性（80.0%），即9份假阳性（20.0%）；32份尿蛋白（+）标本中31份尿微量白蛋白呈阳性,有1份假阳性（3.1%）。结果见表1。

表1 尿液分析仪检测尿蛋白和尿微量白蛋白检测结果比较

3 讨论

尿液分析仪检测尿蛋白是采用指示剂的蛋白误差原理,即蛋白质模块中主要含有酸碱指示剂溴酚蓝、柠檬酸缓冲系统和表面活性剂。在pH为3.2时溴酚蓝产生出阴离子,与蛋白携带的阳离子（主要是清蛋白）结合发生颜色变化而产生半定量。这种颜色变化的幅度与蛋白含量呈正比。试纸只对白蛋白敏感,对球蛋白等其它蛋白敏感性差,对血红蛋白、肌红蛋白、黏蛋白等蛋白一般不呈阳性反应,只能作为一种过筛试验[2]。

该实验检测尿微量白蛋白（MAU）所用万孚免疫荧光检测仪,是基于免疫荧光定量技术、干化学层析技术和激光诱导技术原理进行检测的仪器。MAU检测试剂预先在硝酸纤维素膜上包被荧光标记鼠抗白蛋白单克隆抗体,和尿液中的白蛋白抗原形成复合物,在层析作用下,反应复合物沿硝酸纤维素膜向前移动被检测区的单克隆抗体捕获,尿液样本中的白蛋白越多,检测区上的复合物集聚越多，荧光抗体的信号强度反映了被捕获的白蛋白数量。万孚检测仪可根据荧光强度的大小自动检测计算出样本中白蛋白的浓度。此方法特异性强,灵敏度高,可准确定量尿液中的微量白蛋白含量。

鉴于尿液分析仪检测尿蛋白与尿微量白蛋白检测原理的不同,两者的灵敏度也不同,尿液分析仪检测尿蛋白的灵敏度为150 mg/L,而荧光免疫分析仪尿微量白蛋白检测的灵敏度为5 mg/L,因此,尿微量白蛋白检测的准确性远高于尿液分析仪,从检测结果观察随着尿蛋白含量的增加,在尿蛋白（++）、（+++）的标本与尿微量白蛋白测定完全相符,两种结果的符合率为100.0%。但在尿液干化学检测尿蛋白（-）的130份标本中,有36份检测到＞20 mg/L的尿微量白蛋白,假阴性达27.7%,即尿液分析仪漏诊率达27.7%。该文中45份尿蛋白（±）的标本,有9份假阳性（20.0%）,32份尿蛋白（+）标本中,有1份假阳性（3.1%）。出现这种情况主要原因除两者灵敏度不同外,还因为尿液分析仪检测尿蛋白还受其他因素的影响[3]。

假阴性:①根据干化学法检测尿蛋白的原理,试纸只对白蛋白敏感,对球蛋白其他蛋白敏感性差,对血红蛋白、肌红蛋白、黏蛋白等蛋白一般不呈阳性反应,可影响对一些疾病的检出,如多发性骨髓瘤患者排出的本周蛋白尿（实质为免疫球蛋白轻链或其聚合体）、溶血性疾病所致的血红蛋白尿、大面积肌肉创伤或炎症时的肌红蛋白尿、单核细胞白血病时的溶菌酶蛋白尿等。②强酸性尿液：尿液pH＜4时,则抑制蛋白与染料呈色反应,故而尿蛋白的敏感性大为降低,造成假阴性需要稀碱来校正pH为5～7后,再测定尿蛋白。③试剂带浸入尿液不足,量不够,致使反应不完全,可使尿蛋白偏低。④输注大剂量青霉素,在一定的时间内(2～6 h),尿液分析仪测定尿蛋白易出现假阴性由于这些标本来自住院患者,其用药多此类病例,需在输注青霉素6 h以后,再留取标本进行检测[4]。

假阳性：①患者服用奎宁和磺胺嘧啶等药物引起的碱性尿液（pH＞9.0）时,试带染色的电离度增大,碱离子浓度增加出现与尿蛋白一样的兰色,造成假阳性。应尽量避免在服用有干扰作用药物后不久留取标本。②青霉素、氨苄青霉素的干扰：由于与染料结合,使其在尿液浓缩引起假阳性。③尿路感染的尿液使尿液蛋白呈阳性。④胆红素呈强阳性的尿液：当尿胆红素（+++）时,蛋白也呈阳性。⑤另外一些可致假阳性的因素如高比重尿,试纸条如浸尿过多将缓冲剂冲脱也可致假阳性[5]。

4 结论

血液中有一定量的蛋白质存在,一部分的蛋白质在随血液经过肾脏时被过滤至尿液中,随后又在肾小管处被重吸收而进入血液。但是当肾脏或者输尿管出现病变时就会透过更多的蛋白质,超出了肾小管的吸收能力,从而形成蛋白尿。人体正常代谢情况下,尿中的白蛋白极少,具体到每升尿白蛋白不超过20 mg（＜20 mg/L）。尿分析仪法测尿蛋白远不及尿微量蛋白检测敏感,糖尿病肾病,高血压肾病发病隐匿,初始浓度低,受灵敏度限制尿常规检测蛋白的显示为阴性（-）或（+-）,而MAU的测量正可以弥补这一缺陷。此时经过规范的治疗,可修复肾单位消除蛋白尿,故早期发现诊断,对于肾病的预防及早期治疗都起的了积极作用。避免尿蛋白检测阳性时,患者肾脏已经进入不可逆的损伤期。不仅如此尿 微量白蛋白还对高血压和心血管疾病的进展、预测、治疗效果评价等具有重要参考价值[6]。

综上所述,尿MAU的检测具有特异性强,灵敏度高,可准确定量等特点,在怀疑有早期肾损伤时,检测尿微量蛋白比尿蛋白更有临床意义。尿液分析仪检测尿蛋白只是一个半定量分析方法,如果将检查结果误认为是尿蛋白定量结果,就会影响到临床医生对患者疾病的分析和判断,以致造成误诊或漏诊。

[1]范世珍,陈安彬,林松青.尿微量白蛋白在高血压和糖尿病肾病早期诊断中意义[J].临床研究杂志,2013,2（10）：35-36.

[2]丛玉隆,王淑娟.今日临床检验学[M].北京:中国科学技术出版社,1997：236.

[3]胥伯如.尿液分析仪检验尿蛋白与尿微量蛋白结果分析[J].中国药物经济学杂志,2013,11（8）：292-293.

[4]丛玉隆，陈建良.大剂量青霉素中尿蛋白定性结果的探讨[J].中华医学检验杂志,1994,17(3):167.

[5]桂满元,黄成文，两种尿蛋白测定方法的比较[J].检验医学与临床杂志，2007,1（4）：34-35.

[6]胥凤,赵敏,尿微量白蛋白的检测及临床意义[J].西藏医药杂志,2005,26(4):85.

R446.1

A

1672-5654（2017）02（c）-0048-02

2016-11-24）

宋瑞英（1974.4-），女，山东青岛人，本科，主管技师，研究方向：尿蛋白和尿微量白蛋白在临床中的诊断价值。

10.16659/j.cnki.1672-5654.2017.06.048