CD117在乳腺柱状细胞病变和导管增生性病变中的表达变化及意义

胡锦涛，成志强，周冬仙，彭全洲，左敏，王晓玫(深圳市人民医院，广东深圳 518020)



CD117在乳腺柱状细胞病变和导管增生性病变中的表达变化及意义

胡锦涛，成志强，周冬仙，彭全洲，左敏，王晓玫
(深圳市人民医院，广东深圳 518020)

目的 观察CD117在乳腺柱状细胞病变(CCLs)及导管增生性病变中的表达变化，并探讨其意义。方法 收集53例乳腺CCLs患者(意义未明组)，20例乳腺导管内普通型增生(UDH)患者(非肿瘤组)，43例乳腺导管上皮不典型增生(ADH)及导管原位癌(DCIS)患者(肿瘤组)，采用免疫组化法检测各组中CD117及ER表达，采用χ2检验分析组间表达差异，Spearman法分析两者表达相关性。结果 CD117在意义未明组CCLs中阳性表达率为17%(9/53)，非肿瘤组UDH中阳性表达率为85%(17/20)，两组比较差异有统计学意义(χ2=29.297，P<0.001)；CD117在肿瘤组(ADH&DCIS)中阳性表达率为9.3%(4/43)，两组比较差异无统计学意义(χ2=1.196，P=0.373)。CD117在乳腺增生性病变中表达与ER表达呈负相关性(r=-0.825，P<0.001)。结论 CD117在乳腺UDH中呈阳性表达，在CCLs、ADH及ER阳性DCIS中呈较高缺失性表达；CD117在乳腺增生性病变中表达与ER表达呈负相关，CCLs可能是显微镜下可辨识的最早期乳腺ER阳性肿瘤性转化的癌前病变。

乳腺柱状细胞病变;乳腺癌；癌前病变;CD117

乳腺柱状细胞病变(CCLs)是发生于乳腺终末导管小叶单位的病变，其特征是被覆柱状上皮细胞的腺泡增大伴不同程度的扩张。该病变是最常见的乳腺导管原位癌及浸润性癌的伴随性病变[1]，亦称盲管型腺病、增生性小叶单位扩大、低级别贴壁型导管原位癌等[2]。2012年WHO乳腺肿瘤分册将CCLs分为柱状细胞变(CCC)、柱状细胞增生(CCH)、伴不典型增生的柱状细胞变/增生(等同于乳腺平坦上皮不典型增生，FEA)，并同乳腺导管普通型增生(UDH)、非典型增生(ADH)及导管原位癌一同归类为乳腺导管增生性病变中。CCLs多被认为是乳腺导管上皮的一种特殊类型的化生性病变，其原因和意义尚不明确。由于乳腺钼靶影像学应用于乳腺疾病的早期筛查，常伴有微小钙化的CCLs诊断越来越常见而备受重视[3]。原癌基因CD117在人类多种肿瘤中均起到重要作用，其在正常乳腺导管上皮呈包膜和胞质的阳性表达，在管腔A型乳腺癌中有较高比率表达缺失，该基因的表达缺失可能在ER阳性乳腺管腔A型肿瘤发生过程中起到一定作用。本研究通过观察CD117在CCLs及UDH、ADH和DCIS中的表达差异，探讨CCLs及CD117缺失表达在乳腺导管增生性病变中的意义。

1 资料与方法

1.1 临床资料 收集本院病理科2014年2月～2015年12月乳腺增生性病变患者116例，均为女性，年龄28～67岁，中位年龄45岁。将全部观察样本分为意义未明组、非肿瘤组和肿瘤组三组。其中意义未名组由53例CCLs患者组成，包括CCC 21例(穿刺标本15例，手术切除标本6例)，CCH 16例(穿刺标本10例，手术切除标本6例)，FEA 16例(均为手术切除标本)。非肿瘤组由20例UDH患者组成，均为手术标本。肿瘤组由18例ADH患者及25例导管原位癌(DCIS)患者组成，均为手术样本。病例均由两名有经验的病理高年资医生重新阅片，标本均经中性甲醛固定、常规脱水、石蜡包埋、4 μm厚切片、HE染色。

1.2 ER、CD117表达检测 每个病例所选蜡块进行连续的 4 μm厚切片，常规HE染色及免疫组化染色。一抗鼠抗人单克隆抗体包括ER及CD117，均购自于福州迈新生物技术开发公司。免疫组化采用En Vision两步法染色，高压修复抗原，DAB显色。选取正常乳腺组织(手术切除标本为内对照)及胃肠道间质瘤病理切片做阳性对照。用PBS替代一抗做阴性对照。结果判定:ER表达为细胞核阳性，计数阳性细胞百分数，并定义50%及以上ER阳性率为ER高表达病例[4]。CD117为细胞膜及细胞质阳性，评分为0～+++。当CD117染色细胞膜及细胞质无着色，评分为0；当着色细胞低于10%的肿瘤细胞时评分+；超过10%而低于30%的计数细胞胞质和/或细胞膜有弱至中等强度阳性染色或超过30%的计数细胞胞质和/或细胞膜有弱阳性，评分为++;超过30%的计数细胞胞质和/或细胞膜有中等至强阳性染色，评分为+++。定义评分++～+++的样本为CD117染色阳性病例[5～7]。

1.3 统计学方法 采用SPSS18.0统计软件。组间比较采用χ2检验，相关性分析采用Spearman等级相关分析法。P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 各组ER表达情况比较 ER在CCC&CCH病例中阳性表达率为40%～90%，柱状细胞形态越典型ER表达率越高。ER在FEA中阳性表达率为70%～95%，无论细胞是否具有柱状细胞的特点，ER均表现出较弥漫的阳性表达。ER在ADH中阳性表达率为75%～95%，阳性细胞表达均一而弥漫，染色强。ER在乳腺UDH中阳性表达率为3%～20%，呈现不均一表达模式；ER在DCIS中的阳性表达率为10%～95%，DCIS病例均为HER2阴性病例。

2.2 各组CD117表达情况比较 在53例乳腺CCLs病例中，存在正常乳腺区域，CD117在乳腺腺泡及乳腺导管均表达阳性。CD117在CCC&CCH病例中阳性率为16.2%，在FEA中表达率为18.8%，3例呈++，未见+++病例；C117在意义未明组中总阳性率为17%(9/53)。CD117在18例ADH中阳性率为5.6%(1/18)，在25例DCIS中阳性率为12%(3/25)；CD117在肿瘤组中总阳性率为9.3%(4/43)，CD117呈较高表达缺失。CD117在意义未明组及肿瘤组中表达无统计学差异(P=0.373)。CD117在非肿瘤组中的阳性率为85.0%(17/20)，与意义未明组比较有统计学差异(P=0.000)。

2.3 ER与CD117的相关性 乳腺增生性病变116例，CD117阳性率为25.9%(30/116)；ER高表达率为72.4%(84/116)。ER高表达率与CD117阳性率在乳腺增生性病变中呈负相关(r=-0.825，P<0.001)。

3 讨论

原癌基因CD117在多种肿瘤中均起到重要作用，文献报道正常乳腺腺泡上皮及导管上皮CD117均呈现包膜及胞质阳性，其表达可能在乳腺上皮细胞分化中起到重要作用[8]。Tsuda等[9]研究表明CD117表达与乳腺高核级及HER2阳性乳腺癌有关，却在ER及PR阳性的乳腺癌中呈阴性表达。据此推断CD117缺失表达可能在ER阳性乳腺非浸润性Luminal A型乳腺肿瘤病变早期肿瘤性转化中起到重要作用。

Tsuura 等[10]研究观察92例乳腺癌中仅1例CD117阳性(1%)，21例正常乳腺标本中14例(67%)CD177阳性。Natali 等[10]观察发现正常乳腺组织100%均一表达CD117；在乳腺纤维囊性乳腺病、纤维腺瘤、导管内乳头状瘤等乳腺良性病变中CD117呈现低或不均一表达，阳性率为78%；CD117在原发乳腺癌及转移性乳腺癌中阳性率分别是13%及3%。本研究观察发现CD117在正常乳腺组织中均呈现细胞膜及胞质的弥漫阳性，与多数文献报道一致[12]。CD117在意义未明组中阳性率为17%(9/53)，非肿瘤组中阳性率为85%(17/20)，两组比较差异有统计学意义；CD117在肿瘤组中阳性率为9.3%(4/43)，与意义未明组比较差异无统计学意义。CD117在85%(17/20)UDH中均超过30%的细胞中等或强细胞膜及胞质阳性，达到本研究所定义的阳性表达标准。CD117在乳腺良性病变中阳性率较高[13]，但其在UDH中的表达和诊断价值尚未检索到相关文献资料。就本研究20例样本的镜下观察，CD117在UDH中并非100%细胞表达，而是表达在ER阴性的细胞，与p63及CK5/6在部分实验组样本的回顾性观察中，推测UDH中CD117阳性的细胞为中间腺上皮或中间肌上皮细胞。CD117在乳腺UDH中的弥漫表达对乳腺UDH的诊断有重要价值，可作为辅助诊断指标。因CD117在正常乳腺中均弥漫表达，此结果证实了乳腺UDH应是一组乳腺导管上皮的反应性增生性病变，而并非真正的肿瘤性病变。

目前的主流乳腺病理学观点认为FEA(伴有非典型性CCC&CCH)与乳腺ADH具有相似的细胞学形态；乳腺ADH与ER阳性低级别DCIS只有量的不同均为肿瘤性病变。而CCLs病变意义并不明确，甚至该组病变是否与乳腺ADH及ER阳性低级别DCIS存在谱系递进关系尚存在争议[14]。原癌基因CD117在正常乳腺导管上皮呈现均一细胞膜及胞质的阳性表达，其在管腔A型乳腺癌中常呈缺失表达，可能在ER阳性肿瘤癌变过程中有一定作用。本研究表明CD117在CCLs中表达明显减少或丢失，其阳性率与非肿瘤组对比差异有统计学意义，与肿瘤组对比无统计学差异。这说明CD117表达缺失应是管腔A型乳腺肿瘤性转化的早期事件，CCLs应是ER阳性乳腺肿瘤性转化的早期病变，CCLs、ADH及DCIS(ER阳性，HER2阴性型)构成了一个管腔A型乳腺肿瘤转化的完整递进谱系。CCLs可能是乳腺导管上皮发生肿瘤性转化显微镜下可辨识的最早期组织学改变。本实验研究的肿瘤组中20例DCIS中3例CD117阳性，重新阅片后该3例样本均为ER低表达病例(ER<20%阳性)，并均为高级别的导管内癌。有研究显示ER低表达HER2阴性乳腺癌并非ER阳性管腔A型肿瘤，PAM50基因检测发现该类肿瘤大多为基底细胞亚型乳腺癌。CD117能否作为管腔A乳腺肿瘤再分类的指标，还需要更多肿瘤性样本的观察研究。

相对于乳腺浸润性癌的研究[15]，乳腺癌前病变研究资料相对较少，乳腺上皮内瘤变的概念亦未被广大学者所认同[16]。Abdel-Fatah等[17]提出乳腺低级别核肿瘤性病变家族的概念，认为乳腺CCLs、低级别导管原位癌、小叶内瘤变与乳腺低级别核浸润性癌是一个连续发展的谱系。本研究结果显示CD117在乳腺CCLs、ADH、DCIS(ER阳性，HER2阴性)中呈明显的减弱表达至缺失表达，支持Luminal A型乳腺低级别肿瘤可能是一组连续发展的病变，但CD117表达缺失的具体机制有待于更多分子生物学研究。

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深圳市科技计划资助项目(JCYJ20140416122811941)。

王晓玫(E-mail：huqiuhan@126.com)

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2017-03-28)