维生素D受体和稽留流产的免疫相关性

苏贞文+姜艳华+黄红丽+杨恒

【摘要】 目的 探討维生素D受体和稽留流产的免疫相关性。方法 选取65例因稽留流产住院的孕妇作为观察组， 选取65例非正常分娩流产的孕妇作为对照组， 比较两组患者血清维生素D受体水平、细胞因子水平及细胞免疫等之间的差异， 分析维生素D受体的免疫相关性。结果 观察组患者维生素D受体含量、细胞免疫CD8+水平明显低于对照组， 细胞免疫CD4+、CD4+/CD8+水平均高于对照组， 差异均有统计学意义（P<0.05）。观察组干扰素-γ（IFN-γ）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-4（IL-4）、白细胞介素-10（IL-10）水平分别为（52.22±2.85）ng/L、（62.34±3.96）pg/ml、（65.34±4.86）ng/L、（22.52± 1.67）ng/L， 对照组分别为（29.23±1.93）ng/L、（33.24±2.73）pg/ml、（115.42±3.63）ng/L、（39.34±1.43）ng/L；观察组细胞因子IFN-γ、TNF-α水平高于对照组， IL-4、IL-10水平低于对照组， 差异均有统计学意义（P<0.05）。维生素D受体水平与细胞免疫（CD4+、CD4+/CD8+）、细胞因子Th1（IFN-γ、TNF-α）水平呈负相关（P<0.05）， 与细胞免疫（CD8+）、细胞因子Th2（IL-4、IL-10）水平呈正相关（P<0.05）。结论 维生素D受体缺乏容易出现稽留流产， Th1/Th2细胞向Th1偏移， 且维生素D受体含量与Th1、Th2细胞因子存在良好的相关性。

【关键词】 维生素D受体；稽留流产；细胞因子；胚胎

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2017.04.017

【Abstract】 Objective To explore the immuno-correlation of vitamin D receptor and missed abortion. Methods A total of 65 hospitalization maternal women due to missed abortion were selected as observation group， and 65 maternal women with abnormal birth abortion were selected as control group. Comparison were made on serum vitamin D receptor level， cytokine levels and immune cells difference， so as to analyze the immuno-correlation of vitamin D receptor. Results The observation group had obviously lower vitamin D receptor volume， cellular immune CD8+ level than those of the control group， higher cellular immune CD4+， CD4+/CD8+ level than those of the control group， and their difference had statistical significance （P<0.05）. The observation group had interferon-γ （IFN-γ）， tumor necrosis factor-α （TNF-α）， interleukin-4 （IL-4）， and interleukin-10 （IL-10） levels respectively as （52.22±2.85） ng/L， （62.34±3.96） pg/ml， （65.34±4.86） ng/L and （22.52±1.67） ng/L， which were respectively （29.23±1.93） ng/L， （33.24±2.73） pg/ml， （115.42±3.63） ng/L and （39.34±1.43） ng/L in the control group. The observation group had higher cytokines IFN-γ and TNF-α level than the control group， and lower IL-4 and IL-10 level than the control group. Their differences had statistical significance （P<0.05）. Vitamin D3 receptor level was negatively related to cellular immune （CD4+ and CD4+/CD8+）， cytokines Th1 （IFN-γ and TNF-α） level （P<0.05）， and positively related to cellular immune （CD8+）， cytokines Th2 （IL-4 and IL-10）. Conclusion Lacking of vitamin D receptor is easily prone to missed abortion， shift of Th1/Th2 cells to Th1， and the content of vitamin D receptor and Th1， Th2 cytokines have a good correlation.

【Key words】 Vitamin D receptor； Missed abortion； Cytokines； Embryo

滞留于宫腔内的死亡胚胎或胎儿没有及时自然排出者被称为稽留流产。稽留流产是孕妇一种特殊流产类型， 是孕期常见疾病， 已经成为治疗不孕不育的重要问题[1]。不孕不育专家学者研究认为， 除外在因素和自身染色体异常等因素外， 免疫因素也与产生稽留流产有很大的关系[2]。Th1、Th2 细胞亚型相互制约， 决定着机体细胞免疫与体液免疫间的平衡， 这种平衡一旦打破， 将发生疾病[3]。本研究是通过检测不明原因稽留流产患者及正常早孕孕妇的蜕膜组织中维生素D受体、T淋巴细胞亚群及IFN-γ、IL-4， 探讨维生素D受体与不明原因稽留流产免疫学相关性。为防治稽留流产的发生提供一条新思路。

1 资料与方法

1. 1 一般资料 选取2015年2月～2016年1月在本院因稽留流产住院的65例孕妇作为观察组， 选取同期65例非正常分娩流产的孕妇作为对照组。观察组孕妇年龄23～35岁， 平均年龄（25.34±3.54）岁， 孕次1～3次， 平均孕次（2.57±0.26）次；所有孕妇均检查确诊为稽留流产， 纳入标准[4]：①家族成员中无遗传病史， 染色体均正常；②检查结果排除孕妇有生殖器畸形和其他病变；③有停经史， 妊娠初期怀孕征象逐渐消退；④内分泌检查正常；⑤子宫停止增长， 宫颈口闭合。对照组孕妇年龄24～37岁， 平均年龄（24.25±5.23）岁， 孕次2～4次， 平均孕次（3.12±1.43）次；所有孕妇为10～12周活胎要求非正常分娩人工流产， 纳入标准：既往无遗传、无死胎、无内分泌异常症状、自身免疫性强， 胎儿有心管搏动、超声检查发育正常。两组孕妇年龄、孕次等一般资料比较， 差异无统计学意义（P>0.05）， 具有可比性。

1. 2 方法 禁食12 h后采集15 ml静脉血， 分别完成血清维生素D受体、细胞免疫水平和Th1/Th2 细胞因子含量等检查， 在离心12 min的3500 r/min速度下， 使用高效液相色谱串联质谱仪， 德国原装进口试剂为本次实验主要使用试剂， 严格按照说明书进行操作， 采用酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测维生素D受体水平和测定Th1（IFN-γ、TNF-α）， Th2 （IL-4、IL-10）水平。采用流式细胞法测定细胞免疫指标CD4+、CD8+、CD4+/CD8+等水平。

1. 3 观察指标 观察两组孕妇维生素D受体含量、细胞免疫CD8+、CD4+、CD4+/CD8+水平及细胞因子Th1（IFN-γ、TNF-α）水平和细胞因子Th2（IL-4、IL-10）水平。

1. 4 统计学方法 采用SPSS20.0统计学软件进行数据统计分析。计量资料以均数±标准差（ x-±s） 表示， 采用t检验；计数资料以率（%）表示， 采用χ2检验。稽留流产与血清维生素D受体的免疫相关性采用直线相关分析。P<0.05表示差异具有统计学意义。

2 结果

2. 1 两组患者血清维生素D受体及细胞免疫水平比较 观察组患者维生素D受体含量、细胞免疫CD8+水平明显低于对照组， 细胞免疫CD4+、CD4+/CD8+水平均高于对照组， 差异均有统计学意义（P<0.05）。见表1。

2. 2 两组患者细胞因子Th1/Th2含量比较 观察组IFN-γ、TNF-α、IL-4、IL-10水平分别为（52.22±2.85）ng/L、（62.34±3.96）pg/ml、（65.34±4.86）ng/L、（22.52±1.67）ng/L， 對照组分别为（29.23±1.93）ng/L、（33.24±2.73）pg/ml、（115.42± 3.63）ng/L、（39.34±1.43）ng/L；观察组细胞因子IFN-γ、TNF-α水平高于对照组， IL-4、IL-10水平低于对照组， 差异均有统计学意义（P<0.05）。见表2。

2. 3 稽留流产与血清维生素D受体的免疫相关性 经单因素回归分析， 维生素D受体水平与细胞免疫（CD4+、CD4+/CD8+）、细胞因子Th1（IFN-γ、TNF-α）水平呈负相关（P<0.05）， 与细胞免疫（CD8+）、细胞因子Th2（IL-4、IL-10）水平呈正相关（P<0.05）。见表3。

3 讨论

滞留于宫腔内的死亡胚胎或胎儿没有及时自然排出者被称为稽留流产， 是孕妇一种特殊流产类型， 是孕妇孕期常见疾病， 已经成为治疗不孕不育的典型问题[5-7]。根据经验， 受孕过程中， 母体内胚胎就像半异体移植物这是有父方异性抗体产生的， 免疫应答功能识别胚胎并产生保护性， 直至胎儿分娩[8]。维持妊娠必须保持体液免疫和体内细胞免疫功能的平衡[9]。平衡一旦破坏， 细胞免疫功能将失去作用， 会导致妊娠失败， 造成流产[10]。研究表明， CD4+和CD8+分别是辅助性和抑制性T细胞， 能够一个是增强细胞免疫反应， 一个是抑制细胞免疫反应[11]。本次研究， 主要是通过比较两组患者的T细胞含量结果， 观察组CD4+、CD4+/CD8+水平高于对照组， CD8+水平低于对照组， 差异均有统计学意义（P<0.05）。实验结果证明稽留流产孕妇存在细胞免疫功能亢进。稽留流产的发生同时也与CD4+辅助性T细胞有关， Th1和Th2亚群细胞包含于CD4+ 辅助性T细胞之内， 细胞因子Th1又分为IFN-γ和TNF-α等细胞， 细胞因子Th2又分为IL-4和IL-10等细胞[12-14]。当免疫功能出现问题时， 细胞方向偏移至Th1， 其分泌具有大量毒副作用， 阻碍早期引起稽留流产[15]。本研究结果显示， 观察组细胞因子Th1（IFN-γ、TNF-α）水平高于对照组， 细胞因子Th2（IL-4、IL-10）水平低于对照组， 差异均有统计学意义（P<0.05）。这说明稽留流产孕妇体内的Th1细胞功能增加， 进而引发介导疾病的发生。观察组维生素D受体含量低于对照组， 差异有统计学意义（P<0.05）， 说明孕妇维生素D受体的缺乏会引发稽留流产。本文以维生素D受体为自变量进行了单因素回归分析， 结果显示， 维生素D受体水平与细胞免疫（CD4+、CD4+/CD8+）、细胞因子Th1（IFN-γ、TNF-α）水平呈负相关（P<0.05）， 与细胞免疫（CD8+）、细胞因子Th2（IL-4、IL-10）水平呈正相关（P<0.05）。

综上所述， 维生素D受体缺乏容易稽留流产， Th1/Th2细胞向Th1偏移， 且维生素D受体含量与Th1、Th2细胞因子存在良好的相关性。

参考文献

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