青藤碱对类风湿关节炎细胞因子影响的研究进展

高晨鑫　张湛明　陈继红　岳涛　龚旭鸣

【摘 要】 类风湿关节炎为自身免疫性疾病，有着极高的致残率，且严重影响患者的身心健康。青风藤自古以来作为治疗痹病的常用中药，具有清热镇痛、祛风除湿、活络通经等功效。青藤碱是青风藤的主要有效成分，已广泛应用于临床。就青藤碱在治疗类风湿关节炎的基础研究方面进行简要综述。

【关键词】 关节炎，类风湿；青藤碱；青风藤；细胞因子；综述

类风湿关节炎（rheumatoid arthritis，RA）是一种病因未明的慢性系统性疾病，病理特点是滑膜及血管翳的大量增生，病理过程主要与局部淋巴细胞、巨噬细胞、滑膜细胞等功能改变有关[1]。中医学对RA的认识由来已久，《素问直解》记载：“痹，闭也，血气凝涩不行也。有风寒湿之痹，有皮肌脉筋骨五脏外合之痹；六腑有俞，五脏亦有俞，五脏有合，六腑亦有合，故有五脏六腑之痹。荣卫流行，则不为痹。痹之为病，或痛，或不痛，或不仁，或寒或热，或燥或湿，举而论之，故曰痹论。”认为痹病为机体正气不足，卫外不固，风、寒、湿、热等邪气乘虚而入，致使气血凝滞、经络痹阻所致，故祛邪活络、缓急止痛为本病的治疗原则。而青风藤作为抗风湿的常用药物，《本草纲目》《本草汇言》均对青风藤有所记录，主要概括为祛风湿、通经络、利小便，为散风寒湿痹之药也，可舒筋活血、正骨利髓，故风病软弱无力，并劲强偏废之证，久服常服，大建奇功。青藤碱是从青风藤中提取的一种有效成分，经过现代医学研究，发现该单体主要与以下作用机制相关。

1 对促炎因子的作用

1.1 肿瘤坏死因子-α（TNF-α） TNF-α是RA发病机制中关键的促炎因子，其在RA的发病过程中发挥着重要的作用，主要由单核/巨噬细胞产

生[2]。TNF-α为具有广泛生物活性的多肽调节因子，不仅参与滑膜的增生和炎症反应，而且还参与关节软骨的破坏[3]，可刺激软骨细胞合成白细胞介素（IL）-6与IL-8，产生进一步的炎性反应。TNF-α与IL-6、IL-1β等协同作用，促进破骨细胞的生成，导致骨质的破坏。研究显示，RA患者的血液及滑膜中存在大量的TNF-α，且与RA患者的病情相

关[4]。周彬等[5]用青藤碱联合甲氨蝶呤治疗RA患者60例，采用qRT-PCR方法发现TNF-α水平较治疗前显著下降。牟慧等[6]通过建立大鼠RA模型，采用酶联免疫吸附分析（ELISA）法，比较治疗前后TNF-α水平，发现模型组大鼠体内TNF-α水平较正常组明显增加（P < 0.01），证明青藤碱能抑制RA患者滑膜炎性因子TNF-α的表达。

1.2 IL-1 IL-1主要来自激活的单核/巨噬细胞和上皮与内皮细胞，是炎症反应的介质，可与抗原协同作用，促使CD4+T细胞活化[7]。在RA中，IL-1β为主要参与炎症反应的物质，同TNF-α一样也是RA病程中的重要促炎因子，可通过刺激淋巴细胞释放细胞因子和抗体，进而作用于軟骨细胞和滑膜细胞，使其释放细胞毒素[8]；与TNF-α不同的是，其主要在骨破坏的过程中表现明显[9]。王勇等[10]以健康成人为正常对照组，采用ELISA法，结果与正常对照组比较，RA患者血清中IL-1β水平明显上调（P < 0.01），证明青藤碱可通过抑制RA患者中IL-1β的水平而治疗RA。

1.3 IL-6 IL-6是一种具有多重免疫功能的细胞因子，Th2细胞、单核细胞、血管内皮细胞、成纤维细胞以及某些肿瘤细胞均可产生IL-6。IL-6一度被认为是RA疾病过程中最重要的炎症因子[11]，其主要通过刺激B细胞产生多种炎症介质，参与免疫调节，同时促进T细胞表面IL-2r的表达，增强IL-1和TNF对Th细胞的有丝分裂作用[12]。不过与TNF-α、IL-1不同的是，其不直接参与RA在疾病过程中的滑膜增生过程以及软骨和骨质的破坏[13]，而是一种可以刺激以上两者在RA疾病过程中生物化学效应催化剂，能有效地促进TNF和IL-1诱导的恶病质，刺激破骨细胞活性和角质细胞生长，进而发挥作用[14]。廖德怀等[15]通过动物实验证明，青藤碱能明显下调IL-6的质量浓度，进而推测通过抑制IL-6的表达可能是治疗RA的途径之一。

1.4 IL-17 IL-17是近年来RA研究中十分热门的促炎性细胞因子，主要由CD4记忆T细胞、单核细胞等分泌。有研究发现，IL-17是T细胞诱导的炎症反应的早期启动因子，可以通过促进释放前炎性细胞因子放大炎症反应[16]。IL-17与受体结合后，可通过MAP激酶途径和核转录因子-κB途径发挥生物学作用，在RA患者滑液中发现了IL-17的高表达，并且通过注射IL-17抗体，可有效抑制滑膜的增生[17]。丁从珠等[18]通过建立胶原诱导性关节炎大鼠模型，采用ELISA法对IL-17进行检测发现，与正常组比较，模型组大鼠外周血IL-17水平明显升高（P < 0.05），进而推测青藤碱通过干扰IL-17的表达可能是治疗RA的途径

之一。

2 对抗炎因子的作用

目前，主流的抗炎因子主要有转化生长因子-β（TGF-β）、IL-4、IL-10三类。

2.1 TGF-β TGF-β最初是在大肠杆菌中发现有高表达，其家族由多种细胞产生，该家族成员已有20多个，如TGF-β1、TGF-β2、TGF-β3、TGF-β1β2，

以及骨形成蛋白（BMP）等。近年来研究发现，TGF-β可使正常的成纤维细胞的表型发生改变，从而改变了其在功能形态上的表达[19]，主要体现在抑制具有活性免疫细胞的增殖、改变细胞表型的形态表达、影响淋巴细胞的分化、抑制细胞因子（如TNF-α）的表达、刺激胞外基质蛋白表达、基质蛋白受体和基质修饰酶的合成。现对于青藤碱在TGF-β的表达上尚未有较多报道，不过有报道显示，TGF-β在RA疾病过程中有着双向调节的作用。在RA炎症初期，血清TGF-β1水平升高，起正面调控作用；随着病情进展，在RA活动期，血清TGF-βl以潜在形式入侵到关节滑膜内，定位于局部，血清TGF-βl水平随之下降，使TGF-βl下调，从而发挥负面生物学作用[20]。目前，青藤碱在RA疾病过程中能否对TGF-β或其亚型之间有调控作用，尚有待进一步研究。

2.2 IL-4 IL-4是Th2细胞分泌的细胞因子[21]。有研究表明，其可以激活B细胞和T细胞的增殖，并且使CD4+T细胞分化成Th2细胞；IL-4还刺激内皮细胞分泌CC家族的趋化因子如MCP-1，使得局部IL-4浓度增高；RA发病机制主要是Th1细胞介导的免疫反应[22]，IL-4通过抑制RA滑膜细胞的增殖和前列腺素E2与粒细胞巨噬细胞集落刺激因子的生成，增强单核细胞凋亡，从而降低单核细胞的积累，促进幼稚T细胞向Th2细胞分化，纠正Th1/Th2失衡，进而起到治疗RA的作用。高佩芳等[23]通过给患者服用青藤碱，检测服药前后IL-4的表达水平，结果显示，RA患者服药后IL-4水平升高，差异有统计学意义（P < 0.05）。可得出结论：青藤碱可通过上调IL-4的表达，进而抑制RA疾病过程滑膜增殖和骨破坏，这可能是青藤碱治疗RA的机制之一。

2.3 IL-10 IL-10位于第1号染色体上，具有相当强效的抗炎作用。最初发现，IL-10来源于Th2和单核细胞等[24]，主要存在于RA患者的滑液

中[25]，主要作用机制可能是抑制Th1细胞应答，抑制Mφ的抗原提呈功能以及细胞因子合成，促进B细胞增殖、分化及抗体产生[26]。Rodgers等[27]

通过动物实验发现，上调模型IL-10水平后，RT-PCR检测TNF-α mRNA和IL-1 mRNA浓度均有下降，且差异有统计学意义（P < 0.01）；刘国平等[28]通过文献检索显示，IL-10基因治疗可有效治疗关节炎，进而推测，青藤碱增高IL-10水平可能是治疗RA的机制之一。

3 小 结

RA是常见的、破坏性极大的自身免疫性疾病。随着科学研究的深入，细胞因子在RA疾病发展过程中的机制也不断被发现，但是针对促炎、抗炎因子的相关治疗却未得到较大的开发。中医药在治疗RA方面发挥着独特的优势。《本草便读》记载青风藤言：“凡藤蔓之属，皆可通经入络，此物善治风疾，故一切历节麻痹皆治之，浸酒尤妙，以风气通于肝，故入肝，风胜湿，湿气又通于脾也。”《本草纲目》就认为青风藤可治风湿流注，历节鹤膝，麻痹瘙痒，损伤疮肿等。经过多年的临床研究，青藤碱已有多个药物上市，且取得了相当的疗效成

就；但对于青藤碱在RA疾病过程中的具体作用机制尚不明确，仍有待进一步研究。

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收稿日期：2016-07-04；修回日期：2016-10-07