吴霞,王学法,金鑫
(1 新矿集团莱芜中心医院,山东莱芜 271103;2 济宁医学院附属医院)
急性冠脉综合征患者血浆miR-122和miR-3149表达的临床意义
吴霞1,王学法1,金鑫2
(1 新矿集团莱芜中心医院,山东莱芜 271103;2 济宁医学院附属医院)
目的 探讨急性冠脉综合征(ACS)患者血浆miR-122和miR-3149的表达变化及意义。方法 随机选取急性心肌梗死(AMI)患者46例,不稳定心绞痛(UA)患者45例作为ACS组,并随机选取冠脉造影阴性者40例作为对照组,采用实时荧光定量技术检测各组血浆中miR-122和miR-3149,绘制受试者工作特征(ROC)曲线,分析血浆miR-122对ACS的诊断价值。结果 与对照组比较,ACS组血浆miR-122水平明显升高,且AMI患者明显高于UA患者(P均<0.05);血浆miR-3149水平ACS组与对照组、AMI患者与UA患者比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。ROC曲线下面积为0.81(95%CI:0.725~0.888,P<0.01)。相关性分析显示AMI患者miR-122和miR-3149表达水平与cTnI水平均无相关性(P均>0.05)。结论 miR-122在急性冠脉综合征患者血浆中表达上升,对ACS的诊断具有一定的价值。
miR-122;miR-3149;急性冠脉综合征;血管内皮细胞,增殖,迁移
急性冠状动脉综合征(ACS)是世界范围内导致心血管疾病患者死亡的主要疾病之一[1]。如果患者在急性心梗发病后的3 h内接受到及时救治,病死率可大幅度降低[2]。研究发现,MicroRNAs(微小RNA,miRNAs)在血管生成和心血管疾病的发生中发挥重要作用,在RNA酶存在的情况下,其在心血管疾病患者体液中可稳定存在而不被降解[3,4],提示外周血miRNAs有可能成为心血管系统疾病早期诊断和判断预后的潜在标志物。研究发现,在猪心肌梗死动物模型中结扎冠脉阻断血流后,动脉模型血浆中miR-122和miR-3149快速升高[5],推测miR-122和miR-3149与冠心病有着一定的关系。本研究探讨miR-122和miR-3149在ACS患者血浆中表达的变化及意义。
1.1 基本资料 收集2012年10月~2014年9月于济宁医学院附属医院和新矿集团莱芜中心医院就诊并确诊为ACS的91例患者作为ACS组,男46例、女45例,年龄34~82(55.4±5.9)岁;AMI患者46例,不稳定心绞痛(UA)患者45例;均符合美国心脏协会(AHA)/美国心脏病学会(ACC)2009心血管诊疗指南[6]制定的ACS制定标准。伴高血压15例、糖尿病8例、高血压合并糖尿病4例、高血脂11例,吸烟(每日>20支,时间>10年)15例;血清肌钙蛋白Ⅰ(cTnI)为(6.98±2.91)ng/mL。收集同期表现为非心源性胸痛或者胸闷入院后冠脉造影阴性者40例作为对照组,男19例、女21例,年龄36~80(56.6±2.4)岁;伴高血压6例、糖尿病3例、高血压合并糖尿病1例,高血脂5例,吸烟6例;血清cTnI为(0.01±0.01)ng/mL。两组年龄、性别比例、伴发疾病及吸烟等差异无统计学意义(P均>0.05)。ACS组血清cTnI水平明显高于对照组(P<0.05),ACS组AMI患者血清cTnI水平明显高于UA患者(P<0.05)。本研究经本院伦理委员会批准,两组研究内容均知情并签署知情同意书。
1.2.1 血浆miR-122和miR-3149 mRNA水平 两组均取肘静脉血5 mL[观察组于胸痛发作后(5.5±1.6)h采血)],放入含柠檬酸钠抗凝的采血管,采血2 h内离心(3 000 r/min, 15 min)分离血浆和细胞组分,血浆成分置于-80 ℃冰箱保存。采用SYBR Green定量PCR法 检测miR-122和miR-3149 mRNA表达,2-ΔΔCt法计算miRNA相对表达量,实验重复3次,取平均值。结果显示,ACS组血浆miR-122水平明显高于对照组,AMI患者明显高于UA患者(P均<0.05);血浆miR-3149水平ACS组与对照组、AMI与UA患者比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。见表1。
表1 两组血浆miR-122和miR-3149相对表达量比较
注:与对照组比较,*P<0.01;与UA比较,#P<0.01。
1.2.2 AMI患者血浆miR-122和miR-3149表达与血清cTnI水平的相关性 采用Pearson线性相关分析法分析。结果显示,AMI患者血浆miR-122和miR-3149表达与cTnI水平均无相关性,r分别为-0.121和0.078,P均>0.05。
1.2.3 血浆miRNA-122对ACS的诊断价值评估 绘制受试者工作特征(ROC)曲线,计算曲线下面积,分析miRNA-122对ACS的诊断价值。结果显示,ROC曲线曲线下面积为0.81,95%CI:0.725~0.888,P<0.01。见图1。
图1 血浆miR-122表达对ACS的诊断价值
血清cTnI是诊断AMI的特异和灵敏标志物之一,但AMI患者cTnI水平在心肌梗死4~8 h后才开始升高,早期诊断灵敏度不高[7],且其对AMI与UA的鉴别无参考价值。目前已有研究报道miR-1、miR-195、miR-30a、miR-499等miRNAs具有优于肌钙蛋白成为AMI标志物的潜在可能[8~12],但目前其研究主要集中在AMI方面,在ACS范围内的研究相对较少。
近期Li等[5]在猪心肌梗死模型的研究中发现,冠状动脉结扎后血浆中miR-122含量在180~240 min内持续升高,miR-3149表达水平亦在30~240 min升高;截止到240 min检查结束,血浆中cTnI水平仍未明显升高。本研究结果显示,ACS组血浆miR-122水平明显高于对照组,且AMI患者明显高于UA患者;提示miR-122在冠心病的发生、发展中起一定作用,对ACS与非冠心病、AMI与UA的鉴别有一定价值。miR-122是在肝脏特异高表达的一种miRNAs[13],在脂类代谢中起着重要的作用[14]。Gao等研究中发现高脂血症患者血浆miR-122水平明显升高,并且与冠心病的严重程度密切相关[15]。动物实验研究表明,miR-122在心脏中表达无表达或者低表达,在大鼠梗死心肌组织中表达明显升高[16]。但miR-122在冠心病的发生、发展中作用的具体机制尚不明确,有待于进一步的实验证实。本研究ROC曲线分析结果显示,miR-122对ACS有较高的诊断价值。以往研究报道,AMI患者血浆中某些miRNAs与cTnI水平相关[17]。本研究发现,AMI患者血浆中miR-122和miR-3149水平与cTnI水平均无相关性。但本研究尚存在一些局限性,从生物标志物研究看,样本量偏小,且为横断面研究,有必要开展大样本、多中心、随机对照研究进一步研究证实。
综上所述,miR-122在急性冠脉综合征患者血浆中的表达水平明显升高,对ACS的诊断具有一定的价值。
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2016-06-21)