PCR技术在食品微生物检测中的应用探讨

□ 唐文靖 品升商品检测(上海)有限公司

PCR技术在食品微生物检测中的应用探讨

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食品微生物检测是一项重要的工作，食品微生物检测中经常采用PCR技术，检测结果的准确性很高。PCR技术具有灵敏度高的检测优势，其可检测食品中的微生物成分。本文主要探讨PCR技术在食品微生物检测中的实践应用。

PCR技术；食品；微生物；检测

食品微生物检测中的PCR技术是指聚合酶类反应，此类方法能够提高食品微生物的检测效率，鉴别微生物的同 时准确筛选食品中的微生物。近几年，食品安全成为社会关注的问题，在食品微生物检测中引进PCR技术，更提高微生物的检测效率和质量。

1 PCR技术在食品微生物检测中的优势

PCR技术在食品微生物中的检测优势：①PCR技术的操作方法简单，不会影响食品的质量，因此，可以提高食品微生物检测的操作效率，PCR技术使用的设备非常少，即使在较为简单的环境中，也能完成食品微生物的检测工作；②食品微生物检测中的PCR技术准确率高，可以在快速的状态下鉴定食品中是否含有微生物，PCR检测自动化程度高，消除了传统检测方法的弊端；③PCR技术在食品微生物检测中具有一定的发展空间，研究设计人员以常规的PCR技术为基础，设计出多样化的检测方法，目的是高效、快捷、准确地检测食品中的微生物，提高PCR技术的检测水平，保障市场中食品的质量，规避潜在的微生物问题。

2 PCR技术在食品微生物中的应用分析

食品微生物检测中的PCR技术主要分为4类，笔者结合食品微生物检测探讨PCR技术的具体应用。

2.1 常规PCR技术

常规PCR技术是最基础的检测技术，在食品微生物检测中利用常规PCR技术，把聚合酶适量加入到食品微生物的DNA模板与引物的混合物中，催化的条件下DNA会出现片段扩增的情况，而且片段扩增在DNA模板上完成，不同的扩增周期DNA的表现不同[1]。常规PCR技术的每个周期中，DNA都会扩增对应的片段，DNA模板可以循环使用，促使常规PCR中的聚合酶类反应持续进行并逐渐增加产物量。常规PCR技术可以检测食品中的多种菌类，检出效率高达99%，食品微生物检测中积极推行常规PCR技术的应用，致力于提高食品的安全性，避免出现微生物污染的问题。

2.2 多重PCR技术

食品微生物检测中的多重PCR技术具有综合性的特征，以常规PCR技术为基础，在PCR的反应体系中加入多重引物[2]。多重PCR技术中混合了大量引物，很多引物之间会出现互补的情况，此时就要增加反应体系中DNA片段的数量。多重PCR技术的检出效率非常高，其在食品微生物检测中仍旧沿用了常规PCR的技术优势，快速得出食品微生物的检测效果。多重PCR技术使用的过程中，一次性可以检查多重微生物的DNA。多重PCR技术在食品微生物的检测中具有非常高的检测效率，实际也存在着缺陷，也就是多重PCR的敏感度低，应该注意多重PCR技术的敏感度控制，优化多重PCR技术的应用，进而满足食品微生物的检测需求。

2.3 Rt-PCR技术

Rt-PCR技术在食品微生物检测中是指聚合酶链反应，提取微生物的RNA并作为模板获取cDNA，再把cDNA作为模板进行PCR的扩增处理，表达食品微生物的DNA片段[3]。Rt-PCR技术的检出效率非常高，具有灵敏度高的优势，在食品微生物检测期间，此类技术可以提高好几个数量级，精准鉴别食品样品中的微生物。Rt-PCR技术很容易区分微生物特征，有利于提升微生物检测的准确性，避免出现检测不到位的情况，而且检测效率也很高。

2.4 免疫PCR技术

免疫PCR技术把食品微生物的DNA分为当作标记物，免疫操作的过程中扩增PCR[4]。免疫PCR技术结合了抗原抗体反应与PCR扩增，提升微生物检测的灵敏性。食品微生物的免疫PCR技术检测中，可以随意选择DNA分析，固定好DNA分子后合成一对引物，所有检测对象采用一对引物即可。免疫PCR技术的连接分子是多用生物素，生物素具有独立的特征，两个独立生物素的结合点，分别连接DNA分子和亲和素，形成了连续性的复合物，PCR扩增复合物标记出微生物的DNA。

3 PCR技术在食品微生物检测中的应用案例

PCR技术可以灵活检测食品微生物中的肠出血性大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌等，本文以沙门氏菌为例分析PCR技术的应用。

食品加工时存有破坏沙门氏菌的条件，在食品中沙门氏菌的含量非常少，增加了PCR技术检测的准确度。采用多重PCR技术检测食品中的沙门氏菌微生物时，多重PCR技术不仅可以鉴定出食品中的沙门氏菌，还可以检测到沙门氏菌是否存在突变问题。用多重PCR技术进行检测时，采用invA、invB、hns引物扩增PCR，判断食品中的沙门氏菌血清状态。

4 结语

PCR技术在食品微生物检测中具有很大的优势，PCR技术直接关系到食品的安全应用。在食品微生物检测中有效应用PCR技术，可以满足食品安全检测的需求。

[1]王华,刘斌.PCR技术在食品微生物检测中的应用[J].生物技术通报,2010(2):63-67.

[2]陈诺,唐善虎,岑璐伽,等.多重PCR技术在食品微生物检测中的应用进展[J].中国畜牧兽医,2010(10):72-75.

[3]胡博.PCR技术在食品微生物检测中的应用[J].现代食品,2017(2):36-37.

[4]孙岩琳.PCR技术在食品微生物检测中的应用探究[J].黑龙江科技信息,2016(11):121.