食品中大肠菌群平板计数结果不确定度的评定

□ 方武龙 广东东方纵横检测有限公司

食品中大肠菌群平板计数结果不确定度的评定

□ 方武龙 广东东方纵横检测有限公司

通过对于有关标准以及测量的不确定度的评定形式的参考，能够有效测定出食品中大肠菌群检测结果的不确定度。研究之后能够明确食品里面大肠菌群平板技术结果的不确定度的来源，建立一种简单适用的大肠菌群平板计数不确定度评定方法。结果表明，影响食品中大肠菌群平板计数结果不确定度的主要因素为取样量的不确定度、稀释倍数的不确定度、加样体积的不确定度、平板上大肠菌群数量的不确定度和煌绿乳糖胆盐肉汤管产气比例产生的不确定度，其中后两者产生的不确定度所占分量最大。

大肠菌群；平板计数；不确定度评定

肠菌群就是一些有特殊性质的细菌，这些细菌和粪便污染有比较紧密的联系。所以，群数的高低直接决定了粪便的污染程度，并且也直接反映出了对人类造成的影响[1]。粪便属于排泄物，不仅包括无危害的粪便，还包括有病菌的粪便。所以，能够看出食品里面存在粪便污染，这样可以明确食品里面有肠道致病菌污染的存在，并可能引发一定的流行病，从而影响人们的身体健康。

1 检测的原理和检测的形式

1.1 检测的原理

通过把样品放在乳糖胆盐里面进行发酵，能够得到一些显示出阳性的菌体，之后在进行平板培养，采取一定的试剂进行染色。通过检查以及乳糖培养，如果乳糖管能够产生气体，并且染色之后呈现出阴性，这样的一种杆菌就是大肠菌群。

1.2 检测的形式

通过无菌操作之后，再取样，把取得的样品放置在灭菌生理盐水里面，通过充分搅拌后可以得到比较均匀的稀释液体，之后再使用灭菌盐水当作稀释液，通过参考有关卫生标准以及对于样品的研究分析，选择出3个不同的稀释度，每个稀释度分别选择几个样品[2-3]。放置在恒温箱里面培养24 h，之后拿出观察，将产生气体的发酵管进行转种，将转种的东西放置在伊红美蓝琼脂平板上，再放置在恒温箱里面培养24 h。之后拿出观察，通过染色以及实验接种，再放置在恒温箱里面培养24 h。只要乳糖管产生了气体，并且革兰染色显示出阴性，这样的杆菌就是大肠菌群阳性。通过对于呈现阳性管数的分析，进而得到大肠菌的MPN值。通过充分的培养之后再开展对于不确定度的评定检测，对某冷饮均质后重复10次检测大肠菌群的数据进行不确定度评定。

2 对于不确定来源的分析以及对于不确定来源的评定

当检测微生物时，通常能够人为样品里面的细菌分布的均匀性以及细菌分布的重复性造成的不确定，直接影响了之后的检测结果，降低了准确度[4]。但不可以忽视样品的情况、培养的过程、操作人员的情况，这些都会直接影响不确定度。通过分析工作中的实际，进而分析不确定度产生的原因。

2.1 均匀性引入的不确定度

样品里面的均匀性所造成的不确定度，会直接影响检测结果，实验时需要参考相关规定[5]。把样品充分结合之后再取样，这样得到的样品比较均匀。

2.2 重复性检测引入所造成的不确定度

重复性检测会造成不确定度，这样会直接影响检测结果。这些也属于不确定度。以下对于样品进行了二十次测定，通过对于检测结果的分析，得到了这些数据。

当制取样品时引入的不确定度，样品制取时涉及了对于样品的称量以及对于样品的稀释。通过分析能够看出，不确定度是电子天平称量引入的，并且也可能是玻璃器皿引入的。

3 讨论分析

本文详细分析了实验过程中产生的不确定度分量，通过有关的研究能够看出制备样品时会产生不确定度分量，稀释、接种以及检测时，都会形成不确定度分量。通过对于这些因素的分析可以看出，这些分类所造成的影响比较小，可以被忽略掉。为了能够有效减少所存在的不确定度，需要设置比较统一的操作顺序。这个实验可以被当作是在标准气温下进行的，可以忽视溶液温度和校准的温度所造成的不确定度，如果温度达不到20 ℃，就需要考虑温度所造成的影响。

通过分析能够看出，造成不确定度的因素涉及了样品的均匀程度、取样的重复程度以及人员的操作情况等。实验时需要固定的实验条件，也就是说当检测大肠菌群时，可以进行不确定度的评定，培养时需要对于温度的要求比较高。通过计算能够看出，大肠菌群检验的不确定度分量里面，检测结果比较容易产生重复的情况，所以会造成不确定度。并且由于检验结果的持续增加，能够随时加入到合并样本中，重新计算合并样本标准差，更新不确定度的取值范围。正确评定不确定度，可以提高检测结果的有效性、科学性、公正性和可靠性。

4 结语

测量不确定度和检测结果有紧密的联系，通过分析测量结果，能够明确测量值有一定的分散性。一般是由多个分量组成，一些分量能够分析测量结果的分布情况，用实验标准偏差表示。

[1]凌云,王李宝,沈辉,等.食品中大肠菌群平板计数结果不确定度的评定[J].食品与机械,2010(5):75-77.

[2]何晓玲.食品中大肠菌群平板计数法不确定度的评定[J].质量技术监督研究,2014(4):18-20.

[3]甄珍.食品中大肠菌群测定结果不确定度的评定[J].高师理科学刊,2011(5):63-65.

[4]胡巅,李素芳,丁武.MPN法检测结果的不确定度及其评定[J].现代预防医学,2013(10):1939-1941.

[5]王毅谦,吴福平,张洪元,等.方便食品检验中大肠菌群的不确定度评定[J].口岸卫生控制,2013(3):27-29.