营养米粉中阪崎肠杆菌检测方法研究进展综述

□ 吕 晨 龙口市检验检测中心

营养米粉中阪崎肠杆菌检测方法研究进展综述

□ 吕 晨 龙口市检验检测中心

在我国经济发展的大趋势下，食品工业也进入了迅猛发展的黄金阶段。然而，部分食品企业在加工生产中没有树立良好的食品安全意识，致使食品在生产中发生污染，产生一些对消费者造成健康隐患的致病菌，阪崎肠杆菌就是其中之一。以营养米粉为例，本文主要探讨食品检测环节中阪崎肠杆菌检测方法的发展现状，并通过积极思考，展望营养米粉中阪崎肠杆菌检测的未来方向，以供参考。

营养米粉；阪崎肠杆菌；检测方法；

食品检测一直是帮助质监部门保证食品安全的一种手段，而食品中致病菌的检测和防控更是提升食品质量和保障消费者安全的一种重要的技术方式[1]。作为营养食品，营养米粉在生产环节中容易被一些致病菌污染，对消费者的健康造成不良影响。因此，我们必须要强化营养米粉中致病菌的检测技术管理，尤其是阪崎肠杆菌这种极易引发婴幼儿严重病症的病菌。目前，很多医学报告已经将婴幼儿营养粉作为感染阪崎肠杆菌的主要渠道[2-4]。因此，审视营养米粉中阪崎肠杆菌检测方法的研究现状并理性展望已成为研究阪崎肠杆菌检测方法的重要目标。

1 营养米粉中阪崎肠杆菌检测常用方法

1.1 定量PCR方法

这是在阪崎肠杆菌检测中最常用的分子生物学定量检测方法之一，它是由常规PCR检测方法发展而来的，这种方法的原理较易理解，即在PCR体系中引入一个荧光基团，并利用荧光基团发出的信号累积量来实时记录PCR的反映过程，然后将记录结果绘制成标准曲线来定量分析样本数据。定量PCR检测法存在两种衍生方法：①探针类。也就是利用一种生物学杂交探针来指示PCR扩增产物的增加，这种方法对于特异性检测较为适用；②非探针类。这种方法是利用一些扩增产物的特征来进行反映指示的，这种方法较为简便，所以应用范围也较为广泛。目前，荧光定量的PCR方法在婴幼儿食品的细菌污染检测方面应用较广[5]。我国学界已建立起了婴儿奶粉的阪崎肠杆菌荧光定量PCR法，该方法就是采用先增菌后检测的模式，利用TaqMan荧光探针和SYBRGreen荧光染料两种方法，针对基因序步骤列为16S-23SrDNA的ITS序列。这种方法的灵敏度极高。

1.2 脉冲场凝胶电泳检测法

检测中，常用脉冲场凝胶电泳法来分离必须的DNA大分子，这是由于在传统的凝胶电泳里的大分子DNA向同一方向移动的速度差别不大，也就不会形成区分度较大的条带。加入脉冲场之后，电场中的电极不断发生变换，凝胶电泳中的小分子可以随着电极变动迅速做出反映，而大分子DNA却很难迅速转向，利用这一原理就可以分离出较大分子DNA。到目前为止，脉冲场凝胶电泳法已经成为基因分型的重要检测方式，在微生物检测中的应用也越来越广泛。

1.3 其他检测方法

此外，还有多种细菌学检测方法可应用于阪崎肠杆菌的检测和分型，包括核糖体分型、质粒指纹图谱分析、限制性片段长度多态性（RFLP）分析、抗生素抗性谱分析、毒素分析、血清学分型和噬菌体分型等[6]。有专家提议，采用分子微生物检测技术对所分离的阪崎肠杆菌菌株进行系统鉴定，以促进阪崎肠杆菌流行病学调查工作发展。

2 营养米粉中阪崎肠杆菌检测的未来展望

当前，我国食品中的阪崎肠杆菌检测依然是运用传统方法，经过我国技术科研人员的不断努力，已经大大缩短测试时间。而利用先进的分子生物学检测技术，不仅可以帮助阪崎肠杆菌检测环节的进一步提速，而且对阪崎肠杆菌分型也十分有利。因此，我们要积极发展分子生物学技术，将之与传统方法相结合，促进阪崎肠杆菌检测向更加快速、准确的方向发展。

3 结语

营养米粉生产中强化阪崎肠杆菌的防止固然非常重要，加强阪崎肠杆菌检测的标准化和精细化发展也是约束营养米饭企业、保障食品安全的重要举措。我们通过审视和梳理阪崎肠杆菌的检测方法，了解了阪崎肠杆菌检测的发展现状，只有在现有检测技术的基础上进行深化研究，才能帮助阪崎肠杆菌检测技术走向更加精准、成熟的未来。

[1]罗茂凰,张海英,张海滨,等.奶粉中坂崎肠杆菌检测方法研究[J].中国卫生检验杂志,2005(11):69-71.

[2]朱永红.奶粉中坂崎肠杆菌检测方法研究进展[J].中国乳品工业,2005(12):39-43.

[3]王羽,侯俊如,马波,等.建立PCR检测奶粉中坂崎肠杆菌的方法[A].2007中国农业工程学会农产品加工及贮藏工程分会学术年会暨中国中部地区农产品加工产学研研讨会论文集[C].中国农业工程学会农产品加工及贮藏工程分会、河北农业大学食品科技学院,2007.

[4]齐哲,于志彬,陈珊珊,等.PCR检测奶粉中坂崎肠杆菌的模版制备的几种方法[A].2007中国农业工程学会农产品加工及贮藏工程分会学术年会暨中国中部地区农产品加工产学研研讨会论文集[C].中国农业工程学会农产品加工及贮藏工程分会、河北农业大学食品科技学院,2007.

[5]关嵘,顾鸣.坂崎肠杆菌(E.sakazakii)的危害及其检测方法[J].检验检疫学刊,2003(3):56-57.

[6]朱永红,彭燕,孔树全,等.乳粉中坂崎肠杆菌的快速检验[J].中国乳品工业,2006(9):57-59.