用megaTAL 核酸酶对原代人T 细胞CCR5 基因座进行有效修饰可建立HIV-1 抵抗力

用megaTAL 核酸酶对原代人T 细胞CCR5 基因座进行有效修饰可建立HIV-1 抵抗力

已有研究表明，HIV-1 协同受体( co-receptor) CCR5 基因中自然发生的32 个碱基对缺失( 32-base pair deletion)可保护人CD4+T细胞，对抗HIV感染。最近，用工程化核酸酶干扰该基因和模拟此突变的基因工程方法展示了HIV 治疗获得成功的迹象。Romano Ibarra 等研制了一个靶向CCR5 基因第3 细胞外茎环( extracellular loop)的megaTAL核酸酶，并通过mRNA转染把它导入原代人T细胞。CCR5megaTAL核酸酶在细胞系中可产生HIV抵抗力，并高效干扰原代人CD4+T细胞上CCR5的表达，分子水平的检测显示原代细胞中该基因座的80%被修饰。将基因修饰细胞移植到免疫缺陷小鼠时，其植入率与非基因修饰细胞相当。此外，在免疫缺陷小鼠模型中，HIV-1体内感染期间，基因修饰的CD4+细胞被优先地扩增。该研究的结果显示了用工程化megaTAL核酸酶靶向原代T细胞CCR5基因的可行性，以及用基因修饰细胞重建病人免疫系统和抵抗HIV 感染的潜能。

Mol Ther Nucleic Acids，2016，5( 8) : e352( 李光明)