罗氏公司COBAS C501全自动生化分析仪检测系统性能验证

夏万宝，张冬青，周庆丰，沈 嘉，侯彦强

(上海市松江区中心医院检验科 201600)



·临床研究·

罗氏公司COBAS C501全自动生化分析仪检测系统性能验证

夏万宝，张冬青，周庆丰，沈 嘉，侯彦强△

(上海市松江区中心医院检验科 201600)

目的 系统地对罗氏公司COBAS C501全自动生化分析仪(简称COBAS C501)酶学指标丙氨酸氨基转氨酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、L-γ-谷氨酰基转移酶(GGT)及碱性磷酸酶(ALP)的分析性能进行评价，了解和掌握罗氏公司COBAS C501全自动生化分析仪检测ALT、AST、GGT及ALP的精密度(批内、日间)、线性范围、临床可报告范围、正确度及生物参考区间等相关性能。方法 根据美国临床实验室标准化研究所(NCCLS)文件(EP5-A2、EP15-A2)及中华人民共和国卫生行业标准(简称卫生行业标准)的相关文件进行评价。结果 ALT、AST、GGT及ALP的高、中、低值的批内精密度均小于1/4总误差(TEa)，日间精密度均小于1/3TEa；ALT、AST、GGT及ALP的各项目线性良好，线性回归方程的斜率均在1.00±0.03范围内，R2均≥0.95，线性范围分别为2～730、2～673、3～1 266、3～1 156 U/L，临床可报告范围分别为2～14 600、2～13 460、3～25 320、3～23 120 U/L；对上海市5份室间质控物的ALT、AST、GGT及ALP检测结果与靶值的偏倚分别为0%～5.88%、1.03%～3.33%、-1.64%～1.68%、-0.34%～6.25%，均小于1/2TEa；各项目的生物参考区间验证结果均在本实验室引用的参考区间内。结论 罗氏公司COBAS C501全自动生化分析仪对ALT、AST、GGT及ALP检测的主要性能符合质量目标要求，能够满足各大、中型医院的临床检测需求。

COBAS C501分析仪； 性能验证； 精密度； 线性范围； 行业标准

根据CNAS-CL02:2012《医学实验室质量和能力认可准则》要求医学实验室应定期对设备、检测系统或方法的主要分析性能进行验证,证实其能够达到临床检测所要求的标准及CNAS-CL38：2012《医学实验室质量和能力认可准则在临床化学检验领域的应用说明》第5条款“技术要求”中的5.5“检验过程”5.5.1.2要求罗氏公司COBAS C501全自动生化分析仪的性能验证内容至少应包括精密度、正确度、可报告范围等[1-2]。本实验室参照中华人民共和国卫生行业标准(WS/T 403-2012、WS/T 404.1-2012、WS/T 408-2012)，对罗氏公司COBAS C501全自动生化分析仪进行性能评价，现报道如下。

1 材料与方法

1.1 标本来源 所用标本均采自本院健康体检人群或就诊患者，标本要求为新鲜血清(无溶血、无黄疸、无脂血)；标本采集严格按照《临床化学检验血液标本的收集与处理》(WS/T 225-2002)[3]要求进行。

1.2 仪器与试剂 仪器为罗氏公司COBAS C501全自动生化分析仪。试剂和校准品为罗氏公司原装丙氨酸氨基转氨酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、L-γ-谷氨酰基转移酶(GGT)及碱性磷酸酶(ALP)检测试剂盒(批号分别为13354101、12398201、11948901、62159401)；校准品c.f.a.s(批号17795803)。质控品为低值质控品(批号M407081)、中值质控品(批号M407082)、高值质控品(批号M407083)，均由美国贝克曼库尔特有限公司提供。罗氏公司COBAS C501全自动生化分析仪所使用的试剂、校准品及质控品均在有效期内。

1.3 方法

1.3.1 质控检测 选择低、中、高值3个浓度质控品，每天进行室内质量控制，所检测的指标在控状态下对精密度、线性范围、临床可报告范围、正确度及生物参考区间进行评价。

1.3.4 正确度 参考NCCLS EP15-A2文件[5]，使用5份2015年上海市临检中心第2次室间质控物(批号RC2015021、RC2015022、RC2015023、RC2015024、RC2015025)分别进行单次检测，计算每份标本检测结果与靶值的偏倚，判定标准为小于1/2总误差。

1.3.5 线性范围及临床可报告范围验证

1.3.5.1 线性范围 参考卫生行业标准(WS/T408-2012)《临床化学设备线性评价指南》[6]，选取新鲜高值(H)血清和低值(L)血清标本各1份，将H和L按5L、1H+4L、2H+3L、3H+2L、4H+1L、5H配制成6个浓度标本，每标本按照从低浓度到高浓度顺序测定3次，再按照从高浓度到低浓度顺序测定3次，计算均值，以X表示各标本的预期值，以Y表示各标本的实测均值，得直线回归Y=aX+b,得到a、b及R2值。a为斜率，b为Y轴截距，R2为相关系数的平方，判断其是否呈线性关系。

1.3.5.2 临床可报告范围(CRR) 选取仪器线性范围内高值患者标本，分别做5倍、10倍、20倍稀释检测，每个浓度重复测定3次，将3次测定结果的平均值与稀释后的理论值比较，计算稀释回收率；稀释回收率=(实测值/理论值)×100%，回收率应在90%～110%，符合该条件的最大稀释度为该项目的最大稀释倍数。线性范围乘以最大稀释倍数为该项目的临床可报告范围。

1.3.6 生物参考区间 参考卫生行业标准(WS/T 404.1-2012)《临床常用化学检验项目参考区间》[7]，挑选本院健康成人(20～79岁)体检者40例，男女各半，对参考范围进行验证，只允许10%的数据超过所验证的参考范围，否则需建立新的参考范围。判定标准R=(测定结果在参考范围的例数/总测定例数)×100,结果≥90%为合格。

2 结 果

2.1 批内精密度 COBAS C501检测高、中、低值的质控品，ALT、AST、GGT及ALP的批内精密度均满足卫生行业标准(WS/T 403-2012)的1/4总误差，见表1。

表1 各项目的批内精密度结果

2.2 日间精密度 COBAS C501检测高、中、低值的质控品，连续检测20 d，统计ALT、AST、GGT、ALP的日间精密度，均满足卫生行业标准(WS/T 403-2012)的1/3总误差，见表2。

表2 各项目的日间精密度结果

2.3 正确度 COBAS C501检测5个批号质控物的ALT、AST、GGT、ALP的偏倚均符合卫生行业标准(WS/T 403-2012)的1/2总误差，见表3。

2.4 线性范围及临床可报告范围

2.4.1 COBAS C501检测ALT、AST、GGT、ALP的线性范围，a 均≤1±0．03、R2均≥0.95，均符合卫生行业标准(WS/T 408-2012)的要求，见表4。

表3 对质控物进行各项目检测的正确度结果

续表3 对质控物进行各项目检测的正确度结果

表4 各项目的线性范围评价结果

2.4.2 各项目临床可报告范围验证结果 见表5。

表5 各项目的临床可报告范围验证结果(U/L)

2.5 生物参考区间 40个参考值数据的验证结果均在卫生行业标准(WS/T 404.1-2012)给出的参考区间内，见表6、7，R2均≥0.95。说明本实验室引用ALT、AST、GGT、ALP的成人参考区间符合临床要求。

表6 成年男性各项目的生物参考区间验证结果

表7 成年女性各项目的生物参考区间验证结果

3 讨 论

COBAS C501是由罗氏公司生产的全自动生化分析仪，配套的检测系统具有完善的溯源性，检测系统或方法的性能可否接受，是决定检测系统能否用于常规工作的前提。按照《医学实验室质量和能力的专用要求》(ISO15189)的要求医学实验室应定期对设备、检测系统或方法的主要分析性能进行验证,证实其能够达到临床检测所要求的标准，依照相关文件和卫生行业标准，探讨并制订了罗氏公司COBAS C501全自动生化分析仪对ALT、AST、GGT、ALP各个项目的性能验证方案，并对该检测系统进行了评价，验证主要包括精密度(批内、日间)、正确度、线性范围、临床可报告范围及生物参考区间。

其中，检测系统ALT、AST、GGT、ALP各项目的批内精密度均小于1/4总误差，日间精密度均小于1/3总误差，符合卫生行业标准，可认为该仪器测定的各个项目的精密度验证通过；再确认检测系统精密度符合要求的基础上，进行正确度验证，结果显示，ALT、AST、GGT、ALP正确度分别为1.02%～2.94%、0.52%～3.33%、0.68%～2.63%、0.49%～6.25%，均小于1/2总误差，可认为该仪器测定ALT、AST、GGT、ALP的正确度验证通过，能够满足临床要求；该仪器检测各项目线性范围较宽，线性范围基本涵盖了临床标本分布的浓度范围,线性符合要求。

在检验过程中，经常会遇到一些高值标本，超出了仪器的检测范围，对于此类情况通常会对标本进行稀释。为了保证稀释后结果的准确可靠，针对临床不同项目高值的需要，选用仪器线性范围内的高值标本进行不同稀释倍数的验证。各项目稀释后的回收率均在90%～110%，说明稀释后的结果准确可靠，能够满足临床需求。

实验室在开展检测项目前，所引用的参考区间是否适用于本实验室服务的人群，若适合，实验室应按要求进行验证；经验证，本实验室检测的ALT、AST、GGT、ALP的R2值均≥90%,因此，引用的生物参考区间符合本实验室服务的人群。

综上所述， 罗氏公司COBAS C501全自动生化分析仪检测ALT、AST、GGT、ALP各项性能均已达到国家卫生行业标准要求，是一台具有检测精度高、速度快、功能强等优点的全自动生化分析仪，能够满足各大、中型医院的临床检测需求。

[1]中国合格评定国家认可委员会.医学实验室质量和能力认可准则：CNAS-CL02[S]．北京：中国合格评定国家认可委员会，2014：1-54.

[2]中国合格评定国家认可委员会.2012医学实验室质量和能力认可准则在临床化学检验领域的应用说明：CNAS-CL38[S]．北京：中国合格评定国家认可委员会，2015.

[3]张丽霞，孙艳虹，孙芹敏，等．临床化学检验血液标本的收集与处理：WS/T 225-2002[S]．北京：中国标准出版社，2002．

[4]NCCLS.Evaluation of precision performance of quantitative measurement menthods：EP5-A2[S].PA,USA:NCCLS,2004.

[5]NCCLS.User demonstration of performance for precision and accuracy：EP5-A2[S].PA,USA:NCCLS,2004.

[6]汪静，郭健，张传宝，等.临床化学设备线性评价指南：WS/T 408-2012[S]．北京：中国标准出版社，2012．

[7]尚红，陈文祥，张传宝，等.临床生化常用检验项目参考区间：WS/T 404-2002[S].北京：中国标准出版社，2012.

[8]陈文祥，尚红，申子瑜，等.临床生物化学检验常规项目分析质量指标：WS/T 403-2002[S].北京：中国标准出版社，2012.

10.3969/j.issn.1673-4130.2016.24.041

A

1673-4130(2016)24-3482-04

2016-05-16

2016-07-27)

△通讯作者，E-mail:houyanqiang@aliyun.com。