■赵 峰 王 波 夏中生* 于俊勇 肖有恩
(1.海南广播电视大学农林医药科技学院,海南海口 570203;2.广西大学动物科技学院,广西南宁 530004;3.广西农垦永新畜牧集团有限公司良圻原种猪场,广西横县 530317)
饲用抗生素一直是防止仔猪断奶腹泻、促进动物生长的主要措施之一,但抗生素滥用导致动物肠道的继发感染,耐药菌产生,产品药物残留,对生态环境和食品安全带来威胁等问题已引起广泛关注,我国2015年新《环保法》和《食品安全法》的实施,以及《饲料质量安全管理规范》的相继出台,禁用动物饲用抗生素,寻求抗生素的替代品,研发安全、高效、绿色的新型环保型饲用抗生素替代产品已是大势所趋,迫在眉睫。近年来,有关抗生素替代产品研究开发主要有酸化剂、酶制剂、功能性寡糖、益生菌、植物提取物等,用以调节动物肠道微生态,提高动物免疫力,改善动物生长性能,但试验研究大多使用单个产品,且效果不一(Bovera F等,2012;Raphaële等,2017;Kim等,2011;刘虎传等,2012;赖昭凯等,2012;王金旭等,2014)。本试验根据仔猪肠道微生态平衡原理,研究饲粮中添加果寡糖与复合益生素对断奶仔猪生长性能、血清生化指标和健康状况的影响。探讨其替代抗生素的可行性,为新型复合微生态制剂替代饲用抗生素在动物健康养殖中合理应用提供科学依据。
果寡糖 (fructooligosaccharide,FOS)由南宁某公司生产提供粉状制剂,果寡糖含量30%;复合益生素(Complex-probiotic-preparation,CPP)由江苏某公司生产提供的粉状复合益生素制剂,主要含丁酸梭菌、枯草芽孢杆菌等,有效活菌数3×109CFU/g。
抗生素为金霉素预混剂(Aureomycin premix,AP),市售产品,含金霉素10%。
试验于2016年8~10月在广西农垦良圻原种猪场进行。选用240头健康状况良好,体重约7.2 kg的杜×长×大三元杂交断奶仔猪,随机分为6组,每个组2个重复,每个重复20头猪(公母各半),其中1组为对照组,饲喂基础饲粮;2组为抗生素组,在基础饲粮中添加0.10%AP;3、4、5、6组为分别在基础饲粮中添加0.05%CPP、0.10%FOS、0.20%FOS、0.10%FOS+0.05%CPP。基础饲粮参照NY/T 65—2004推荐8~20 kg仔猪的营养需要配制,其饲粮组成及营养水平见表1,各组饲粮营养水平一致。
表1 基础饲粮组成及营养水平(风干基础)
试验前,对整栋猪舍进行全面消毒,空栏7 d以上。将选好的试验猪转入消毒后的猪舍,对分组后的21日龄左右断奶仔猪,进行7 d预试,试验期35 d。试验猪舍自然光照,通风良好,温湿度适宜。每日饲喂2~3次。自由采食,每次以吃饱后略有剩余为度,自由饮水。按猪场常规方法进行免疫疫苗注射和饲养管理。每天清理猪栏一次,保持舍内卫生,随时观察猪群采食、粪尿排泄等行为,记录仔猪采食量,观察记录猪群腹泻发病用药情况等状况。
试验初始日和结束日空腹称取各组猪体重、计算平均日增重(ADG)、平均日采食量(ADFI)、料重比(F/G)。
平均日增重(ADG,g)=(末重-始重)/试验天数;
平均日采食量(ADFI,kg)=(饲喂料量-剩料量)/试验天数;
料重比(F/G)=平均日采食量/平均日增重。
腹泻的判断为稀粪、不成形为准,分别记录各重复每天仔猪腹泻数。
腹泻率(%)=正试期腹泻仔猪头次总数/(试验仔猪头数×正试期天数)×100;
死淘率(%)=(死亡数+淘汰数)/总数×100。
结合饲养试验,采用内源指示剂法(即酸不溶灰分法,AIA法)测定饲粮能量、干物质、粗蛋白质、粗脂肪、粗纤维、无氮浸出物和粗灰分等养分表观消化率。
于试验结束前7 d起采集4 d粪样,每天上下午各收集一次(200~300 g),按重复将采集仔猪粪样混合,加10%硫酸混合均匀进行固氮后冷藏保存,同时采集饲粮样本(200~300 g)。将各重复4 d所采集粪样均匀混合再取样,将粪样、饲粮样本带回实验室分析,粪样于烘箱中60~65℃烘干,粉碎,过40目筛后于4℃冰箱冷藏室保存备用。测定饲粮和粪样中干物质、粗蛋白质、粗脂肪、粗纤维、粗灰分等采用张丽英(《饲料分析及饲料质量检测技术》,2002)和杨胜(《饲料分析及饲料质量检测技术》,1993)的方法;饲粮和粪中的酸不溶灰分含量采用4 mol/l-HCl不溶灰分法测定。
内源指示剂法饲粮养分表观消化率(4 mol/l-HCl不溶灰分法)计算公式如下:
饲粮养分的表观消化率(%)=[1-(b×c/a×d)]×100。
式中:a——饲粮中某养分的含量(%);
b——粪样中某养分的含量(%);
c——饲粮中指示剂(4 mol/l HCl不溶性灰分)的含量(%);
d——粪样中指示剂的含量(%)。
血清样品的采集:饲养试验中期或结束前一天,各组每个重复选取2~3头状态良好的仔猪,于清晨空腹状态下,前腔静脉采血5 ml,置于干净的试管内,4 000 r/min离心15 min(4℃),分离血清,-20℃冰箱保存。
测定血清总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、球蛋白(GLO)、谷丙转氨酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、尿素氮(BUN)、总胆固醇(T-CHO)、甘油三酯(TG)、葡萄糖(GLU)等,以及血清免疫球蛋白IgG、IgA、IgE、IgM。采用奥林巴斯(OLYMPUS)生化分析仪(型号为AU400),根据相应指标选用双缩脲法等和免疫比浊法等检测方法进行测定。
试验数据运用Microsoft EXCEL2010版软件进行处理后,再用SPSS19.0数据统计软件进行方差分析,用LSD和Duncan's法进行多重比较(显著性水平为0.05)。结果用“平均数±标准差(X±SD)”表示。
表2 果寡糖和复合益生素对断奶仔猪生长性能的影响
由表2可知,3、4、5、6组末重分别比对照组提高1.75%、6.12%、4.55%和9.04%,差异显著(P<0.05);4、5组和6组与2组(抗生素组)无显著差异(P>0.05)。4、6组平均日增重分别比对照组提高9.48%、13.77%,差异显著(P<0.05);3、4、5、6组平均日增重与抗生素组无显著性差异(P>0.05)。6组的平均日增重最大,达325.71 g;6组平均日采食量显著高于对照组和2组(P<0.05);料重比除4组显著低于对照组外(P<0.05),其他各试验组与对照组和抗生素组无显著性差异(P>0.05)。
表3 果寡糖和复合益生素对断奶仔猪健康状况的影响(%)
由表3可知,单独添加0.05%复合益生素(3组)、0.10%果寡糖(4组)及两者联合添加(6组)均能显著降低仔猪腹泻率(P<0.05),且与抗生素组无显著性差异(P>0.05),其中6组的效果最好,仔猪腹泻率比抗生素组降低了 62.86%(P>0.05),比对照组降低了94.63%(P<0.05),但对死淘率无明显影响(P>0.05)。
表4 果寡糖和复合益生素对断奶仔猪饲粮养分表观消化率的影响(%)
由表4可知,添加不同水平果寡糖和复合益生素对断奶仔猪饲粮粗蛋白质表观消化率无显著影响(P>0.05);除3组(0.05%CPP)饲粮粗脂肪表观消化率显著高于对照组(P<0.05)外,其他各组粗脂肪表观消化率与对照组无显著差异(P>0.05);除抗生素组粗纤维表观消化率显著高于对照组外(P<0.05),其他各试验组与对照组和抗生素组均无显著性差异(P>0.05)。
表5 果寡糖和复合益生素对断奶仔猪血清生化指标的影响
由表5可见,不同水平果寡糖和复合益生素对断奶仔猪血清总蛋白、白蛋白、球蛋白、白球比值、尿素氮、胆固醇、谷丙转氨酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、ALT/AST、空腹血糖等生化指标无显著影响(P>0.05)。但0.20%FOS组(5组)甘油三酯显著低于0.05%CPP组(3组)(P<0.05),其他各组之间均无显著性差异(P>0.05)。
本试验中,断奶仔猪饲粮添加不同水平果寡糖和复合益生素,可不同程度提高平均日增重、降低料重比,改善仔猪生长性能。其中以联合添加0.10%果寡糖制剂和0.05%复合益生素制剂对仔猪生长性能的改善效果最好,与对照组相比,平均日增重提高13.77%(P<0.05),料重比降低7.41%(P>0.05)。这可能是由于以丁酸梭菌、枯草芽孢杆菌为主要菌群的益生素在肠道产生有机酸、过氧化氢、各种消化酶、细菌素等物质,从而促进营养物质的吸收转化率;同时果寡糖又可以作为肠道益生菌生长的碳源,不能被大肠杆菌、沙门氏菌等有害微生物利用,而乳酸杆菌、双歧杆菌等有益菌的利用率很高,从而产生协同作用,起到增加断奶仔猪肠道有益微生物菌群,抑制有害菌群繁殖的作用,从而促进肠道健康,提高仔猪生长性能。谭聪灵等(2010)在饲粮中添加FOS对生长猪的生长性能的研究中表明FOS可以提高仔猪的生长性能和饲料转化率。汪彬等(2010)试验结果表明,单独添加0.10%的益生菌、0.10%寡糖能够不同程度地提高断奶仔猪的生长性能。周盟(2013)在饲粮中添加植物乳杆菌、枯草芽孢杆菌及其复合菌对断奶仔猪的影响,试验结果表明断仔猪的料重比显著降低,在一定程度上提高断奶仔猪的生长性能,并且这种作用效果随着仔猪生长而减弱。本试验结果与前人研究结果一致。在本猪场实际条件下以联合添加0.10%果寡糖和0.05%复合益生素作用效果好,生长性能方面能达到0.10%抗生素的作用效果。
本试验在饲粮中添加果寡糖和复合益生素能降低断奶仔猪腹泻率。单独添加0.10%果寡糖、联合添加0.10%果寡糖和0.05%复合益生素对断奶仔猪腹泻率的影响与0.10%抗生素基本一致。这与李武(2012)和胡楠等(2007)报道的试验结果基本一致。这说明果寡糖和益生素能提高仔猪健康,降低仔猪腹泻,适宜的添加水平能达到抗生素同样的效果。这可能是由于果寡糖和以丁酸梭菌、枯草芽孢杆菌为主要菌群的益生素协同作用下,有益菌大量繁殖,从而调节肠道微生态环境,使得有益菌群占据优势,竞争更多定植位点,排斥病原菌,激活肠道免疫系统,最终提高肠道免疫力(Ducatelle等,2015)。本试验表明在本猪场实际条件下,以联合添加0.10%果寡糖和0.05%复合益生素作用效果好,腹泻率方面比对照组降低94.63%(P<0.05),比0.10%抗生素组降低62.86%(P>0.05),提高了断奶仔猪健康水平。
本试验中在断奶仔猪饲粮中单独或者联合添加果寡糖和复合益生素能一定程度促进断奶仔猪对饲料粗脂肪、粗纤维的表观消化率,与0.10%抗生素的作用效果无差异(P>0.05)。这可能是与在果寡糖和益生素的协同作用下,大量有益菌群繁殖,直接或者间接参与各种消化酶、维生素的合成,改善营养物质消化代谢有关。冯仁勇等(2006)在饲粮中添加寡糖和复合益生素对断奶仔猪的试验研究结果表明寡糖和益生菌联合可以提高营养物质的消化率。汪彬等(2010)在断奶仔猪饲粮中单独添加益生菌和果寡糖,饲料利用效率分别比对照组提高6.51%和7.69%;两者联合添加,饲料利用效率比对照组提高8.88%。本试验结果与前人报道一致。在本猪场实际条件下以添加0.10%果寡糖作用效果较好。
动物血清生化指标检测目的在于了解动物机体的生理生化和营养代谢情况,有时也可以检查出动物体内潜伏的疾病,可用于防止病情突然发作并及时治疗。本试验在结束前,抽取断奶仔猪血液进行生化指标检测以判断用果寡糖和益生素替代抗生素后是否影响仔猪血清生化指标和代谢功能。血清白蛋白和球蛋白共同组成血清总蛋白,血清总蛋白含量高则有利于机体获得较强的免疫能力和代谢水平,保证动物的健康生长。球蛋白在血清中的含量高低能一定程度上反映出机体免疫力水平,而白蛋白主要作用是调节细胞外环境并运输维生素、激素以及脂类物质。本试验中,在断奶仔猪日粮中添加果寡糖和复合益生素对断奶仔猪血清免疫力的影响与0.10%抗生素的作用效果无显著差异(P>0.05),与对照组相比也没有明显差异(P>0.05)。说明饲粮中添加果寡糖和复合益生素安全可行,对仔猪免疫系统不会造成不利影响。谭聪灵等(2010)和肖宏德等(2014)试验研究结果表明果寡糖、益生菌制剂可以提高断奶仔猪血清免疫球蛋白水平,增强动物机体免疫功能。本试验结果与前人报道不尽一致,可能是果寡糖添加量或益生菌菌种不同所致,其原因还需要进一步的研究。本试验结果表明,仔猪饲粮中添加不同水平的果寡糖和复合益生素对断奶仔猪血清尿素氮、胆固醇、ALT、AST、ALT/AST、空腹血糖等生化指标无显著差异(P>0.05),0.20%果寡糖组有降低血清甘油三酯的功效,试验结果与前人研究结果基本一致(谭聪灵等,2010);这说明饲粮中添加果寡糖和复合益生素对试验仔猪的生理生化功能有益无害,因此认为果寡糖和复合益生素可以安全有效地添加到断奶仔猪饲粮中替代抗生素,进行仔猪生产。
饲粮中添加果寡糖和复合益生素制剂可不同程度提高断奶仔猪平均日增重,降低料重比,促进饲料营养物质的消化吸收,提高饲料利用率,改善猪生长性能,提高抗病力,改善健康水平;其效果与使用抗生素无差异,可见本试验条件下利用果寡糖和复合益生素替代饲用抗生素饲喂断奶仔猪是可行的。
综合考虑本试验各项指标分析结果,结合试验猪场的实际情况,在仔猪生产实践中建议饲粮中以联合添加0.10%果寡糖和0.05%复合益生素制剂为宜。
(参考文献刊略,需者可函索6567971@qq.com)