种猪场猪瘟母源抗体消长规律与免疫策略

许光勇，王朝军，周海深，徐利，卢纪和，麻文静，赵晓旭，苏敬良，任晓明

（1.北京养猪育种中心，北京海淀100194；2.中国农业大学动物医学院，北京海淀100193；3.北京农学院动物科学技术学院，北京昌平102206）

种猪场猪瘟母源抗体消长规律与免疫策略

许光勇1，王朝军1，周海深1，徐利1，卢纪和1，麻文静1，赵晓旭1，苏敬良2，任晓明3

（1.北京养猪育种中心，北京海淀100194；2.中国农业大学动物医学院，北京海淀100193；3.北京农学院动物科学技术学院，北京昌平102206）

试验主要通过前期调查母猪群猪瘟病毒感染情况和抗体保护水平，确定母猪群猪瘟疫苗免疫方式，然后选择不同时间点观察猪瘟母源抗体消长规律，从而确定仔猪猪瘟活疫苗首次免疫接种时间，继而达到有效地避开疫苗与母源抗体发生中和反应，为科学制定免疫程序提供理论依据。

猪瘟；母源抗体；阻断率；首免日龄；免疫策略

猪瘟（Classical Swine Fever,CSF）是由猪瘟病毒引起的一种高度接触性传染病，OIE（世界动物卫生组织）将其列为A类传染病，在我国被归为一类传染病[1]。临床上主要以发热、全身如针尖点状出血或脾梗死等为主要特征，妊娠母猪可表现出流产、产死木弱仔数增加。在全球，中国C株对猪瘟的控制与消灭做出过巨大贡献。在中国，虽现阶段猪瘟不呈现暴发式，但仍有零散发生，呈现温和感染状态，对猪场尤其是种猪场造成隐性危害。

规模化猪场猪瘟免疫效果差异较大，究其原因主要包括首免日龄不当导致母源抗体与疫苗抗原相互抵消或出现免疫空白期、母猪持续带毒导致仔猪形成免疫耐受、其他免疫抑制性疾病存在、猪瘟疫苗质量问题或其他管理因素等[2]。本试验根据猪瘟母源抗体消减变化情况来确定仔猪猪瘟活疫苗首免时间，从而避免盲目随意接种疫苗误区，为科学制定免疫程序提供理论依据，并形成一套可行性强的免疫程序调整及优化思路。

1 试验猪场背景

试验于北京养猪育种中心下属两个猪场开展，分别记为A和B种猪场。前期对试验场母猪群猪瘟抗体水平和猪瘟病毒感染情况进行摸底调查。

1.1 试验场母猪流产与产死木弱情况

对试验A与B种猪场2014年和2015年母猪群的流产率与产死木弱数进行统计，其分布见表1。由表1可知，试验A与B场母猪流产率在1.5%左右（2014年试验B场除外），基本符合蓝耳病阳性稳定场生产成绩表现。

表1 试验场母猪流产率与产死木弱数情况

1.2 试验场母猪群猪瘟病毒感染情况

母猪群均匀分布于空怀、妊娠和哺乳阶段并按5%比例采集扁桃体样品进行猪瘟病毒检测，试验A与B场分别为30份和15份，通过提取样品核酸、巢式PCR和凝胶电泳反应，其结果见图1和图2。图1和图2结果表明，试验A与B场母猪群均无猪瘟病毒感染存在，整个母猪群保持猪瘟抗原阴性状态。

图1 试验A场母猪群样品PCR检测猪瘟病毒结果

图2 试验B场母猪群样品PCR检测猪瘟病毒结果

1.3 试验场母猪群猪瘟抗体水平分布

母猪群均匀分布于各个胎次中并按10%比例于妊娠中后期采血检测猪瘟抗体，试验A与B场分别为60份和30份，检测结果见表2。由表2可知，试验A与B场母猪群猪瘟抗体完全合格，具有良好的保护作用，说明母猪群于断奶时免疫接种猪瘟疫苗即跟胎免疫是有效的。

表2 试验场母猪群猪瘟抗体合格率

综合上述结果可知，试验A与B场母猪群未受猪瘟病毒感染风险，各阶段母猪群猪瘟抗体水平良好，母猪群于断奶时采取跟胎免疫可行且利于仔猪猪瘟首免日龄确定。

2 材料与方法

2.1 试验动物

各选择50头刚出生哺乳仔猪，每窝2头，共25窝，试验于北京养猪育种中心下属A与B猪场完成。

2.2 试验用试剂盒

猪瘟病毒抗体检测试剂盒（批号：99-43220，F081），购自北京爱德士元亨生物科技有限公司。

2.3 试验处理

仔猪猪瘟活疫苗首免时间确定试验：试验A与B场分别挑选的50头刚出生哺乳仔猪，分别编号为A1～A50、B1～B50，100头仔猪不免疫任何猪瘟疫苗直至试验采血结束，分别于7、14、21、28、35、42、49和63日龄采血检测猪瘟抗体阻断值。

2.4 试验方法

具体操作完全按照IDEXX猪瘟病毒抗体检测试剂盒说明书进行。

3 统计分析

检测结果数据用Excel进行统计分析处理。

4 试验结果

试验A与B场所选100头试验猪分别于7、14、21、28、35、42、49和63日龄进行8次采血工作，其中试验B场有1头仔猪于31日龄死亡，故剔除掉编号B25试验猪，最后A与B场参与检测的血样数量每次分别为50和49份，对所有血样检测值进行统计分析，其结果见图3。

图3 试验A场仔猪猪瘟母源抗体消长情况

阻断率均值为试验A场所有参与试验采血仔猪猪瘟抗体阻断率的平均值，为方便分析，图3中所表现出的阻断率均值记为猪瘟抗体阻断率的平均值除以100；合格率为阻断率值大于等于40数量除以每次检测总数；阻断率值≤30比例为阻断率值小于等于30数量除以每次检测总数。

由图3可知，未接种任何猪瘟疫苗的仔猪，其猪瘟母源抗体水平随着时间推移逐渐降低，阻断率均值由7日龄0.75降至63日龄0.02；猪瘟抗体合格率也随着时间推移逐渐降低，呈现先慢后快再慢的下降趋势，在14日龄前，猪瘟抗体合格率均维持在90%以上且稳定；阻断率值≤30比例随着仔猪日龄增大而逐渐升高，至63日龄达100%。仔猪猪瘟活疫苗首免日龄确定原则为：当猪瘟母源抗体阻断率值小于等于30所占比例达到40%（一般为20%～40%）时即为猪瘟活疫苗首次免疫接种时间。依据此原则可知，试验A场仔猪猪瘟活疫苗首次免疫时间为35日龄。

图4中阻断率均值、合格率和阻断率值≤30比例所代表意义同图3。由图4可知，未接种任何猪瘟疫苗的仔猪，其猪瘟母源抗体水平随着日龄增大逐渐降低，阻断率均值由7日龄0.65降至63日龄0.04；猪瘟抗体合格率呈现先慢后快再平缓的下降趋势，不同于A场的是，在21日龄前猪瘟抗体合格率均较高；阻断率值≤30比例随着仔猪日龄增大也逐渐升高，至63日龄达100%。按猪瘟首免日龄确定原则同理可知，试验B场仔猪猪瘟活疫苗首次免疫时间大约为38日龄。

图4 试验B场仔猪猪瘟母源抗体消长情况

5 讨论

虽说猪瘟病毒感染对养猪业危害较之前轻，呈现温和型临床表现，但如果细算细分，猪瘟病毒对养猪业危害仍不可忽视，故在国务院与农业部颁发的《国家中长期动物疫病防治规划（2012—2020年）》文件中强调控制猪瘟重要性，同样在开展“十三五规划”中提出净化猪瘟方向。对于企业工作者来说，如何预防与控制猪瘟发生是重中之重，而走净化之路还需广大科研工作者提供更好的技术支持，例如开发猪瘟疫苗毒与野毒鉴别技术等。

猪瘟疫苗免疫效果受诸多因素影响，其中包括母源抗体中和反应、猪群健康度、精液带毒、免疫抑制性疾病干扰、免疫耐受性存在、疫苗质量与运输冷链等。本试验主要针对猪瘟母源抗体对仔猪疫苗免疫效果影响展开，通过观察猪瘟母源抗体消减规律来确定仔猪首免日龄。

前期对两个试验猪场猪群健康度进行摸底调查，由图1和图2结果可以确定母猪群未受猪瘟病毒感染，由表2结果可知母猪群猪瘟抗体保护率均达到100%，由表1数据可知，猪场母猪群流产率处于1.5%左右水平（2014年B场除外），2014年B场猪群蓝耳病保持抗原抗体双阴性状态，故其母猪流产率仅为0.15%，该生产成绩应该属于蓝耳病阳性稳定场或蓝耳病某几个阶段保持阴性状态的结果，与猪瘟病毒感染应该没有关联。通过两个猪场母猪群流产率、产死木弱数、猪瘟病毒感染状态和猪瘟抗体保护情况可知，该两个试验猪场均未感染猪瘟病毒，母猪群采取的断奶时跟胎免疫方式效果良好，且猪瘟跟胎免疫能够保证哺乳母猪奶水中猪瘟抗体水平稳定，不会导致仔猪吃母乳时出现母源抗体水平参差不齐的问题，仔猪猪瘟母源抗体消长有很强规律性，有利于仔猪猪瘟疫苗首免时间的确定。因此，规模化猪场要确定或优化仔猪猪瘟疫苗免疫程序，首先得确定母猪群猪瘟疫苗免疫方式，这样才能更准确地制定仔猪猪瘟疫苗免疫程序。就目前来看，猪瘟采取跟胎免疫固然精准，但同时也会出现一些问题，例如奶妈猪、妊娠期流产母猪等会出现漏免或免疫间隔时间过长的问题，这就要求猪场的管理更加精细化。虽然一刀切免疫方式省时省力，且母猪群抗体水平不受影响，但通过母乳传递给仔猪的母源抗体水平参差不齐，对仔猪猪瘟疫苗免疫程序制定带来很大影响。仔猪猪瘟疫苗免疫过早出现母源抗体与疫苗抗原发生中和，从而导致免疫无效，增加成本；免疫过晚仔猪出现免疫空白期，增加猪瘟病毒感染风险。因此，在制定或调整猪群猪瘟免疫程序时，务必先确定母猪群的猪瘟免疫方式，后期才能有的放矢。

图3结果显示，试验A场仔猪猪瘟母源抗体阻断率平均值随着日龄增大逐渐降低，7日龄仔猪阻断率均值为0.75，28日龄阻断率均值为0.43，推测大约30日龄阻断率均值降至0.40；试验A场猪瘟抗体合格率随着仔猪日龄增大也逐渐降低，并呈现先慢后快再慢的下降趋势，不难发现，仔猪于14日龄前合格率维持在90%以上，在14～42日龄阶段，其下降速度之快，抗体合格率由14日龄的90%迅速降至42日龄的10%，仅4周时间降低80个百分点，63日龄抗体合格率已为0；试验A场猪瘟抗体阻断率值小于等于30所占比例随着仔猪日龄增加逐步升高，并于35日龄达到38%，而63日龄达到100%。从图3中发现，35日龄仔猪的猪瘟抗体合格率为40%，猪瘟抗体阻断率值小于等于30所占比例为38%，按照阻断率值小于等于30比例在20%～40%区间内定为猪瘟疫苗首免时间的原则，我们将A场仔猪猪瘟疫苗首次免疫时间定为35日龄。

图4结果显示，试验B场仔猪阻断率均值随着日龄增大逐渐下降，且1周龄以内阻断率均值仅为0.65，28日龄为0.47，35日龄为0.36，故推测大约在30日龄阻断率均值达到0.40，这和试验A场基本保持一致；试验B场猪瘟抗体合格率也呈现先慢后快再平缓的下降趋势，21日龄前均维持在90%左右或以上水平，较A场推迟1周时间，但21～49日龄出现快速下降过程，49日龄降至2%；试验B场猪瘟抗体阻断率值小于等于30所占比例随着仔猪日龄增加也逐步升高，前3周较稳定，35日龄达到31%，42日龄升至61%，63日龄达到100%。从图4结果发现，大约在38日龄时，猪瘟抗体合格率达40%，猪瘟抗体阻断率值小于等于30所占比例也为40%，同理我们将B场仔猪猪瘟疫苗首次免疫时间定为38日龄。这样既避免疫苗抗原和母源抗体中和反应发生，又不会出现过长免疫空白区，能够有效地让仔猪得到母源抗体或疫苗抗体的保护。

通过图3和图4结果比较可知，试验A与B场阻断率均值、合格率和阻断率值小于等于30比例的变化趋势基本一致，即不同猪场仔猪猪瘟母源抗体消长规律基本一致。同时也存在差异，B场仔猪前期阻断率均值低于A场，B场猪瘟抗体合格率维持较高水平时间较A场多1周时间，这些有可能与不同猪场所饲养种猪品种差异、猪群健康度或生产管理水平等因素有关。从上述两个场结果可知，高猪瘟母源抗体水平至少能维持两周时间，21～42日龄为母源抗体迅速下降阶段，仔猪63日龄几乎或完全没有母源抗体保护，大约在30日龄阻断率均值达到40，26～38日龄阶段猪瘟抗体阻断率值小于等于30所占比例在20%～40%，35～38日龄阶段猪瘟抗体合格率维持在40%左右。

总之，要提高猪瘟疫苗免疫效果，消除母源抗体干扰只是一方面，还需从排查带毒猪尤其是后备猪群，控制或消灭其他免疫抑制性疾病，严格监管疫苗质量和冷链运输保存环境，加强生物安全和饲养管理等方面进行综合管理。

6 结论

通过试验A与B场结果表明，高的猪瘟母源抗体水平一般能维持2～3周时间，21日龄后，猪瘟母源抗体迅速下降，49～63日龄已经处于很低保护力。试验A与B场猪瘟活疫苗首次免疫接种时间分别为35和38日龄。

[1]王春花，孙元，仇华吉.新型猪瘟疫苗研究进展[J].生物工程学报，2013，29（7）：880-890.

[2]宁宜宝，吴文福.我国猪瘟流行新特点与疫苗免疫研究[J].中国兽药杂志，2011，45（8）：33-37.

（编辑：郭玉翠）

S858.285.3

A

1002-1957(2016)04-0105-03

2016-05-26

北京三元种业科技股份有限公司自立课题（SYZYZ2015 0005）

许光勇（1985-），男，江西金溪人，兽医师，执业兽医师，在读博士研究生，主要从事规模化猪场生产管理和猪病防控研究. E-mail：vetbbsc@163.com