醋柳黄酮含量测定方法研究

周秋萍

醋柳黄酮含量测定方法研究

周秋萍

目的：建立合理的紫外分光光度法测定醋柳黄酮的含量。醋柳黄酮参考国家药品标准WS-10001-（HD-1311）-2003进行含量测定，其紫外吸光度为0.04～0.06，中国药典规定，含量分析时吸光度应满足0.3～0.7。方法：调整供试液的浓度为0.04mg/m l，运用比色法在430nm的波长处测定吸光度。结果：线性回归方程r＞0.99，吸收值为0.4751～0.5194，符合法规要求。结论：该方法科学合理、准确度高，适用于物料的质量控制。

醋柳黄酮；含量；紫外分光光度法

醋柳黄酮(flavoneshippophae，TFH)为黄色或棕黄色的粉末，其有效成分为槲皮素、异鼠李素[1]等黄酮类成分。醋柳黄酮为提取物，用于心脏病制剂的原料。因具有色原酮的刚性结构而难溶于水，在乙醇、甲醇、乙醚或醋酸乙脂中溶解，TFH易溶于碱性溶液，碱性条件下不稳定[2]。目前，醋柳黄酮参考国家药品标准WS-10001-（HD-1311）-2003进行含量测定。

1　材料与方法

1.1仪器与试剂梅特勒电子天平（厂家：梅特勒-托利多；型号：AB204-S，AB104-S），紫外可见分光光度仪（厂家：岛津，型号：UV2401；厂家：安捷伦，型号：Ag⁃ilent8453）；AR级无水乙醇（厂家：国药集团化学试剂有限公司，批号：20140301）；AR级三氯化铝（厂家：国药集团化学试剂有限公司，批号：20140301）。异鼠李素对照品（厂家：中国药品生物制品检定所，批号：111571-201101）。紫外分光检测条件：λ=430nm。

1.2溶液的制备

1.2.1标准溶液的制备。精密称取100℃干燥至恒重的异鼠李素适量，加无水乙醇制成每1m l含10μg的溶液。

1.2.2标准曲线的制备。精密量取对照品溶液2.0m l、3.0ml、4.0ml、5.0m l、6.0m l，分别置10ml量瓶中，各加5%三氯化铝无水乙醇溶液1ml，用无水乙醇稀释至刻度，摇匀，放置10分钟，以相应的试剂为空白，在430nm的波长处测定吸光度，以吸光度为X，浓度为Y，列出回归方程式。

1.2.3供试品溶液的制备。精密称取本品醋柳黄酮约0.1g，置100ml量瓶中，加无水乙醇适量，振摇使溶解（必要时微热），加无水乙醇至100ml，摇匀，精密量取5ml该溶液置25m l量瓶中，用无水乙醇稀释至25ml，摇匀。

1.2.4测定。各取2.0ml配制好的供试品溶液分别于两个10m l量瓶，加5%三氯化铝无水乙醇溶液1ml，用无水乙醇稀释至10ml，另取未加显色剂的等量供试品溶液为空白。放置10分钟，在430nm波长处测吸光度。计算含量，按干燥品计，含总黄酮苷元≥10.0%。线性回归方程：Y=bX+a

（X：醋柳黄酮供试品溶液的含量）

2　结果

2.1线性关系配制标准曲线溶液，放置10分钟，按照比色法（中国药典2000年版二部附录ⅣB），以相应的试剂为空白，在430nm的波长处测定吸光度，以吸光度为X，浓度为Y，列出回归方程式[3]。采用3批样品分别由两位分析人员进行试验。

A组线性回归方程如下，见图1。

（A-1）y=12.5347x-1.4422r=0.9992

（A-2）y=12.916x-0.731r=0.9984

（A-3）y=12.5347x-1.4422r=0.9992

B组线性回归方程如下，见图2。

（B-1）y=12.916x-0.731r=0.9984

（B-2）y=12.5347x-1.4422r=0.9992

（B-3）y=12.916x-0.731r=0.9984

图1　A组线性回归

图2　B组线性回归

2.2精密度取3个批号样品，各批号分别精密称取供试品溶液（3份）。计算含量及其相对平均偏差，要求不大于2.0。见表1。另一名分析员重新制备供试品溶液（相同3个批号样品），在另一台紫外分光光度仪上测定，计算此3份样品含量数据的相对平均偏差，要求不得大于2.0。见表2。根据国家药品标准WS-10001-（HD-1311）-2003可接受标准：按干燥品计算，总黄酮苷元不得少于10.0%，SD≤2.0，通过调整供试液的浓度为0.04mg/m l，检测结果显示样品符合现行质量标准。

表1　A组样品含量测定结果

3　讨论

调整供试液的浓度为0.04mg/ml测定醋柳黄酮的含量，线性回归方程r＞0.99，紫外分光光度吸收值为0.4751～0.5194，符合2010版中国药典的要求。A、B组6份样品的平均含量为13.0%，符合质量标准要求（含总黄酮苷元≥10.0%）。经过方法学研究，表明本方法具有良好的线性关系和精密度，为醋柳黄酮含量的质量控制提供了依据。此次方法的改进反映出紫外可见分光光度法在法规要求方面存在一定的差距，醋柳黄酮检测方法的准确性如采用高效液相色谱法是今后方法研究和开发的方向。

表2　B组样品含量测定结果

[1]蔡源源,王玮,邱瑞宝,等.高效液相梯度洗脱法测定醋柳黄酮中的主要成分[J].河南大学学报(医学版),2008,27(4):20-23.

[2]金邻豫,凌春生,王玮,等.醋柳黄酮在碱性条件下的稳定性研究[J].河南大学学报(医学版),2008,27(4):29-31.

[3]彭敏,汤艳群,梁惠明.HPLC法测定复方薄荷水杨酸酊中水杨酸的含量[J].甘肃医药,2015,34(1):9-11.

A

1004-2725（2016）12-0941-02

201108上海,上海市闵行区上海信谊天平药业有限公司质量控制部

作者：周秋萍，E-mail：qpzhou08@163.com