南昌实验小鼠肠道寄生虫调查

郭海宁，高宝荷，肖秋萍，陈茂金，刘立恒

（江西农业大学动物科学技术学院，江西南昌330045）

南昌实验小鼠肠道寄生虫调查

郭海宁，高宝荷，肖秋萍，陈茂金，刘立恒

（江西农业大学动物科学技术学院，江西南昌330045）

用饱和盐水漂浮检测法及剖检法对南昌3个动物房（Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组）3种日龄段（20～25、28～32、35日龄以上成年）的135只小鼠进行调查。粪检结果：被检小鼠感染球虫、线虫、绦虫的感染率分别为4.4%、11.1%和5.2%，以线虫最高；第Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组寄生虫总感染率分别为（16/45）35.6%、（10/45）22.2%和（4/45）8.9%。剖检结果：被检小鼠感染四翼无刺线虫、隐藏管状线虫、短膜壳绦虫的感染率分别为14.07%、5.2%、9.6%，以四翼无刺线虫最高；第Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组寄生虫总感染率分别为（19/45）42.2%、（16/45）35.6%和（4/45）8.9%。粪检、剖检结果均表明：以第Ⅰ组寄生虫感染率为最高，第Ⅲ组最低。3组3种年龄段小鼠寄生虫感染率20～25日龄为最低；28～32日龄及35日龄以上成年小鼠差异不大。

小鼠；寄生虫；调查

实验动物广泛应用于生物学、医学、畜牧兽医学、药学等诸多领域中。在开放环境饲养条件下的实验小鼠群中，常有各种寄生虫感染。Simmos（1964）、Flynn等（1965）和Eaton（1972）在实验小鼠中检出隐藏管状线虫、四翼无刺线虫和微小膜壳绦虫。蒋金书等（1984）在LACA小鼠中发现大量的微小膜壳绦虫。冉靖北等（1987）对615小鼠作了调查，查出四翼无刺线虫和隐藏管状线虫［1］。这往往会使小鼠的生理，生化等内环境发生一系列的变化，使实验研究受到干扰，甚至影响结论的正确性，从而降低科研的科学性、准确性及稳定性。另外，有些寄生虫还能引起人兽共患疾病，威胁实验人员的身体健康［2］。随着国家对实验动物质量要求的不断提高，对实验小鼠肠道寄生虫的调研也势在必行。为了解南昌市实验小鼠肠道寄生虫的感染情况，对南昌市内3个实验动物房小鼠进行了调查，报告如下。

1材料与方法

1.1动物小鼠，购自南昌3个实验动物房（Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组），每组又分20～25、28～32、35日龄以上成年3种日龄段，每日龄段15只，共135只，雌雄不限。

1.2器皿生物显微镜，放大镜（10倍），数码相机，玻片镊，载玻片，普通镊子（14 cm），眼科剪，眼科镊，方盘（16×22 cm），500 mL量筒，平皿（16 cm直径），小口试剂瓶（35 mL），擦镜纸，烧杯（250 mL），滴管（胶头），全套寄生虫虫卵分离器皿，专用配套小鼠笼具。

1.3药品饱和食盐水本实验室配置。

1.4粪便采集及虫卵检查将每只小鼠置于干净的笼内，待小鼠排出粪便10～12粒，用普通镊子拾起于烧杯内，用胶头滴管吸取少许饱和食盐水湿润5～10 min，用玻棒捣碎拌成糊状，续加40 mL饱和食盐水搅拌均匀后倒入小口试剂瓶内且瓶口形成凸面，静置20 min，载玻片中央触及凸面迅速翻转，加盖玻片置16×10倍显微镜下逐行寻找虫卵或卵囊，出现虫卵或卵囊后数码照相并记录小鼠患寄生虫病的阴阳性数。

1.5剖检小鼠分离虫体脱臼法处死小鼠于方盘内，剖检小鼠，取整个肠管并纵向剪开，胶头滴管吸清水冲洗肠管内虫体及粪便于平皿内，用手轻轻碾碎成团粪便，加适量清水沉淀15 min倾上清留沉淀，重复加清水沉淀2次，平皿置黑色底板上，用10倍放大镜寻找白色虫体，用胶头滴管吸取虫体于载玻片上置显微镜下观察识别虫种。

1.6虫卵、虫体大小测量及鉴定用测微法［3］在10×10倍、10×4倍显微镜下测量虫卵或卵囊以及虫体大小。虫卵种属的鉴定依据虫卵形态、大小、颜色、卵壳和内容物的典型特征，比对相关资料确认［4-6］。

1.7感染率的计算感染率（%）=感染数÷总数× 100%。

2结果

2.1寄生虫种类被检小鼠肠道寄生有球虫，隐藏管状线虫，四翼无刺线虫，短小膜壳绦虫4种。四翼无刺线虫为优势虫种，感染率为46.67%（见表2）。

2.2粪检小鼠体内寄生虫情况被检小鼠感染球虫、线虫、绦虫的感染率分别为4.4%、11.1%和5.2%，以线虫最高；第Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组寄生虫总感染率分别为（16/45）35.6%、（10/45）22.2%和（4/45）8.9%，以第Ⅰ组为最高，第Ⅲ组最低；3组3种日龄段小鼠寄生虫感染率均以20～25日龄为最低；28～32日龄及35日龄以上成年小鼠差异不大（见表1）。

表13个实验动物房小鼠粪检情况

2.3剖检小鼠体内寄生虫情况被检小鼠感染四翼无刺线虫、隐藏管状线虫、短膜壳绦虫的感染率分别为14.07%、5.2%、9.6%，以四翼无刺线虫最高；第Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组寄生虫总感染率分别为（19/ 45）42.2%、（16/45）35.6%和（4/45）8.9%，以第Ⅰ组最高，第Ⅲ组最低；3组3种日龄段小鼠寄生虫感染率20～25日龄为最低；28～32日龄及35日龄以上成年小鼠差异不大（见表2）。

表23个实验动物房剖检情况

2.4粪检、剖检情况粪检法没有或很少发现隐藏管状线虫虫卵，剖检法观察不到球虫；小鼠线虫、绦虫的感染率，剖检法比粪检法稍高些；组别间均以第Ⅰ组最高，第Ⅱ组次之，第Ⅲ组最少，3组3种年龄间以20～25日龄为最低，28～32日龄及35日龄以上成年小鼠差异不大。

3分析与讨论

3.1被检小鼠4种虫体特性对检测方法的影响

本次调查被检小鼠肠道寄生虫有镰形艾美球虫、隐藏管状线虫、四翼无刺线虫和短小膜壳绦虫4种。它们均有一定的特性，了解这些特性有助于调查数据的准确性。

3.1.1镰形艾美球虫是原生动物，在小鼠结肠或盲肠细胞内形成合子后进入肠道，随小鼠粪便排出体外，卵囊大小为22.5×18.2 μm，感染7 d后通过粪检方法检测。

3.1.2隐藏管状线虫是常见小鼠蛲虫，雌虫长3.4～5.8 mm，雄虫较短，1.1～1.5 mm，肉眼可见。小鼠吞食虫卵后，在小肠中释放出幼虫，24 h内移行至盲肠。在盲肠停留10～11 d，发育成熟，交配。随后雌虫移行至大肠，在小鼠会阴皮肤和毛上产卵后离开宿主，粪便中不一定有虫卵，感染13～15 d后通过剖检方法检测。

3.1.3四翼无刺线虫是常见的小鼠的另一种蛲虫，雌虫体长2.6～4.7 mm，雄虫稍短，颈部翼膜发达；虫卵呈纺锤状，壳薄，大小为90×41 μm。感染23～25 d后通过粪检或剖检方法检测。

3.1.4短小膜壳绦虫俗名侏儒绦虫，是已知惟一可有直接生活史，也可有间接生活史。成虫长度可由7～100 mm变化不定。平均长20～40 mm，宽1 mm。头节球状，长有4个吸盘。虫卵大小为50～55×37～47 μm。卵圆形，卵壳薄而无色。卵内胚胎球形，壁薄。每极有一节突，从此长出6根细极丝。六钩蚴具3对小钩。11～16 d后通过粪检或剖检方法检测。

3.2实验小鼠等级区分根据国家标准［7］规定，在实验小鼠的等级分类中取消普通级，而分为清洁级、无特定病原体级和无菌级。清洁级小鼠中必须排除体外寄生虫、弓形虫和全部蠕虫感染。本次调查发现南昌3个动物房小鼠均有球虫、线虫及绦虫感染，作为清洁级实验小鼠尚需加强管理，以控制实验小鼠寄生虫感染。

3.3小鼠感染寄生虫的原因及预防实验小鼠饲养在窄小的笼具中，排泄物和污浊的空气易造成呼吸道、消化道疾病的传播；物质条件的低劣、食物供应不稳定，使实验鼠体质下降，抵抗力降低。小鼠身体素质下降及实验小鼠管理不当的特点，是小鼠感染寄生虫的主要原因。建议笼养的小鼠，应加强饲养管理，合理安排换窝时间，加强垫料消毒管理，减少感染。有条件的可通过生物净化手段引进清洁级以上小鼠并在屏障系统内进行饲养和繁殖；定期对饮水、饲料、垫料及紫外灯、消毒锅等的消毒效果进行检测，对室内落下菌及菌群进行分析，确保实验动物的质量。

［1］高诚，邱新美.实验小鼠肠道寄生虫观察［J］.上海农学院学报，1990，02：125-130.

［2］李超，郑安洁，张强，等.实验小鼠体内寄生虫感染情况调查［J］.中国寄生虫病防治杂志，2005，02：163-164.

［3］孔繁瑶.家畜寄生虫学［M］.北京：农业出版社，1981.

［4］徐彩云，张大维，邴国强，等.实验小动物艾美球虫概述［J］.中国比较医学杂志，2004，05：66-68.

［5］马超锋，史柯，高庚渠，等.实验鼠类肠道寄生虫调查与分析［J］.中国畜牧兽医，2008，35（02）：75-77.

［6］卢静.实验动物寄生虫学［M］.北京：中国农业大学出版社，2010.

［7］中华人民共和国国家标准.实验动物寄生虫学等级及监测［S］.GB/TI4922.1-2001.

S852.71

B

0529-6005（2016）08-0117-03

2015-02-04

郭海宁（1991-），男，硕士生，从事特种经济动物饲养与疾病防治研究，E-mail：465440658@qq.com

刘立恒，E-mail：lihengliu0714@163.com